Разное

Мотор лада гранта: Стартовали продажи Lada Granta с новым мотором: известны цены — Motor

Содержание

LADA Granta Cross – надежнее, выше и гораздо тише

LADA Granta Cross – знакомый незнакомец. Он унаследовал лучшие семейные достижения и при этом стал выше, надежнее, безопаснее, красивее и… тише. Отличную шумозоляцию, непривычную для максимально бюджетных автомобилей, отметили абсолютно все эксперты еще на допродажных тест-драйвах.

Еще одно качество, которое порадовало даже самых придирчивых водителей, это проходимость. Даже стандартная LADA Granta могла соперничать с некоторыми кроссоверами по своим внедорожным качествам. А новая Lada Granta Cross пошла, точнее поехала, еще дальше. Увеличены углы въезда и съезда, угол рампы, а дорожный просвет составляет 198 мм. Подвеска отрабатывает значительные погрешности дороги (и даже того, что этим словом назвать язык не поворачивается) уверенно, комфортно и тихо.

Будучи потомком уже хорошо знакомых нам семейств Kalina и Granta, этот автомобиль имеет все те же двигатели: 8-клапанный мощностью 87 л.с. и 16-клапанный мощностью 106 л.с. Однако теперь мотор снабжен облегченной шатунно-поршневой группой. Как пишет один из экспертов по ремонту LADA, огромным преимуществом обновленного двигателя стал переход на поршни с увеличенными выемками под клапаны, что исключает «встречу» поршней с клапанами и крайне неприятные и небезопасные последствия этого. То есть, благодаря улучшенной конструкции мотора, LADA Granta Cross является более безопасным и надежным по сравнению с предшественниками.

С 8-клапанным двигателем меньшей мощности в паре идет механическая коробка передач, с 16-клапанным есть выбор между механикой и четырехступенчатым роботом. Выпуск комплектации с автоматом не позволил бы модели остаться в рамках бюджетной.

Зато LADA Granta Cross даже в базовой комплектации снабжена климат-контролем, а значит, путешествовать на ней будет комфортно.

Из приятных дополнений также: круиз-контроль с ограничителем скорости, датчики дождя и света, парктроник и ГЛОНАСС. Особо хочется отметить великолепную функцию обогрева лобового стекла, очень актуальную в нашем регионе.

Любителей путешествий, рыбалки, поездок на дачу, а также тех, кто использует автомобиль для работы, порадует практичный багажник, и заднее сиденье, которое можно сложить полностью или по частям.

Осталось сказать пару слов о дизайне – «цельнокройный» вид передней части, когда фары, решетка радиатора, противотуманки и бампер смотрятся единым и весьма привлекательным целым, 15-ти дюймовые легкосплавные диски и пластиковый обвес, умеренное количество акцентов оранжевого цвета в отделке салона и торпедо – таков портрет нового LADA Granta Cross.

LADA Granta Cross отличный претендент на то, чтобы поехать вместе с Вами, куда бы Вы ни собирались. Пройдите тест-драйв прямо сейчас, и Вы убедитесь в этом сами!

Какие двигатели ставят на Ладу Гранту

На комплектацию «Стандарт» предусмотрена установка двигателя Ваз 11183, объем которого составляет 1,6 литра, а мощность около 80,9 лошадиных сил. При 2 900 оборотов двигателя в минуту доступен крутящий момент в 120 Н. м. Стоит также отметить, что таким двигателем сейчас комплектуются модели Лада Приора и Лада Самара.

Мотором Ваз 21116 планируется оснащать модели Лады Гранты «Люкс» и «Норма».

Данным двигателем планируется оснащение моделей Лады Гранта «Люкс» и «Норма». Мотор является модификацией двигателя Ваз 11183. В двигателе на 39% уменьшена масса ШПГ. От базового модернизированный мотор отличается новым приводом распределительного вала, модернизированной системой охлаждения блока двигателя, а прокладка головки цилиндров является металлической. Преимуществом модифицированного мотора является то, что головка блока цилиндров проходит термообработку, которая значительно ее упрочняет. На дроссельной заслонке установлен электропривод, который является отличительной характеристикой всех переднеприводных автомобилей LADA. После проведенной модернизации выросла также и мощность двигателя на 10 лошадиных сил. При 3 800 оборотов в минуту доступен крутящий момент 140 Н. м. Такого показателя удалось добиться благодаря снижению механических потерь. Это значительно уменьшило расход топлива и снизило выбросы углекислого газа в атмосферу, что позволяет уменьшить негативное влияние на окружающую среду. В концерне АвтоВАЗ гарантируют пробег двигателя не менее 200 000 километров, такой же гарантийный пробег дается и на «гейтсовский» ремень, которым оснащен модернизированный двигатель.

Мотор 21126 мощностью 98 лошадиных сил и объемом 1,6 литра предназначен для комплектации моделей «Люкс +» и «Люкс».

Модификации Лады Гранты «Люкс +» и «Люкс» будут комплектоваться только модифицированным двигателем ваз 21 126 мощностью 98 лошадиных сил и объемом 1,6 литра. На каждый цилиндр предусмотрено 4 клапана с гидротолкателями и облегчённая ШПГ. Мотор также оснащается специальным «гейтсовским» ремнем, на который дается гарантия пробега более 120 000 км, а при реальной эксплуатации его ресурс составляет более 200 000 км. Данный ремень очень хорошо зарекомендовал себя на Ладе Калине и Ладе Приоре. Слабыми местами двигателя можно назвать опорный и натяжной ролик, кроме этого очень слабой является помпа. Также при обрыве ремня ГРМ очень часто повреждаются клапана и ЩПГ.

Навигация по записям

Новая Lada Granta поедет на старых моторах

В конце августа на Московском автосалоне «АвтоВАЗ» представит новое семейство Lada Granta в четырех кузовах – седан, лифтбэк, универсал и хетчбэк. Главное отличие – дизайн передней части капота в Х-стиле, как у Lada Vesta. Но у Granta боковых выштамповок в том же стиле не будет.

Моторы и коробки передач у моделей новой Granta будут такими же, как у предшественников – снятых летом с производства седана и лифтбэка Granta и универсала и хетчбэка Kalina, рассказали «Ведомостям» топ-менеджеры двух дилерских компаний Lada со ссылкой на письмо «АвтоВАЗа». «Ведомости» ознакомились с этим письмом.

У новой Granta будут 1,6-литровые двигатели мощностью 87, 98 и 106 л. с. и три вида коробок передач: механическая, роботизированная или автоматическая.

Представитель «АвтоВАЗа» от комментариев отказался.

То, что «АвтоВАЗ» решил в новой Granta сохранить моторы и трансмиссии предшественников, соответствует главной идее – провести фейслифтинг с минимальными затратами, комментирует один из дилеров. К тому же сами агрегаты «проверенные, беспроблемные», добавляет другой.

Новые агрегаты могут появиться у автомобиля при смене платформы, комментирует гендиректор «Автостата» Сергей Целиков. Но разработка новой занимает много времени и стоит около $1 млрд, отмечает эксперт. Другой повод для смены агрегатов – длительное существование модели на рынке. Например, Volkswagen Golf выпускается более 40 лет. За это время сменилось несколько поколений автомобиля, поменялись требования к агрегатам, соответственно, они неоднократно менялись, говорит эксперт.

Но чаще всего – раз в 3–4 года – автоконцерны идут на фейслифтинг, продолжает Целиков. «Меняется экстерьер и интерьер, что-то модернизируется, – говорит эксперт. – Агрегаты, как правило, не затрагиваются». И «АвтоВАЗ» с Granta вполне ожидаемо пошел по этому пути, отмечает эксперт. Изменение платформы, агрегатов привело бы к удорожанию автомобиля, а для Granta вопрос цены критически важен, ведь это лоукост-сегмент, поясняет он. В той же логике произошло и объединение кузовов под одним именем, ведь Granta и Kalina были сделаны на одной платформе, добавляет Целиков.

ГБО в Перми, установка газового оборудования на авто

Сегодня все чаще можно встретить автовладельцев, отдавших свое предпочтение газовому оборудованию.

Представляя собой газ-дозирующую автомобильную систему, ГБО 4 поколения увеличивает показатели мощности и эффективности авто. Поскольку вместо бензина становится возможным использовать сжиженный нефтяной или природный газ, вы экономите на топливе. Встраиваемое поверх бензинного оборудовани ГБО на авто можно применять опционально, благодаря переключателю, позволяющему в любое время перевести авто на газ или бензин.

Основным направлением деятельности нашей компании является продажа, установка, обслуживание газового оборудования на авто. Именно у нас вы можете приобрести ГБО 4 и 3 поколения, отличающееся способом распределенного впрыска газа, для установки на авто с бензиновой топливной системой. 

Как работает газобаллонное оборудование?

Применение газа на авто значительно повышает эффективность работы транспорта.

Пропан или бутан проходит по мультиклапану, поступая в газовую магистраль, отличающуюся высоким давлением, в редуктор. В нем жидкая фракция преобразуется в газообразную, при этом происходит подогрев и ли охлаждение газа до оптимальной температуры. После этого газ проходит по трубопроводу с низким давлением в газовые форсунки и затем поступает во впускной коллектор авто.Сегодня мы готовы предложить своим клиентам газовое оборудование 4 поколения, которое отличается схожестью работы ДВС на бензине. 

Преимущества которое вы получаете если используете газовое оборудование 4 поколения для автомобилей

В основном газобаллонное оборудование для автомобилей пользуется большой популярностью за счет значительной экономии на топливе.

  1. Сравните, 1 л смеси из пропан-бутана почти в два раза дешевле 1 л бензина.
  2. Масло остается чистым более продолжительное время из-за отсутствия копоти и нагара при сгорании газа.
  3. С ГБО 4 поколения автомобиль превращается в битовливный, а потому водитель может выбирать топливо в зависимости от ситуации. Благодаря мобильности газобаллонной системы, вы значительно  увеличиваете время работы авто.
  4. Кроме того, можно привести ряд причин, по которым следует использовать газ: легкое смешивание с воздухом, исключение вредных примесей в составе, низкое содержание вредных веществ в выхлопах и т.д.
  5. Все это значительно увеличивает ресурс вашего транспортного средства и позволяет наслаждаться ездой в течение длительного времени используя газовое оборудование 4 поколения.

в  2013 году премьер министр России Д. А. Медведев  подписал указ о переводе 50% общественного транспорта на ГБО. В связи с этим смело можно утверждать что газовое оборудования для автомобилей становится все более популярным и высоко оценивается на различных уровнях.

Компания АвтоМастерГаз в Перми поможет вам перейти на газ. 

производителей и пользователей полупроводников образуют группу, стремящуюся к финансированию микросхем

Полупроводниковые компании и крупные предприятия, использующие микросхемы, сформировали коалицию, чтобы добиться федерального финансирования исследований и производства полупроводников в США на десятки миллиардов долларов.

Новая группа, «Коалиция полупроводников в Америке», объявила о своем создании во вторник на фоне глобального дефицита полупроводников, который привел к сбоям во всей экономике. В его состав входят производители микросхем, такие как Intel, Nvidia и Qualcomm, и компании, которые полагаются на полупроводники, такие как Amazon Web Services, Apple, AT&T, Google, Microsoft и Verizon.

Коалиция призывает Конгресс выделить 50 миллиардов долларов на исследования и производство полупроводников, что президент Байден предложил как часть своего инфраструктурного пакета стоимостью 2,3 триллиона долларов.

«Лидеры из широкого круга критических секторов экономики США, а также большая и двухпартийная группа политиков в Вашингтоне признают важную роль полупроводников в нынешней и будущей силе Америки», - сказал Джон Неуффер, президент и исполнительный директор торговой группы «Ассоциация полупроводниковой промышленности».

В письме лидерам Конгресса новая коалиция отметила нехватку полупроводников и заявила, что в долгосрочной перспективе федеральное финансирование «поможет Америке создать дополнительный потенциал, необходимый для создания более устойчивых цепочек поставок, чтобы гарантировать, что критически важные технологии будут там, когда они нам нужны ».

Дефицит остро ощущается в автомобильной промышленности, что вынуждает автопроизводителей простаивать заводы. В прошлом месяце Ford Motor заявила, что ожидает, что дефицит сократит производство автомобилей примерно на 50 процентов во втором квартале и снизит прибыль компании примерно на 2 доллара.5 миллиардов в этом году.

В новую коалицию не входят автопроизводители, у которых есть собственные идеи о том, как правительство должно стимулировать отечественное производство полупроводников. В письме лидерам Конгресса на прошлой неделе группы, представляющие автомобилестроителей, поставщиков автомобилей и рабочих, выразили поддержку предложению г-на Байдена на сумму 50 миллиардов долларов, но подчеркнули необходимость увеличения производственных мощностей для автомобильных чипов в рамках этих усилий.

В письме - от Американского совета по автомобильной политике, Ассоциации производителей автомобилей и оборудования и Объединенного профсоюза работников автомобильной промышленности - предлагалось предоставить «конкретное финансирование для полупроводниковых предприятий, которые обязуются выделить часть своих мощностей на производство чипов автомобильного класса.

В письме лидерам Конгресса в прошлом месяце группы торговли технологиями выступили против выделения новых производственных мощностей для конкретной отрасли, заявив, что такой шаг будет означать «беспрецедентное вмешательство на рынок».

Структурная динамика спирали миозинового реле по данным ЭПР и FRET с временным разрешением

Реферат

Мы использовали два дополнительных метода спектроскопии с временным разрешением, диполярный электронно-электронный резонанс и флуоресцентный резонансный перенос энергии, чтобы определить конформационные изменения в единственном структурном элементе моторного домена миозина, релейной спирали, до и после восстановительного удара.Два мутанта с двойным Cys метили оптическими зондами или спиновыми метками и определяли межзондовые расстояния. Оба метода разрешили два различных структурных состояния миозина, соответствующие прямым и изогнутым конформациям релейной спирали. Изогнутое состояние было занято только после добавления нуклеотидов, что указывает на то, что релейная спираль, как и вся миозиновая головка, изгибается в ходе восстановления. Однако насыщение миозина нуклеотидом, приводящее к единственному биохимическому состоянию, не приводило к единому структурному состоянию.Как прямые, так и изогнутые структурные состояния релейной спирали были заняты, когда в активном сайте были связаны либо аналоги АТФ (ADP.BeF x ), либо аналоги ADP.P i (ADP.AlF 4 ). Большая популяция была обнаружена в изогнутом структурном состоянии, когда был связан постгидролизный аналог ADP.AlF 4 . Мы пришли к выводу, что изгиб эстафетной спирали в ходе восстановления не требует гидролиза АТФ, но ему способствует. Более узкое распределение расстояний между зондами показывает упорядочение релейной спирали, несмотря на ее изгиб, во время такта восстановления, обеспечивая дальнейшее понимание динамики этого структурного перехода, преобразующего энергию.

Миозин - это молекулярный мотор, который генерирует силу на актин при сокращении мышц, перемещении клеток и внутриклеточном движении. Миозин работает циклически, дважды за цикл меняя свою структуру, производя силовой удар и восстановительный удар. Эти структурные изменения модулируются связыванием и гидролизом АТФ. Рентгеновские кристаллические структуры миозина в различных биохимических состояниях, захваченные аналогами нуклеотидов, которые, как считается, имитируют структурные промежуточные соединения миозина, предоставляют информацию о молекулярной организации и чувствительности к связыванию нуклеотидов, но молекулярные механизмы структурных переходов в растворе остаются неизвестными.Более того, взаимосвязь между связанным нуклеотидом и кристаллической структурой миозина не совсем согласована. Например, две различные кристаллические структуры были получены для миозина в комплексе с нуклеотидным аналогом ADP.BeF x (1, 2). Неясно, отражают ли эти различия внутреннее свойство миозина, или они просто возникают из-за различий в условиях кристаллизации. Как недавно было сделано в обзоре (3), для получения дополнительных сведений требуется сайт-ориентированное маркирование и спектроскопия с использованием кристаллографических данных в качестве отправной точки.

На основании кристаллических структур миозина (4–6) и спектроскопии (7) было предложено, что домен, связывающий легкую цепь, вращается относительно каталитического домена, заставляя миозиновую головку выпрямляться при силовом ударе и изгибаться. ход восстановления (рис. 1 A ). Эти же кристаллические структуры предполагают, что этот переход между прямой (M *) и изогнутой (M **) структурами отражает удивительно похожий переход в релейной спирали (рис.1 B ), α-спирали длиной 4,7 нм, которая связывает сайт связывания нуклеотидов с доменом легкой цепи через домен-конвертер (4, 5).Цель настоящего исследования - проверить эту гипотезу непосредственно в растворе во время восстановительного инсульта.

Рис.1.

Предлагаемая координация домена легкой цепи и релейной спирали. ( A ) Миозин S1 связан с актином (коричневый) в состояниях до восстановления (M *, S1 зеленый) и после восстановления (M **, S1 красный) (3). ( B ) Миозиновый моторный домен, наложение кристаллических структур 1FMV (M *, релейная спираль, зеленый) и 1VOM (M **, релейная спираль, красный), демонстрирующие предполагаемый изгиб релейной спирали.Оранжевый указывает на спроектированные участки маркировки, показывая прогнозируемое сокращение расстояния между 639 и 498 (голубые стрелки) и между 515 и 498 (пурпурные стрелки) во время такта восстановления.

Мы сконструировали два мутанта миозина с двойным Cys Dictyostelium discoideum, с одним сайтом мечения, расположенным на С-конце релейной спирали (K498C), а другим внутри стабильных спиралей в нижнем 50K-домене (D515C или A639C) (рис. B ). Эти цистеины были помечены либо нитроксидной спиновой меткой, либо донорно-акцепторной парой.Затем мы измерили межзондовые расстояния с помощью ЭПР с временным разрешением [диполярный электронно-электронный резонанс (DEER)] и FRET с временным разрешением (TR-FRET) для определения структурных состояний релейной спирали в различных биохимических состояниях миозина.

Сайт-направленная спектроскопия ранее использовалась для обнаружения нуклеотид-зависимых структурных переходов в миозине. Флуоресценция мутантов миозина с одним Trp (9, 10) и ЭПР спиновых меток, прикрепленных к сайтам с одним Cys (11, 12), показали нуклеотид-зависимые изменения в локальном окружении меченых сайтов, и предыдущие исследования FRET (8, 13) ) предоставили информацию о структуре всей миозиновой головки, но ни одно из этих исследований не разрешило структурные состояния отдельного структурного элемента внутри миозина.В настоящем исследовании мы использовали ЭПР с временным разрешением и TR-FRET для получения структурного разрешения, необходимого для обнаружения движения, беспорядка и конформационной гетерогенности в пределах одного субдомена миозина, информации, необходимой для выяснения механизма междоменного взаимодействия и принципов энергии. трансдукция в миозине.

Результаты

Изгиб спирали реле, определяемый DEER.

DEER - это метод импульсного спинового эхо ЭПР, который обнаруживает зависящие от расстояния дипольные взаимодействия между парой электронных спинов (14).Из-за зависимости дипольного взаимодействия r −3 и детектирования с временным разрешением этот метод сообщает распределение спин-спиновых расстояний в образце с высоким разрешением в диапазоне от 2 до 6 нм (15). Спин-меченый миозин был захвачен в различных биохимических состояниях: M (апо), M.ADP, M.ATP (M.ADP.BeF x ) и M.ADP.P i (M.ADP.AlF ). 4 или M.ADP.V и ), а распределения межзондовых расстояний измеряли с помощью DEER (рис.2). Данные, полученные для M.ADP.AlF 4 и M.ADP.V i (улавливание биохимического состояния, аналогичного M.ADP.P i ), были практически идентичны, поэтому в данном исследовании приводится только первый аналог. . Для обоих миозиновых мутантов связывание нуклеотидов вызывает более быстрый распад и колебания амплитуды спинового эха, что прямо указывает на уменьшение расстояния между зондами. По сравнению с состоянием апомиозина, ADP оказал наименьшее влияние на данные DEER, ADP.AlF 4 оказал наибольшее влияние и эффект ADP.BeF x (аналог АТФ) был промежуточным (рис. 2).

Рис. 2.

Перегиб спирали реле разрешен ОЛЕНЬЕМ. ( Left ) Данные DEER с поправкой на фон, полученные из указанных биохимических состояний, нормированные на постоянную глубину модуляции и смещенные по вертикали для ясности. ( Right ) Распределения расстояний, извлеченные из данных DEER (M и M.ADP: распределение по одному Гауссу, M.ADP.BeF X , M.ADP.AlF 4 : распределение по двум Гауссу). Параметры распределений приведены в таблице 1.

Сигналы спинового эха были смоделированы и подогнаны к экспериментальным данным с использованием гауссовых распределений расстояний (уравнение 1 ). В состоянии апо или с привязанным ADP одного гауссова распределения расстояний было достаточно для получения качественной подгонки. Добавление второго гауссовского распределения расстояний не улучшило подгонку (рис. S1), указывая на единственную конформацию релейной спирали (рис. 2). Расстояние между зондами было наибольшим в состоянии апо, и наблюдалось небольшое, но последовательное уменьшение расстояния при связывании АДФ.Когда миозин образовывал комплекс с ADP.BeF x или ADP.AlF 4 , удовлетворительные совпадения были получены только с двухгауссовым распределением расстояний, отражающим два структурных состояния миозина с более длинными и более короткими расстояниями между зондами (рис. S1). . Все длинные и короткие расстояния, извлеченные из индивидуальных подгонок сигналов спинового эха, были подобны между комплексами M.ADP, M.ADP.AlF 4 и M.ADP.Be.F x . Следовательно, сигналы, соответствующие этим биохимическим состояниям, были согласованы глобально, предполагая, что присутствовали одни и те же два состояния, M * и M ** (характеризующиеся одинаковыми средними расстояниями между зондами R * и R **) (рис.2 и таблица 1). Качество этих подгонок, судя по значениям χ 2 , было сравнимо с качеством индивидуальных подгонок без ограничений, что указывает на наличие только двух различных структурных состояний (рис. 3 A и C ).

Таблица 1.

Распределение расстояний, R (FWHM) и мольные доли, наблюдаемые в каждом биохимическом состоянии, обнаруженном с помощью DEER (рис. 2)

Рис 3.

Подгонка сигналов DEER в различных биохимических состояниях миозина (мутант 639: 498).( A ) Каждый сигнал настраивался независимо. ( B ) Все сигналы были согласованы глобально с использованием одного набора параметров: R *, R **, FWHM *, FWHM **. ( C ) Все сигналы были согласованы глобально с использованием одного набора параметров, за исключением того, что FWHM * для M.ADP могло отличаться от такового для M.ADP.BeF x и M.ADP.AlF 4 . Мы пришли к выводу, что два структурных состояния M * и M ** имеют одинаковые средние расстояния R * и R ** во всех трех биохимических состояниях, но ширина FWHM * распределения M * меньше в биохимических состояниях нуклеотидных аналогов.Параметры, полученные на основе этих наилучших совпадений, сведены в Таблицу 1.

Релейная спираль становится более упорядоченной во время восстановительного инсульта.

Нуклеотидные аналоги АТФ и АДФ.P i явно вызывают не только более высокие скорости распада, но и более выраженные колебания затухания спинового эха (особенно для 639: 498, рис. 2 Нижний , что указывает на более узкое распределение расстояний между зондами). по сравнению с состояниями, связанными с апо или ADP (рис. 2, , справа, ).3, было невозможно удовлетворительно подогнать данные, предполагая, что ширина распределений не изменялась во время структурного перехода миозина (сравните Рис. 3 A и B ). Если ширину распределения M * можно было варьировать, качество общих подгонок было эквивалентно качеству подгонок без ограничений (сравните Рис. 3 A и C ). Мы обнаружили, что структурная гибкость (характеризуемая шириной распределения расстояний) в состоянии M * была меньше в состоянии M.Комплексы ADP.BeF x и ADP.AlF 4 по сравнению с комплексом M.ADP. Ширина распределения расстояний была еще меньше в структурном состоянии M ** (Рис. 2 Правый и Таблица 1).

Изгиб спирали реле, определяемый TR-FRET.

FRET определяет расстояние между донорными и акцепторными зондами, связанное за счет безызлучательной передачи энергии. В результате этой передачи энергии скорость затухания флуоресценции донора увеличивается пропорционально r -6 .В эксперименте TR-FRET донор возбуждается наносекундным лазерным импульсом, его флуоресценция детектируется с субнаносекундным разрешением, а время жизни флуоресценции τ используется для расчета расстояния r . Основным преимуществом TR-FRET по сравнению с обычным FRET (где измеряется только интенсивность стационарной флуоресценции) является способность разрешать множественные конформации белков с различными межзондовыми расстояниями, что приводит к различным временам жизни (16). Сигналы флуоресценции только донора [5 - ({2 - [(иодацетил) амино] этил} амино) нафталин-1-сульфоновая кислота (IAEDANS)] (рис.S2) и донорно-акцепторные [IAEDANS-4 - ((4- (диметиламино) фенил) азо) бензойная кислота (DABCYL)] - меченые мутанты миозина были приобретены в различных биохимических состояниях: апо, M.ADP, M.ADP.BeF x (M.ATP) и M.ADP.AlF 4 (M.ADP.P) (Рис.4 слева ). В отличие от DEER, TR-FRET был нечувствителен к связыванию ADP (рис. 4), вероятно, из-за более низкого разрешения по расстоянию FRET, а также большего размера и большей гибкости прикрепленных оптических зондов. Однако связывание ADP.BeF x и ADP.AlF 4 в миозин существенно уменьшил время жизни донора, что указывает на увеличение эффективности FRET и сокращение среднего расстояния между зондами (рис. 4), как наблюдалось с помощью DEER (рис. 2). Сигналы донорной флуоресценции для всех четырех биохимических состояний были согласованы глобально (при условии наличия тех же двух структурных состояний: M * и M **) в соответствии с уравнениями. 2 - 6 (рис.4). На основании сравнения невязок и значений χ 2 для одно- и двухгауссовой аппроксимации (рис.S3) мы пришли к выводу, что одно структурное состояние заселяется в биохимических состояниях апо и M.ADP, а два структурных состояния заселяются связанными ADP.BeF x и ADP.AlF 4 . Мольные доли популяций миозина, межзондовые расстояния и распределения расстояний, извлеченные из подгонок, показаны на рис. 4 и в таблице 2.

Рис. 4.

Изгиб спирали реле разрешен TR-FRET. ( Left ) Флуоресцентные сигналы донорно-акцепторных мутантов миозина в указанных биохимических состояниях.( Правый ) Распределение расстояний, полученное путем подбора сигналов флуоресценции. Параметры распределений приведены в таблице 2.

Таблица 2.

Распределение расстояний, R (FWHM) и мольные доли, наблюдаемые в каждом биохимическом состоянии, обнаруженное TR-FRET (рис. 4)

Обсуждение

Целью данного исследования было определение структуры релейной спирали при динамическом миозин-нуклеотидном взаимодействии в растворе. Релейная спираль, важный элемент области миозина, генерирующей силу, соединяет сайт связывания нуклеотидов и конвертерный домен.Кристаллические структуры миозина демонстрируют две различные конформации релейной спирали, зависящие от связанного аналога нуклеотида. Широко распространено мнение, что переход между этими конформациями миозина, инициированный взаимодействием миозин-АТФ, является инсультом восстановления. В этом исследовании мы задаем следующие вопросы: сколько структурных состояний принимает релейная спираль в растворе? Есть ли прямая корреляция между состоянием нуклеотид-связывающего кармана и состоянием релейной спирали? Насколько жестка спираль реле? Что инициирует инсульт восстановления миозина, связывание АТФ или гидролиз АТФ? Мы использовали два дополнительных метода спектроскопии зонда, DEER и FRET, оба из которых используют импульсное возбуждение и детектирование с временным разрешением для получения структурного разрешения.Для обоих методов были использованы две пары сайтов мечения для триангуляции положений зонда в различных биохимических состояниях миозина и однозначного определения структурных состояний миозина.

Relay Helix принимает два структурных состояния в миозин-нуклеотидных комплексах.

Данные по DEER и TR-FRET очень хорошо согласуются (Таблица 3). Оба метода показывают наличие двух структурных состояний миозина (M * и M **) в одном биохимическом (миозин-нуклеотидный аналог) состоянии. Эти структурные состояния заселялись по-разному в зависимости от связанного аналога нуклеотида (ADP.AlF 4 , ADP.BeF x ). Апо миозин проявлял одно отчетливое структурное состояние, М. Биохимическое состояние миозин-АДФ проявляло одно структурное состояние, М *. Расстояние между зондами в состоянии M * было всего на ≈0,15 нм короче, чем в состоянии M, что указывает на незначительное изменение структуры релейной спирали после связывания ADP. Только DEER четко определяет структурные изменения между состояниями M и M *, вероятно, из-за его превосходного разрешения по расстоянию и меньшего размера спиновой метки по сравнению с зондами FRET.Разница в межзондовых расстояниях между структурными состояниями M * и M ** гораздо более выражена (≈0,5 нм), что отражает существенное изменение конформации релейной спирали. Мы пришли к выводу, что существует только два различных структурных состояния силогенерирующей области миозина в биохимических состояниях M.ATP и M.ADP.Pi, M * и M **. Это наблюдение разрешает споры, возникшие в результате наблюдения двух разных кристаллических структур одного и того же миозина в комплексе с одним и тем же аналогом нуклеотида (ADP.BeF x ) (1, 2). Наши результаты показывают, что оба структурных состояния заняты в растворе, поэтому структура, захваченная кристаллизацией, вероятно, зависит от конкретных экспериментальных условий, используемых для приготовления белка и роста кристаллов.

Таблица 3.

Межзондовые расстояния (нм) в состояниях миозина до восстановления (M *) и после восстановления (M **), определяемые различными методами

Генерирующая силу область миозина более упорядочена в структурном состоянии после восстановления.

Анализ распределения межзондовых расстояний в структурных состояниях M * и M ** показывает меньшую ширину в состоянии M ** удара после восстановления, что указывает на больший порядок в генерирующей силу области миозина. В соответствии с этими экспериментальными результатами, моделирование молекулярной динамики миозина (MD) показало уменьшение колебаний основной цепи в релейной спирали при переходе от M * к M ** (рис. 5). Напротив, MD не обнаружил значительного влияния этого перехода на колебания остова на других сайтах в более низком домене 50K, включая сайты мечения D515 и A639.N-концевая часть релейной спирали является продолжением петли переключателя II, важного структурного элемента нуклеотид-связывающего сайта миозина; переключатель II разомкнут в M * и замкнут в M **. Экспериментально наблюдаемое более узкое распределение расстояний в структурном состоянии M ** (рис. 2 и таблица 1), подтвержденное уменьшением среднеквадратичных колебаний основной цепи в моделировании МД, отражает закрытие переключателя II и более сильное связывание нуклеотидов.

Рис. 5.

Моделируемые колебания позвоночника в структурных состояниях до восстановления (зеленый) и после восстановления (красный).Существенные различия наблюдаются только в релейной спирали (остатки 465–499).

Связывание АТФ инициирует ход восстановления.

Наши результаты показывают, что ретрансляционная спираль реагирует на изменения состояния нуклеотидного связывающего кармана и идентифицирует ретрансляционную спираль как междоменный линкер, который передает изменения от активного сайта к конвертирующему домену миозина. Поразительно, но мы обнаружили, что с аналогом АТФ (ADP.BeF x ), связанным с активным сайтом, спираль реле миозина может принимать структурные состояния как до восстановления, так и после восстановления.В отличие от классической модели функции миозина, в которой гидролиз АТФ связан с восстановительным инсультом и служит его движущей силой, наши наблюдения показывают, что связывание АТФ играет решающую роль в восстановительном инсульте. Ход восстановления предшествует гидролизу и происходит при связывании АТФ в активном центре. Следовательно, гидролиз необходим не для подпитки цикла восстановления, а для облегчения выпуска продукта и продолжения цикла. Эта гипотеза была ранее предложена на основе МД-моделирования (17, 18) и кристаллических структур, которые предполагали, что переключатель II в нуклеотидном кармане должен быть закрыт, чтобы миозин находился в каталитически активной форме (5, 19).Эксперименты по релаксации с одиночными мутантами Trp и аналогами нуклеотидов (20) показали изменения собственной флуоресценции миозина после быстрого скачка температуры или давления. Это было связано с наличием равновесия между открытой (до восстановления) и закрытой (после восстановления) конформациями и использовалось для расчета констант равновесия между состояниями. Наши измерения расстояния обеспечивают необходимые размерные детали для разрешения двух сосуществующих структурных состояний и непосредственного определения положения релейной спирали в каждом из состояний.

DEER и TR-FRET дополняют друг друга.

Хотя оба метода используют импульсное возбуждение и детектирование с временным разрешением и одни и те же участки мечения, каждый из них имеет определенные преимущества. По сравнению с относительно простым экспоненциальным затуханием флуоресценции донора в экспериментах FRET, сложная форма сигналов модулированной интенсивности эха в DEER имеет более отчетливые спектральные особенности, которые можно использовать для оценки качества подбора, обеспечивая более высокое структурное разрешение. Еще одно преимущество DEER заключается в маркировке: меньший размер зонда и возможность использовать один и тот же зонд в обоих местах (по сравнению с парами донор-акцептор в FRET) упрощают подготовку образца и приводят к более надежной интерпретации данных.В частности, только DEER обнаружил незначительные (≈0,1 нм) изменения в структуре при связывании ADP, показал значительное уменьшение ширины распределения в состояниях M.ADP.BeF x и M.ADP.AlF 4 , и однозначно разрешили два структурных состояния в комплексах миозин-нуклеотидный аналог. Однако эксперименты TR-FRET могут проводиться при физиологических температурах и иметь на несколько порядков более высокую чувствительность, давая информацию о распределении расстояний в одном 50-нсекундном сигнале, обнаруженном с субнаносекундным разрешением.Таким образом, FRET может обеспечить это структурное разрешение в реальном времени во время биохимического переходного процесса. Кроме того, измерения FRET могут использоваться для установления верхнего предела скорости перехода между разрешенными конформациями, которая приблизительно обратно пропорциональна среднему наблюдаемому времени жизни флуоресценции. Например, две конформации, разрешенные в таблице 2, должны обмениваться медленнее, чем ≈10 8 с -1 .

Выводы

Мы разработали конструкции миозина для измерения индуцированной нуклеотидами динамики спирали реле миозина, важного структурного элемента в области генерирования силы, соединяющей сайт связывания нуклеотида и плечо рычага.Комбинируя мутагенез белков, сайт-направленное мечение, импульсную ЭПР-спектроскопию с высоким разрешением (DEER) и высокочувствительную флуоресцентную спектроскопию (TR-FRET), мы () обнаружили структурные изменения (изгиб и упорядочение) в спирали реле миозина в ответ на связывание аналога нуклеотида, ( ii ) разрешил два структурных состояния (прямое и изогнутое) релейной спирали в единственном биохимическом состоянии миозина со связанным аналогом нуклеотида, и ( iii ) обнаружил изменения порядка и межзондовых расстояний во время взаимодействие миозина с АТФ.Мы заключаем, что ( i ) изгиб (структурное состояние) релейной спирали только слабо связан с идентичностью связанного нуклеотида (биохимическое состояние), и ( ii ) изогнутое состояние релейной спирали частично заселено. сразу после связывания АТФ с миозином, не требуя гидролиза АТФ. Более широкое распределение межзондовых расстояний в состояниях предвосстановительного удара указывает на гибкость N-концевой части релейной спирали, когда петля switch II в сайте связывания нуклеотидов открыта.Эти результаты предоставляют прямую информацию о структурной динамике релейной спирали в миозине в растворе, обеспечивая понимание взаимодействия между активным сайтом миозина и областью, генерирующей силу.

Материалы и методы

Подготовка и маркировка белков.

Мутанты миозина D. discoideum были сконструированы и очищены, как описано (21). Для DEER белок был помечен спиновой меткой 4-малеимидо-2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси (MSL) путем инкубации 100 мкМ миозина с 600 мкМ MSL в течение 12 ч на льду, в результате чего мечение> 90% Cys, как измерено масс-спектрометрией и спектральной интенсивностью.Для FRET белок был помечен в два этапа. Сначала 50 мкМ миозина инкубировали с 45 мкМ донора (IAEDANS) в течение 12 часов. Затем этот белок разбавляли до 25 мкМ и инкубировали со 100 мкМ акцептором (DABCYL). После каждого этапа мечения непрореагировавшая метка удалялась с помощью спин-колонок для исключения размера (Pierce). Степень маркировки FRET, определяемая по поглощению красителя, обычно составляла 30-40% донора и 60-70% акцептора, причем метились практически все цистеины. Буфер для маркировки содержал 20 мМ Mops, 50 мМ KCl, 3 мМ MgCl 2 и 1 мМ EDTA, pH 7.5. Комплексы миозина с аналогами нуклеотидов получали, как описано (12). Если не указано иное, все эксперименты проводили при 20 ° C в буфере, содержащем 20 мМ N - (2-гидроксиэтил) пиперазин- N ' -3-пропансульфоновая кислота (EPPS), 6 мМ MgCl 2 и 1 мМ EGTA, pH 8,0.

Анализ АТФазы.

Активность миозин-АТФазы

измеряли в физиологическом буфере (Т = 25 ° C в 10 мМ Трис, 3 мМ MgCl 2 и 5 мМ АТФ, pH 7,5) в присутствии и в отсутствие актина по высвобождению неорганического фосфата ( 22).Зависимость активности миозин-АТФазы от концентрации актина была аппроксимирована уравнением Михаэлиса-Ментен для определения V max (активность насыщающего актина) и K m (концентрация актина при V = 0,5 V). max ) (подробности в таблице S1).

Распределение межзондовых расстояний.

Чтобы отразить гибкость в структуре белка, сигналы DEER и FRET моделировались с использованием набора распределений расстояний, а не набора дискретных расстояний.Предполагалось, что форма каждого распределения является гауссовой: где σ - стандартное отклонение, а FWHM - полная ширина на половине высоты.

ОЛЕНЬ.

Сигналы DEER с временным разрешением были получены с помощью спектрометра Elexsys E580 (Bruker Biospin), оснащенного диэлектрическим резонатором (MD-5; Bruker Biospin), с использованием четырехимпульсной последовательности DEER (23) с π / два импульса длительностью 16 нс. и импульс ELDOR длительностью 40–48 нс. Частота накачки была сосредоточена на центральном резонансе спиновой метки нитроксида, а наблюдаемая частота была установлена ​​на низкополевом резонансе на расстоянии 67 МГц.Температура во время сбора данных была установлена ​​на 65 ° К. Образцы миозина (50–75 мкМ) были быстро заморожены в жидком азоте перед помещением в спектрометр. Буфер содержал 20 мМ EPPS, 6 мМ MgCl 2 , 1 мМ EGTA и 10% глицерина (pH 8,0). Сигналы спинового эха анализировались с помощью программного пакета DeerAnalysis (24), который подгоняет моделированные сигналы DEER к данным, предполагая одно или два гауссовых распределения межзондовых расстояний (уравнение 1 ).

TR-FRET.

Флуоресценция AEDANS-миозина возбуждалась с помощью третьей гармоники микрочипового YAG-лазера с пассивной модуляцией добротности (NanoUV-355; JDS Uniphase), работающего с частотой следования импульсов 10 кГц и выбора с помощью длинного прохода 420 нм стеклянный фильтр.Чтобы избежать эффектов анизотропии, флуоресценцию пропускали через поляризатор, ориентированный под магическим углом. Сигналы флуоресценции регистрировались после каждого лазерного выстрела с помощью фотоумножителя Hamamatsu H5773-20 (время нарастания 0,78 нс) и регистрировались с помощью дигитайзера переходных процессов (Acqiris DC252) с разрешением дискретизации 0,125 нс. Функция отклика прибора (IRF) была получена с помощью рассеянного света при тех же настройках прибора, что и при измерении флуоресценции, за исключением того, что не было фильтра излучения и поляризация излучения была вертикальной.

Анализ данных TR-FRET.

Наблюдаемый сигнал флуоресценции только для донора F Dobs ( t ) от меченого миозина был подогнан с помощью моделирования F Dsim ( t ), состоящего из многоэкспоненциального распада F D ( т ), свернутый с IRF: где τ Di - времена жизни только донорной флуоресценции. Мы обнаружили, что две экспоненциальные составляющие ( n = 2 в уравнении. 2 ) было достаточно; то есть добавление третьего компонента к подгонке не уменьшило остаток или χ 2 . Для каждого биохимического состояния был проанализирован сигнал флуоресценции меченного донорно-акцепторным миозином перед сверткой, F DA ( t ), предполагая, что единственное изменение в F D ( t ) было повышенная скорость распада, вызванная переносом энергии k T = ∫ k Di [ρ ( r ) / R 0 i ] −6 dr , где ρ ( r ) - распределение донорно-акцепторных расстояний (ур. 1 ), k Di = 1 / τ Di и R 0 i - расстояние Ферстера, определяемое (уравнение S1 , рис. S4). Наблюдаемый сигнал донорно-акцепторной флуоресценции до свертки, F D + A ( t ), был принят как сумма трех членов: где X * и X ** ( X * + X ** = 1) - мольные доли миозина в состоянии до восстановления (прямая ретрансляционная спираль) и после восстановления (изогнутая ретрансляционная спираль), а X D - мольная доля меченного только донором миозина ( X D + X DA = 1).

Наблюдаемые сигналы флуоресценции в присутствии и в отсутствие акцептора были согласованы глобально (одновременно) смоделированными выражениями в уравнениях. 3 и 6 . Интенсивности A i , время жизни τ i , расстояния R * и R **, ширина FWHM * и FWHM ** и фракция X D меченного только донором миозина были связаны и изменяются одновременно. X ** (доля структурного состояния M **) варьировалась независимо для каждого сигнала в глобальной подгонке.

Подробнее см. SI Text .

Благодарности

Благодарим Юнис Сонг и Октавиана Корнеа за техническую помощь. Использованный инструмент флуоресценции с временным разрешением был вдохновлен многочисленными проницательными обсуждениями с Грегори Д. Гиллиспи из Fluorescence Innovations, Inc. Эта работа была поддержана грантами AR32961 (для DDT) и AR53562 (для YEN) Национального института здравоохранения Медицинский фонд Миннесоты (в YEN). Моделирование MD было выполнено с использованием вычислительных ресурсов института суперкомпьютеров Университета Миннесоты.

Сноски

  • 1 Кому может быть адресована корреспонденция. Электронная почта: ddt {at} umn.edu или yn {at} ddt.biochem.umn.edu
  • Вклад авторов: R.V.A., D.D.T. и Y.E.N. спланированное исследование; R.V.A., Y.V.T. и Y.E.N. проведенное исследование; I.V.N., S.E.B. и M.A.T. внесены новые реагенты / аналитические инструменты; Р.В.А. и Ю. проанализированные данные; и R.V.A., D.D.T. и Y.E.N. написал газету.

  • Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

  • Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.

  • Эта статья содержит вспомогательную информацию на сайте www.pnas.org/cgi/content/full/07106/DCSupplemental.

Black Fret объявляет первую партию лауреатов музыкальных грантов

Десять грантов в размере 10 000 долларов США были предоставлены 8 ноября остинским музыкантам из некоммерческой группы Black Fret.

Black Fret, организация, созданная в начале 2013 года как средство расширения возможностей местных музыкантов путем проведения мероприятий и выступлений только для членов группы, номинировала 20 участников из Остина, которые все получили наставничество, оплату концертов и распространение информации, даже если они не были в числе грантов. получатели.

Победители гранта 2014 года, объявленные во время первого ежегодного Black Ball Black Fret в The Paramount Theater, включают Эми Кук, Элизабет Маккуин, Эрин Айви, Джину Чавес, Грэм Уилкинсон, Линкольн Дарем, Mother Falcon, Quiet Company, Rocketboys и Wild Child. , который не присутствовал, чтобы принять награду из-за европейского турне.

«Черный шар был поистине потрясающим», - сказал в своем заявлении основатель Black Fret Колин Кендрик. «Вы можете почувствовать любовь и глубокое уважение наших участников к этим музыкантам, которых мы так дорожим.«

Большинство из 20 номинантов также исполнили 10-минутные сеты во время первого ежегодного гала. Среди дополнительных номинантов, которые выступили, были Дэнни Мэлоун, East Cameron Folkcore, Элиас Хаслангер, Эмили Белл, Jitterbug Vipers, Джонни Грей и Little Radar.

» Было невероятно, что 16 наших номинантов сыграли и увидеть, как наши номинанты, советники и участники собрались вместе таким прекрасным образом, чтобы поддержать нашу местную музыку на сумму 100 000 долларов и с большой любовью », - сказал Мэтт Отт, Black Соучредитель Fret и ведущий Black Ball в заявлении.

Члены Black Fret ежегодно платят 1500 долларов США за поддержку артистов, посещение эксклюзивных шоу и участие в голосовании по поводу того, кто ежегодно получает грант. Ежегодный процесс номинации артистов начинается в конце Black Ball и завершается в марте, когда организация объявляет свой список номинантов, и большинство из них выступят на будущих мероприятиях только для членов Black Fret.

Отт сказал во время «Черного бала», что надеется к следующему году поднять достаточно членских взносов, чтобы удвоить грант до 200 000 долларов.

Деньги гранта предоставляются артистам-победителям в 2015 году за написание, запись и исполнение новой музыки, а также за оказание общественных услуг другим некоммерческим организациям, по словам официальных лиц Black Fret. Все претенденты на гранты, независимо от того, выиграли они или нет, имеют право на следующий раунд грантов, сказал Отт во время мероприятия.

Штатная магнитола "Frets Grants": описание, установка и прошивка

Сегодня сложно представить машину без автомагнитолы. Сейчас такое устройство считается не роскошью, а очень важной составляющей современного автомобиля.В этой статье мы обсудим основные характеристики штатной магнитолы «Лада Грантс», а также правила и особенности ее установки и прошивки.

Вступительные замечания

С каждым годом представления о качестве и простоте использования автомобиля все больше меняются и улучшаются. Теперь вы можете не только получать удовольствие от вождения любимой машины, но и слушать там любимую музыку, различные радиопередачи, смотреть видео и даже интернет-пользователь. Конечно, все эти возможности сделают вашу жизнь комфортнее и удобнее.

Как известно, чем дороже автомобиль, тем качественнее в нем установлена ​​аудиосистема. То же можно сказать и об автомобиле «Lada Granta Suite». Штатное радио здесь будет самого высокого качества. Такой прибор обязательно удивит всех автолюбителей. Конечно, потому что многим придется по вкусу наличие огромной функциональной, надежной и безопасной операционной системы с очень удобным и качественно выполненным интерфейсом. Это устройство отлично вписывается в салон автомобиля и правильно выполняет все поставленные перед ним задачи.

Штатная магнитола «Лада Грантс»: особенности товара

Ни для кого не секрет, что аппарат выпустил отечественный производитель. Итак, никогда штатная отечественная аудиотехника не была такой качественной, современной и продвинутой. Штатные магнитолы «Lada Grants» выпускает очень популярный производитель в этой сфере - компания «* Itelma».

Рекомендуем

Как работает сайлентблок задний переднего рычага и сколько он служит?

Сайлентблок задний переднего рычага - один из составных элементов ходовой части автомобиля.Он относится к направляющим элементам подвески вместе с рычагами, выдерживающим колоссальные нагрузки колесами. Однако с этим товаром их много ...

Расход масла в двигателе. Шесть причин

Вряд ли можно найти автомобилиста, которого бы не волновал повышенный расход масла. Особенно раздражает, когда это происходит с другим новым мотором. Вот наиболее частые причины, которые приводят к расходу масла в двигателе ...

Как работает выхлопная система?

Выхлопная система предназначена для удаления продуктов сгорания из двигателя и вывода их в окружающую среду.Также должно быть обеспечено снижение шумового загрязнения до приемлемых пределов. Как и любые другие сложные устройства, эта система состоит из нескольких ...

Это устройство оснащено ЖК-экраном, но также имеет сенсорную систему управления. Несмотря на то, что дисплей выполнен по резистивной технологии, его нельзя назвать сильным минусом. Конечно, это создает небольшой дискомфорт при использовании водителей автомобиля, но зато устройство будет бесперебойно работать даже в самых тяжелых условиях, например, постоянных сильных морозах.

Штатная магнитола «Лада Грантс» имеет красивую цветовую схему и разрешение экрана, особенно если вспомнить, что оборудование отечественного производителя. Даже при ярком солнечном свете вы легко увидите все, что отображается на ЖК-экране. Следовательно, можно сделать вывод, что при солнечном свете видимость и читаемость экрана не нарушается. И это несравненное преимущество, свидетельствующее об отличном качестве русского радио.

Также стоит отметить интерфейс радио.Что еще более важно, он перевел, сделал очень простой и понятный стиль. Таким образом, каждый пользователь, даже новичок, сможет разобраться в системе управления и использования. По словам владельцев «Лада Грантс», это стандартное устройство действительно хорошо справляется со своими обязанностями, идеально и быстро, очень просто и удобно в использовании.

Технические характеристики

Каждый владелец транспортного средства знает, насколько важны для его работоспособности. Имея эту информацию, вы можете сразу составить представление о том, что вы получите в будущем.

Штатная магнитола «Лада Грантс» имеет следующие технические характеристики:

- объем внутренней памяти устройства 5341184 байт, объем памяти 128 мегабайт;

- магнитола способна поддерживать музыкальные форматы MP3, WMA, WAV

- устройство работает с процессором SIRF Atlas-V, AT551;

- встроенное радио качественное радио;

- также, что очень важно, устройство имеет встроенный видеовход для камеры;

- с в нем вы сможете просматривать все популярные форматы изображений;

- возможность воспроизведения видео с расширением 240 на 320 пикселей;

- кроме того, вы сможете читать любую информацию, полученную из USB или SD;

- устройство оснащено функцией Bluetooth.

Штатная магнитола «Лада Грантс», характеристики которой были описаны выше, работает через операционную систему Windows, поэтому у водителей есть возможность самостоятельно перепрограммировать устройство, что автовладельцы делают очень часто. Благодаря этой прошивке есть возможность добавить недостающие функции в существующую базу данных или исправить всплывающую системную ошибку.

Есть ли недостатки?

Штатная магнитола «Лада Грантс», безусловно, очень проста и удобна в использовании, а также имеет множество положительных качеств.Но, несмотря на это, все же есть недостатки, с которыми не могут согласиться некоторые автомобилисты.

Например, это устройство не поддерживает чтение компакт-дисков. В этом случае производители даже разъема не оставили. Конечно, в целом большим недостатком это не назовешь. Но некоторые водители-любители крайне недовольны такой «оплошностью» со стороны производителя. Как известно, чистый звук может передать только компакт-диск.

Также многие водители жалуются на некачественный Bluetooth. Конечно, есть в наличии, и это неоспоримый плюс.Но в системе передачи информации может полностью зависнуть.

Автомобилисты с самым чистым слухом замечают, что мощность звука радиоприемника не соответствует входящим в комплект трехкадровым динамикам. Однако эта проблема очень легко решается их заменой.

Стоит сказать несколько слов о роликах. Много сложностей возникает при работе с видео в формате AVI 720.

Прошивка

Прошивка головного устройства «Лада Грантс» позволяет добавлять новые функции в операционную систему и исправлять ошибки.Рассмотрим, чего можно добиться с помощью прошивки:

- вы сможете правильно синхронизировать работу задней камеры и регистратора;

- также, что очень важно, вы сможете добавить функцию навигации. Это будет особенно полезно при поездках на большие расстояния;

- при необходимости можно подключить модем и предоставить доступ в Интернет.

Стандартный набор характеристик данного ресивера способен полностью удовлетворить потребности среднестатистического водителя.Однако если вы хотите увеличить количество функций, то прошивка штатной магнитолы «Лада Грантс» вам сможет помочь. Новую прошивку вы легко сможете найти в Интернете. Но не забывайте, что используя неофициальные материалы, вы берете устройство с гарантией.

Магнитола

Как известно, стандартная версия автомобиля лишена автомобиля, так что сразу возникает вопрос, как установить магнитолу на «Ладу Грант». На самом деле это очень просто, так как место для устройства было предусмотрено при изготовлении автомобиля.

В «Гранте» ниша магнитолы сделана таким образом, что не нужно тянуть дополнительные провода. Для начала возьмите отвертку с плоской головкой и снимите пластиковый карман, который находится на том месте, где вы будете устанавливать радиоприемник. За этим карманом вы увидите ряд разъемов, к которым, собственно, и нужно подключить ваше устройство. Соедините эти два разъема и поставьте само устройство на свое место. А установка магнитолы «Лада Грантс» займет совсем немного времени, поэтому сделать ее можно самостоятельно.Но при необходимости можно обратиться к специалисту.

Установка колонок в передние двери

Подключение магнитолы «Lada Grants» должно сопровождаться установкой колонок на передние двери. Для этого необходимо демонтировать дверные крышки с ручками и регуляторами автомобильных стекол. По индивидуальным шаблонам необходимо вырезать отверстия для самих динамиков.Закрепить колонку в подготовленных отверстиях с помощью шурупов и провести кабель через специальные входы, предназначенные для стерео.Теперь нужно поставить на место все разобранные детали автомобиля. Обратите внимание, что все работы могут производиться только при отключении от АКБ минусом.

Как происходит процесс перепрошивки

Обзор штатной магнитолы «Лада Грантс» рассматривается в данной статье. Теперь нам нужно разобраться, как это реализовать прошивкой. Для этого необходимо использовать SD-карту с форматированием FAT. Скачайте на него прошивку.

Проще всего найти на различных форумах автолюбителей. Теперь вставляем карту в специальное отверстие для нее на магнитоле и перезагружаем музыкальное устройство.Как только вы увидите, что заполните шкалу перезагрузки, можете использовать расширенный интерфейс. Штатная магнитола «Лада Грантс лифтбэк» после перепрошивки станет намного функциональнее.

Усилители звука

Довольно часто репродукция штатной мультимедийной системы не устраивает владельцев, поэтому к «Лада Грантс лифтбэк» подключают разные усилители звука. Радио в этом случае не пострадает, но звук будет намного чище. Для этого необходимо демонтировать нижнюю часть центральной панели и снять консоль.Там вы найдете несколько разъемов mini iso. Найдите желтый разъем и вставьте вилку в купленную вами направляющую.

Зеленый и синий провода следует оставить в исходном виде. Автолюбители, выполняющие эту процедуру, отмечают, что в этом случае штатный провод использовать не получится.

Insights

Магнитола «Лада Грантс» - продукция отечественного производителя хорошего качества. Многие автолюбители довольны данным аппаратом, но не прочь немного его «поправить» при прошивке.Замена головного устройства «Лада Грантс» - очень простой процесс, который сможет выполнить любой автовладелец. Поэтому можно сказать, что этот автомобиль имеет множество достоинств и будет радовать своих владельцев долгие годы.

Браунс забиты, но фанаты не волнуются

Возвращение НФЛ в Кливленд не испорчено локаутом от рук Стилерс.

До того, как Dawg Pounders выпустили свой первый лай или выпили свои первые бокалы пива, они уже знали результат игры в воскресенье вечером с Pittsburgh Steelers.

Они выиграли.

После трех сезонов без футбола, после того, как у них украли коричневые цвета, все было кончено. Они выжили, отыграли свою команду и свои цвета, поскольку сезон - настоящий сезон, без показательных игр - наконец-то начался против главного соперника Стилерса. Пришло время веселиться.

Не говоря уже о том, что Стилерс разгромили Браунс 43-0. Это было однодневное празднование, которое завершилось, когда комик из родного города Дрю Кэри представил Браунов под завывание толпы.

«Любой, кто рассказывал анекдоты Кливленду раньше _, теперь вы можете официально заткнуться», - крикнул Кэри, когда Брауны выбежали на поле, и над головой взорвался фейерверк.

Центр Кливленда был наводнен оранжевыми, коричневыми и глупыми нарядами за целых четыре часа до начала, первой домашней игры регулярного сезона для Браунс с декабря 1995 года. Скальперы получили 200 долларов за билеты и просили целых 500 долларов, по словам фанатов.

«Мы - сборище сумасшедших собак, и мы сопротивляемся», - сказал Кевин Хепберн, когда он и его приятель, Джим Истенес, привязали свою моторную лодку Sick Puppy в доке на озере Эри недалеко от стадиона.«Мне было грустно с тех пор, как они переехали. Мы долго ждали. Но это совершенно новое».

На стоянках, простирающихся более чем на милю от нового стадиона, люди разбили лагерь позади автомобилей, грузовиков, автобусов и микроавтобусов, разжигая грили и открывая несколько прохладительных напитков. Кливлендеры любили своих коричневых и были готовы отпраздновать это событие с кем угодно, носящим собачью кость.

Группа людей, сидевших в Dawg Pound, секции конечной зоны, которая является владением самых ярых преданных Браунов, тусовалась на частном участке рядом со стадионом.

С другой стороны, Так Локи демонстрировал татуировку собаки в шлеме, которую он сделал только для игры. Лекки и его друг Терри Дозек приехали в Кливленд с юго-запада Огайо без билетов, но они забрали их по 200 долларов каждый.

«Я был фанатом Брауна всю свою жизнь, и я только что получил это», - сказал он. «Это еще не сделано. Мы собираемся забором его и надеть на него ошейник».

Все были рады, что когда Браун наконец вернулись, это было против Стилерса.Даже фанаты Питтсбурга были рады возобновлению соперничества в Кливленде.

«На меня уже обрушилось много мусора, - сказал Рой Лейн в майке Kordell Stewart. «Но все в порядке. Прошло много времени, и мы рады, что они вернулись».

Блетш согласился.

«Это Питтсбург и Кливленд, и ничего больше», - сказал он. «Нет другого соперничества».

Сборщики мотоциклов обеспокоены задержкой выплаты налоговых льгот

Сборщики

МОТОЦИКЛОВ попросили Совет по инвестициям (BOI) незамедлительно предоставить скудные льготы в рамках новой автомобильной программы на фоне сообщений о том, что государственно-частный автомобильный совет может не быть создан.

Рейнальдо Дженер, президент Ассоциации участников программы развития мотоциклов (MDPPA), заявил в позиционном документе, представленном в BOI, что «мы надеемся, что вы сможете развеять наши опасения по поводу того, что первая IRR [имплементирующие правила и положения] из четырех категории автотранспортных средств. Мы надеемся, что вы дадите нам уверенность в том, что

, какие бы уступки BOI ни предоставил другим категориям транспортных средств в будущем, также будет немедленно применяться к мотоциклетной промышленности.”

BOI должен предложить четыре руководства по Комплексной программе развития транспортных средств (CMVDP) или Исполнительному указу (EO) 877-A: по одному для сборки мотоциклов, производства четырехколесных колес, импорта подержанных автомобилей и экспортного производства.

Агентство поощрения заявило, что правила для мотоциклов будут одними из первых, которые будут выпущены, потому что они были «наименее спорными».

Во время публичных слушаний по IRR для мотоциклов в пятницу, Генер также выразил озабоченность по поводу сообщений о том, что создание совета автомобильной промышленности, который, как предполагается, должен предлагать конкретные меры по стимулированию и упрощению бизнес-процессов в рамках CMVDP, не может протолкнуться из-за противодействия со стороны Министерства торговли и промышленности (DTI).

Сообщается, что включение в совет других государственных учреждений не устраивает DTI, поскольку развитие автомобильной промышленности - это работа департамента.

MDPPA призвало BOI «незамедлительно сформировать техническую рабочую группу, которая подготовит другие законодательные акты, чтобы разработать налоговые и нефискальные стимулы, которых нет в проекте IRR для [мотоциклов], чтобы дать основу, из которой [мотор совет автомобильной промышленности] может работать ».

Эфрен Леаньо, исполнительный директор BOI, сказал, что, хотя предлагаемый совет должен быть центральным координирующим органом политики и ему поручено давать рекомендации, не будет никаких задержек с предоставлением льгот CMVDP.

границ | Последние достижения в области биосенсорных технологий для потенциальных приложений - обзор

Введение

Термин «биосенсор» относится к мощному и инновационному аналитическому устройству, включающему биологический чувствительный элемент, с широким спектром приложений, таких как открытие лекарств, диагностика, биомедицина, безопасность и переработка пищевых продуктов, мониторинг окружающей среды, защита и безопасность. Первый биосенсор, изобретенный Кларком и Лайонс (1962) для измерения глюкозы в биологических образцах, использовал стратегию электрохимического обнаружения кислорода или перекиси водорода (Fracchiolla et al., 2013; Turner, 2013) с помощью электрода с иммобилизованным глюкозооксидазным электродом. С тех пор был достигнут невероятный прогресс (Turner, 2013) как в технологии, так и в применении биосенсоров с инновационными подходами, включающими электрохимию, нанотехнологии и биоэлектронику. Учитывая феноменальные достижения в области биосенсоров, этот обзор направлен на ознакомление с различными техническими стратегиями, принятыми для разработки биосенсоров, чтобы предоставить фундаментальные знания и представить научный сценарий биосенсорной технологии.С акцентом на инструменты исследования, которые демонстрируют, как характеристики биосенсоров эволюционировали от классических электрохимических до оптических / визуальных, полимеров, кремнезема, стекла и наноматериалов для улучшения предела обнаружения, чувствительности и селективности. Интересно, что микробы и биолюминесценция (Du et al., 2007) также в значительной степени способствовали созданию биосенсоров на основе меток, в то время как биосенсоры без меток предполагали использование транзисторных или конденсаторных устройств и наноматериалов. Биосенсоры обеспечивают основу для понимания технологических усовершенствований оборудования, включая сложные высокопроизводительные машины для количественных биологов и портативные качественные или полуколичественные устройства для неспециалистов.Наконец, выделены текущие тенденции исследований, будущие проблемы и ограничения в этой области. Настоящий обзор разделен на различные подразделы, описывающие две основные технические стратегии, которым следуют различные типы биосенсорных устройств, начиная от электрохимических, оптических / визуальных, полимеров, кремнезема, стекла и наноматериалов. Эти устройства были разработаны для конкретных целей, и их обзор предоставит читателям исчерпывающие данные об устройствах биосенсоров и их применениях.

Технические стратегии

Технические стратегии (Turner, 2013), используемые в биосенсорах, основаны на детектировании на основе меток и без меток.Обнаружение на основе меток в основном зависит от конкретных свойств соединений-меток для целевого обнаружения. Эти типы биосенсоров хотя и надежны, но часто требуют комбинации специального чувствительного элемента, изготовленного с иммобилизованным целевым белком. С другой стороны, метод без метки (Citartan et al., 2013; Sang et al., 2015) позволяет обнаруживать целевые молекулы, которые не помечены или которые трудно пометить. Последние междисциплинарные подходы к биотехнологии с биоинженерией, электротехникой и электроникой проложили путь к разработке биосенсоров без этикеток для различных методов обнаружения с широким спектром приложений в областях медицины и экологии.

Электрохимические биосенсоры

Классическое открытие глюкометра с использованием биосенсоров на основе глюкозооксидазы (Clark and Lyons, 1962) является первым в линии открытия электрохимических биосенсоров. Биосенсоры глюкозы широко популярны в больницах и диагностических клиниках, поскольку они необходимы пациентам с диабетом для периодического контроля уровня глюкозы в крови. Однако биосенсоры глюкозы часто имеют недостатки из-за нестабильной активности ферментов или неоднородности (Harris et al., 2013), для которого необходима дальнейшая калибровка. Фактически, эти потенциальные недостатки привели к изобретению ряда биомолекул (Turner, 2013; Wang et al., 2013), обладающих различными электрохимическими свойствами, что проложило путь к открытию более жизнеспособных биосенсоров глюкозы. В последнее время электрохимические биосенсоры (Wang et al., 2014) обычно изготавливают путем модификации поверхности металлических и угольных электродов с использованием биоматериалов, таких как ферменты, антитела или ДНК. Выходной сигнал биосенсора обычно генерируется при специфическом связывании или каталитических реакциях биоматериалов (Wang et al., 2014) на поверхности электрода. Необходимость открытия электрохимических сенсоров стала незаменимой для клинической диагностики заболеваний (Gruhl et al., 2013), где раннее обнаружение или мониторинг кажутся важными. В этом контексте разработка неферментативных биосенсоров часто рассматривается с использованием синтетических материалов вместо белков. Интересно, что различные типы биомолекул обладают разной электродной стабильностью и селективностью, что в конечном итоге способствует разработке новых типов электрохимических биосенсоров для различных целей.На основе их использования разработано несколько типов электрохимических биосенсоров. Как объяснялось выше, биосенсоры глюкозы (Harris et al., 2013) претерпели быструю эволюцию со времени разработки. С этой точки зрения Wang et al. (2014) проанализировали прогресс ферроценбороновой кислоты (FcBA) и бороновых кислот, модифицированных ферроценом (Fc), для разработки биосенсоров благодаря наличию сайта связывания (то есть фрагмента бороновой кислоты) и электрохимически активной части (то есть остатка Fc). ). FcBA и его производные обладают уникальным свойством связывания с 1,2- или 1,3-диольными остатками сахаров, что приводит к образованию циклических сложноэфирных связей бороната.Окислительно-восстановительные свойства аддукта FcBA и сахара отличаются от свойств свободного FcBA, что составляет основу для электрохимического обнаружения. В дополнение к этому, бороновые кислоты обладают сродством к связыванию с ионами Fe -, что дает дополнительное преимущество для разработки нетрадиционных ионоселективных электродов с использованием иона F -. Углеводородные цепи, присутствующие в полипептидной цепи HbA1c, можно измерить с помощью электрохимического обнаружения на основе FcBA. Основным ограничением при использовании этого метода является требование иммобилизации производных FcBA (Wang et al., 2014) на поверхности электродов, так как эти производные добавляются в растворы образцов в качестве реагентов. Использование полимеров и / или серебряных электродов с подходящей модификацией производных FcBA может привести к улучшению электрохимического сенсора FcBA для биомедицинских областей, включая диагностику диабета, где измерение глюкозы будет дополнительным.

Электрохимический биосенсор для оценки уровней антиоксидантов и активных форм кислорода в физиологических системах (Mello et al., 2013) - еще одно современное изобретение.Основное применение в этой области - определение мочевой кислоты как основного конечного продукта метаболизма пуринов в жидкости организма (Erden and Kilic, 2013), что обеспечивает диагностический инструмент для различных клинических отклонений или заболеваний. Однако важно разработать экономичный и чувствительный метод. Электрохимический подход для измерения окисления мочевой кислоты, а также для количественного определения глюкозы кажется идеальным. Однако сходство мочевой кислоты с точки зрения окисления с аскорбиновой кислотой представляет собой серьезное экспериментальное препятствие для разработки высокочувствительного электрохимического биосенсора.Чтобы преодолеть это, ученые разработали биосенсор на основе амперометрического обнаружения (Erden and Kilic, 2013), который обладает способностью измерять как восстановительный, так и окислительный потенциалы. Учитывая стоимость и воспроизводимость этой процедуры, важно иммобилизовать фермент или нанести трафаретную печать на электроды или электроды на основе наноматериалов, которые идеально подходят для разработки одноразовых, селективных, экономичных и чувствительных биосенсоров мочевой кислоты для рутинного анализа. . В этом отношении недавние достижения в области трехмерной биопечати (Turner, 2013) направлены на создание биосенсоров с живыми клетками, инкапсулированными в трехмерных микросредах.В том же направлении был разработан новый беспроводной биосенсор каппы для определения уровня мочевой кислоты в слюне в режиме реального времени и непрерывным способом (Kim et al., 2015), и технология может быть расширена до носимых инструментов мониторинга для различных состояний здоровья и здоровья. фитнес-приложения. Электрохимические биосенсоры успешно использовались для измерения гормонов (Bahadir and Sezginturk, 2015), но их перспектива требует подробного рассмотрения. Еще одна потенциальная область развития технологий в области биосенсоров связана с нацеливанием на нуклеиновые кислоты.Хорошо известно, что экспрессия клеточной миРНК является идеальным биомаркером для диагностики начала заболевания, а нацеливание на них повышает эффективность генной терапии генетических нарушений. Обычно miRNA обнаруживают с помощью нозерн-блоттинга, микрочипов и полимеразной цепной реакции. Современные технологии обеспечивают идеальные электрохимические биосенсоры для обнаружения miRNA, основанные на детектировании без метки, включающем окисление гуанина после образования гибрида с участием miRNA (Hamidi-Asl et al., 2013) и его зонд захвата, заменяющий инозин.Все эти изобретения связаны с современными подходами к биофабрификации для продвижения технологии биосенсоров на основе электрохимии в биомедицине.

Мониторинг окружающей среды (Long et al., 2013; Verma and Bhardwaj, 2015) - еще один важный аспект, требующий биосенсорной технологии для быстрой идентификации остатков пестицидов и предотвращения опасностей для здоровья. Традиционные методы, такие как высокоэффективная жидкостная хроматография, капиллярный электрофорез и масс-спектрометрия, эффективны для анализа пестицидов в окружающей среде (Verma and Bhardwaj, 2015), однако существуют ограничения, например сложность, трудоемкость процедур, требование высококачественные инструменты и операционные возможности.Следовательно, простые биосенсоры, кажется, обладают огромными преимуществами, но разработать унифицированный датчик для анализа различных классов пестицидов сложно. С этой целью были разработаны определенные биосенсоры на основе ферментов (Pundir and Chauhan, 2012; Verma and Bhardwaj, 2015), чтобы понять физиологическое воздействие пестицидов на окружающую среду, безопасность пищевых продуктов и контроль качества. Для этого были разработаны биосенсоры на основе ингибирования ацетилхолинэстеразы (AChE) (Pundir, Chauhan, 2012). За последние десять или два десятилетия для быстрого анализа этот метод был дополнительно усовершенствован с последними разработками биосенсоров на основе ингибирования AChE, включая методы иммобилизации и другие различные стратегии изготовления.Аналогичным образом были разработаны пьезоэлектрические биосенсоры (Marrazza, 2014) для обнаружения пестицидного воздействия органофосфатов и карбаматов в окружающей среде. Известно, что хлорорганические пестициды влияют на экосистему (Senthilkumaran, 2015), а такие пестициды, как эндосульфан, наносят значительный ущерб. Действительно, такие пестициды по-разному изменяют репродуктивную систему самцов и самок рыб (Senthilkumaran, 2015), и, учитывая эти факты, изобретение биосенсоров для тестирования водной экосистемы будет иметь большее значение с точки зрения биомагнификации.Чтобы удовлетворить спрос, электрохимический биосенсор претерпел революцию (Turner, 2013; Verma and Bhardwaj, 2015) с быстрым прогрессом в производстве и использовании наноматериалов, кварца или кремнезема. Важно уделять особое внимание выбору рецепторов для разработки биосенсора, использованию различных методов трансдукции и стратегий быстрого скрининга для применения биосенсора в пищевых продуктах, а также экологической безопасности и мониторингу. Чтобы сделать это возможным, производство биосенсоров кажется важным, и достижения в этой области были категорически объяснены ниже.

Оптические / визуальные биосенсоры

Как объяснялось выше, экологические или биомедицинские приложения требуют разработки простых, быстрых и сверхчувствительных биосенсоров. Это возможно с помощью иммобилайзеров (Guo, 2013; Ogi, 2013; Turner, 2013; Peng et al., 2014; Shen et al., 2014), начиная с золота, материалов на основе углерода, кремния, кварца или стекла. Фактически, включение наночастиц золота или квантовых точек с использованием микропроизводства обеспечивает новую технологию (Schneider and Clark, 2013) для разработки высокочувствительных и портативных биосенсоров на основе фермента цитохрома P450 для определенных целей.Кроме того, волоконно-оптические химические сенсоры имеют большое значение в различных областях, таких как открытие лекарств, биосенсор и биомедицина. Совсем недавно гидрогели, используемые в качестве сенсоров на основе ДНК, стали новыми материалами для иммобилизации с помощью волоконно-оптической химии (Dias et al., 2014). По сравнению с другими материалами, иммобилизация в гидрогелях происходит в 3D, что обеспечивает высокую нагрузочную способность воспринимающих молекул. Гидрогели (полиакриламид) представляют собой гидрофильные сшитые полимеры (Khimji et al., 2013) и могут быть изготовлены в различных формах для иммобилизации, от тонких пленок до наночастиц.Гидрогели считаются простым субстратом для иммобилизации ДНК с другими преимуществами, такими как захват, контролируемое высвобождение, усиление аналитов и защита ДНК. Эти особенности уникальны для гидрогелей по сравнению с другими материалами, которые обеспечивают биомолекулярную иммобилизацию (Khimji et al., 2013). Кроме того, хорошая оптическая прозрачность гидрогелей обеспечивает удобную стратегию визуального обнаружения. Детальные методы иммобилизации ДНК-биосенсоров (Khimji et al., 2013) в монолитных полиакриламидных гелях и гелевых микрочастицах часто рассматриваются как технический прогресс в области биосенсорных технологий.Обнаружение одиночных молекул также было разработано с использованием электрохимического окисления гидразина для обнаружения ДНК (Kwon and Bard, 2012).

Биосенсоры из диоксида кремния, кварца / кристалла и стекла

Последние методы в разработке биосенсоров привели к использованию кремнезема, кварца или кристаллов и материалов из стекла благодаря их уникальным свойствам. Среди них кремниевые наноматериалы обладают большим потенциалом для технологических достижений в области применения биосенсоров благодаря их биосовместимости, распространенности, электронным, оптическим и механическим свойствам.Кроме того, кремниевые наноматериалы не токсичны, что является важным условием биомедицинских и биологических применений. Кремниевые наноматериалы (Peng et al., 2014; Shen et al., 2014) предлагают широкий спектр применений, начиная от биовизуализации, биосенсинга и лечения рака. Кроме того, флуоресцентные кремниевые наноматериалы находят долгосрочное применение в биоимиджинге. Интересно, что кремниевые нанопроволоки в сочетании с наночастицами золота обеспечивают гибриды, которые используются (Shen et al., 2014) в качестве новых нанореагентов на основе кремния для эффективного лечения рака.Ковалентное присоединение тиол-модифицированных олигомеров ДНК к диоксиду кремния или стеклу обеспечивает пленки ДНК для лучшего использования в УФ-спектроскопии и методах гибридизации (Khimji et al., 2013). Несмотря на множество преимуществ использования наночастиц кремния, необходимо оценить широко распространенные проблемы, такие как разработка крупномасштабных недорогих методов производства и биосовместимость после биомолекулярного контакта. Решение этих проблем позволит кремниевым наноматериалам стать современными компонентами биосенсоров. Кварцевые микровесные биосенсоры без проводов и электродов представляют собой еще одну платформу для анализа взаимодействий между биомолекулами с высокой чувствительностью.Пульсации кварцевых генераторов возбуждались и регистрировались антеннами посредством электромагнитных волн без каких-либо проводных соединений. Это бесконтактное точное измерение является ключевой особенностью для разработки сверхвысокой чувствительности обнаружения белков в жидкостях с использованием приборов на основе кварцевых биосенсоров (Ogi, 2013). Учитывая уникальные свойства кремнезема, кварца или стекла, было разработано несколько новых биосенсоров с использованием передовых технологий для улучшения биоинструментов в биомедицинских технологиях, но экономическая эффективность и биобезопасность требуют внимания (Ogi, 2013; Turner, 2013; Peng et al., 2014; Шен и др., 2014).

Биосенсоры на основе наноматериалов

Широкий спектр наноматериалов, начиная от наночастиц золота, серебра, кремния и меди, материалов на основе углерода, таких как графит, графем и углеродные нанотрубки, используется для разработки иммобилизации биосенсоров (Li et al., 2011; Zhou et al. , 2012; Guo, 2013; Ko et al., 2013; Senveli, Tigli, 2013; Valentini et al., 2013; Lamprecht et al., 2014; Shen et al., 2014; Sang et al., 2015). Кроме того, материалы на основе наночастиц обеспечивают высокую чувствительность и специфичность для разработки электрохимических и других типов биосенсоров.Среди металлических наночастиц наночастицы золота имеют потенциальное применение из-за их устойчивости к окислению (Hutter and Maysinger, 2013) и почти не обладают токсичностью, в то время как другие наночастицы, такие как серебро, окисляются и проявляют токсичность, если используются для внутреннего применения в медицине, например, лекарственные препараты. Доставка. В целом использование наноматериалов для биосенсоров связано с потенциальными проблемами, которые необходимо решить, если они используются в биомедицине (Su et al., 2011). Кроме того, стратегии усиления сигнала на основе наночастиц имеют потенциальные преимущества и недостатки (Ding et al., 2013). Тем не менее, наноматериалы считаются критическими компонентами в биоаналитических устройствах просто для повышения чувствительности и пределов обнаружения для обнаружения одиночных молекул (Turner, 2013). В этом контексте стоит упомянуть изобретение наночастиц на основе платины для электрохимической амплификации с ответом на одну метку для обнаружения низкой концентрации ДНК (Kwon and Bard, 2012). Точно так же полупроводниковые квантовые точки и нанокристаллы оксида железа, обладающие оптическими, а также магнитными свойствами, могут быть эффективно связаны с лигандами, нацеленными на опухоль, такими как моноклональные антитела, пептиды или небольшие молекулы, для нацеливания на опухолевые антигены с высокой аффинностью и специфичностью (Nie et al., 2007). Технология квантовых точек может применяться для понимания микросреды опухоли в терапевтических целях, а также для доставки наномедицинских средств (Jain, 2013). Использование биосенсоров с кантилеверами (милли-, микро- и нанокантилеверы) даже подвергается критическому анализу в связи с их потенциалом применения в различных областях.

Генетически кодированные или синтетические флуоресцентные биосенсоры

Разработка меченого биосенсора с использованием генетически кодируемой или синтетической флуоресценции проложила путь для понимания биологического процесса, включая различные молекулярные пути внутри клетки (Kunzelmann et al., 2014; Олдах и Чжан, 2014; Randriamampita и Lellouch, 2014). Фактически, открытие антител с флуоресцентной меткой было впервые сделано для изображения фиксированных клеток (Oldach and Zhang, 2014). Эта стратегия действительно предоставила новые способы разработки таких сенсоров с использованием биологических белков, связывания малых молекул с аналитами и вторичных мессенджеров. Совсем недавно были разработаны флуоресцентные биосенсоры для анализа моторных белков с использованием обнаружения отдельных молекул с определенной концентрацией аналита (Kunzelmann et al., 2014). Несмотря на эти преимущества, методология обнаружения и анализа зондов кажется сложной. Изобретение зеленого флуоресцентного белка и других флуоресцентных белков дало несколько преимуществ с точки зрения конструкции и эффективности оптического зонда (Oldach and Zhang, 2014). До последнего десятилетия генетически закодированные биосенсоры, нацеленные на молекулы, связанные с производством энергии, активными формами кислорода и цАМФ, обеспечивали лучшее понимание физиологии митохондрий (De et al., 2014). Точно так же цГМФ является важной сигнальной молекулой и лекарственной мишенью для сердечно-сосудистой системы.В связи с этим были разработаны биосенсоры на основе резонансного переноса энергии Ферстера (FRET) (Thunemann et al., 2014) для визуализации цГМФ, цАМФ и Ca 2+ в клетках. Некоторые из этих сенсоров эффективно работают в первичной культуре и живых клетках in vivo при визуализации (Oldach and Zhang, 2014; Randriamampita and Lellouch, 2014). В настоящее время выяснено довольно много ключевых аспектов для разработки сенсоров для визуализации живых животных. Оптимизируя такие подходы, малоугловое рассеяние рентгеновских лучей для разработки кальциевых сенсоров и зондов флуоресцентного резонансного переноса энергии для восприятия киназ называют лучшими методами биосенсоров в современной физиологии (Oldach and Zhang, 2014).Таким образом, было разработано несколько биосенсоров на основе микробных и клеточных органелл с конкретными мишенями (Su et al., 2012). Как объяснялось ранее, электрохимические, электромеханические и оптические биосенсоры разработаны для обнаружения miRNA гораздо более эффективно, чем другие молекулярные методы (Johnson and Mutharasan, 2014). Принимая во внимание появление in vivo визуализации с помощью низкомолекулярных биосенсоров, было выявлено лучшее понимание клеточной активности и многих других молекул, начиная от ДНК, РНК и миРНК (Khimji et al., 2013; Тернер, 2013; Джонсон и Мутарасан, 2014). Теперь трансформация в этой области требует полногеномного подхода с использованием более совершенных оптических генетических биосенсоров. В настоящее время также широко признано, что оптические биосенсоры с комбинацией флуоресценции и малых молекул / наноматериалов достигли большего успеха с точки зрения приложений и чувствительности.

Микробные биосенсоры с помощью синтетической биологии и генетической / белковой инженерии

Более поздняя тенденция в мониторинге окружающей среды и биоремедиации заключается в использовании самых современных инновационных технологий, основанных на генной / белковой инженерии и синтетической биологии, для программирования микроорганизмов с определенными выходными сигналами, чувствительностью и селективностью.Например, живая клетка, обладающая ферментативной активностью по разложению ксенобиотических соединений, найдет более широкое применение в биоремедиации (Park et al., 2013). Точно так же биосенсоры на основе микробного топлива были разработаны с целью мониторинга биохимической потребности в кислороде и токсичности в окружающей среде. Бактерии могут разрушать органический субстрат и вырабатывать электричество для ферментации. По сути, технология включает использование био-электрохимического устройства, которое контролирует мощность микробного дыхания для преобразования органических субстратов непосредственно в электрическую энергию.Несмотря на эти возможности, у микробных биосенсоров существуют ограничения из-за низкой удельной мощности с точки зрения производственных и эксплуатационных затрат. Прилагаются усилия для значительного повышения производительности и сокращения затрат с помощью новых системных подходов, в которых технологии предоставили платформу для разработки автономных микробных биосенсоров (Du et al., 2007; Sun et al., 2015). Другая область микробных биосенсоров раскрывает потенциальное применение для обнаружения пестицидов и тяжелых металлов (Gutierrez et al., 2015), в которых эукариотические микроорганизмы имеют преимущество перед прокариотическими клетками. Это в первую очередь связано с преимуществом разработки цельноклеточных биосенсоров (Gutierrez et al., 2015) с селективными и чувствительными приложениями, связанными с обнаружением токсичности тяжелых металлов и пестицидов. Более того, микробы высших эукариот могут иметь более широкую чувствительность к различным токсичным молекулам и иметь отношение к высшим животным. Интересно, что применение микробных биосенсоров разнообразно: от мониторинга окружающей среды до производства энергии.Инновационные стратегии предоставят новые биосенсоры с более высокой чувствительностью, чем селективность от микробного происхождения от эукариот до сконструированных прокариот. В будущем эти микробные биосенсоры (Du et al., 2007; Sun et al., 2015) найдут более широкое применение для мониторинга загрязнения окружающей среды металлами и устойчивого производства энергии.

Технологическое сравнение биосенсоров

В предыдущих разделах мы рассмотрели различные типы биосенсоров и их применение.В этой части мы сравнили биосенсоры с точки зрения технологии, специфичности и предела обнаружения, линейного диапазона, времени анализа, стоимости и портативности.

Инновации в электрохимических датчиках с высокопроизводительными методами, ориентированными на предел обнаружения, время анализа и портативность, обеспечили широкие потребительские рынки недорогим биосенсорам для определения глюкозы и тестов на беременность с использованием полоски иммобилизации против хорионического гонадотропина человека с технологией бокового потока (Turner, 2013 ). Иммобилизация аналитов с использованием полимеров и наноматериалов является ключом к повышению чувствительности и предела обнаружения.С этой точки зрения технология бокового потока позволяет напрямую доставлять образцы в желаемое место, чтобы создать определенные взаимодействия вместо случайных. Многие из вышеупомянутых биосенсоров использовали эту технологию и, по сути, проложили путь для биопроизводства с использованием контактного или бесконтактного формирования рисунка. Использование наноматериалов, таких как золото, серебро и биофабрификация на основе кремния, привело к появлению новых методов. Кроме того, нанесение полимерных покрытий на эти наноматериалы произвело революцию в контактном электрохимическом зондировании.Одним из основных преимуществ электрохимических сенсоров этого типа является чувствительность и специфичность при анализе в реальном времени. Однако ограничениями являются регенеративная способность или длительное использование полимеров / других материалов, однако снижение стоимости делает такие электрохимические датчики более доступными. Обнаружение единичного аналита с использованием контактного зондирования имеет огромные преимущества, например, измерение молекул в реальном времени с высокой специфичностью. Для этого были введены FRET, биолюминесцентный резонансный перенос энергии, флуоресцентные датчики и датчики на основе поверхностного плазмонного резонанса (Dias et al., 2014) для повышения специфичности и чувствительности с точки зрения обнаружения одиночных молекул. Эти методы имеют ограничения при обнаружении нескольких аналитов из-за перекрытия излучения сигналов, однако методы резонансной передачи энергии часто демонстрируются для обнаружения нескольких аналитов, что высоко ценится в клинической диагностике из-за разницы в биомаркерах между пациентами и родственными заболеваниями. Использование микро- или нанокантилеверов в качестве преобразователей при биофабрификации электрохимических сенсоров также имеет более широкие перспективы при обнаружении нескольких аналитов.Кроме того, бесконтактные датчики, использующие трехмерную биопечать с использованием струйной печати или лазерной прямой записи, обеспечивали лучшие результаты. Тем не менее, стоимость и настраиваемые возможности этих методов сильно ограничены. Интересно, что большинство этих высокопроизводительных биосенсоров были объединены с электрохимическим зондированием для конкретных приложений. Некоторые из наиболее известных чувствительных портативных амперометрических электрохимических биосенсоров, работающих в режиме реального времени, были разработаны (Kim et al., 2015) для диагностики заболеваний с использованием биологических жидкостей.В общем, электрохимические биосенсоры в сочетании с биофабрификацией имеют низкий предел обнаружения для специфичности обнаружения одного аналита с анализом в реальном времени, а также по доступной цене с учетом портативности устройства.

Оптические биосенсоры - следующая крупная технология в области биосенсоров, включающая оптоволоконную химию. Детектирование одиночных молекул, например ДНК или пептидов, лучше всего проводить с использованием поперечного сшивания на основе гидрогеля из-за того преимущества, что они обладают высокой нагрузочной способностью и гидрофильностью.Позже был разработан оптический биосенсор для измерения ДНК (Kwon and Bard, 2012), который нашел более широкое применение в биомедицине и судебной медицине. Комбинация биологических материалов, таких как фермент / субстрат, антитело / антиген и нуклеиновые кислоты, произвела революцию в технологии оптических биосенсоров. Кроме того, в биосенсорную систему также можно включать микроорганизмы, клетки животных или растений и срезы тканей. Последние достижения в области молекулярной оптоэлектроники позволили даже предложить системы оптического биометрического распознавания.Интегрированная оптическая технология позволяет встраивать как пассивные, так и активные оптические компоненты на одну и ту же подложку для разработки минимизированных компактных сенсорных устройств с использованием изготовления нескольких датчиков на одном кристалле. В этом контексте высококачественные полимеры предоставили гибридные системы для оптических биосенсоров. Фактически, технология оптических биосенсоров была усовершенствована благодаря современным инновациям в анализе морфологии поверхности с использованием высокотехнологичной электронной и атомно-силовой микроскопии. Несмотря на это, предел обнаружения оптических биосенсоров никогда не был близок к фемто-уровню, учитывая стоимость оборудования и отсутствие портативности устройства.С этой целью современная оптическая технология с использованием наномеханических биосенсоров на основе микрокантилеверов и технологии поверхностного резонанса предоставила инновационные ДНК-чипы, по крайней мере, для специфического и чувствительного анализа в реальном времени (Scheller et al., 2014; Wang et al., 2015; Zhang et al. ., 2015). В основном преимущества оптических биосенсоров включают быстрый быстрый анализ с устойчивостью сигнала к электрическим или магнитным помехам и возможностью получения спектра информации. Но главный недостаток - высокая стоимость из-за определенных требований к приборам.Другие технические трудности включают сложность в иммобилизации, особенно для биофабрикатов, и необходимость в стерилизованной среде критически решать, чтобы в полной мере использовать преимущества оптических биосенсоров.

Биопроизводство механических устройств обеспечивает лучшие результаты для массовых биосенсоров. Действительно, как электрохимические, так и оптические биосенсоры максимально используют эту технологию для создания биосенсоров высочайшего качества. Основные достижения в технологиях микро- и нанообработки (Arlett et al., 2011) позволяют разрабатывать механические устройства с наноразмерными движущимися частями. Возможность изготовления таких структур с использованием процедур обработки полупроводников объединила принципы биофизики и биоинженерии в направлении прогресса практических микро- и нано-электромеханических биосенсоров, которые могут производиться в больших количествах (Arlett et al., 2011). Стекло, кремний и кварцевый материал успешно использовались либо после флюоресценции, либо с применением наночастиц золота. Хотя эти биосенсоры обладают большей точностью с точки зрения обнаружения одиночных молекул, дешевое массовое производство менее осуществимо (Peng et al., 2014; Шен и др., 2014). Многие проблемы все еще остаются в массовых сенсорах с точки зрения лучших улавливающих агентов для изготовления в наномасштабе с использованием изготовления микроэлектроники для высокопроизводительного анализа. В этой связи стоит упомянуть огромные возможности применения полупроводниковых материалов и технологии квантовых точек. Тем не менее, никакая существующая технология в биосенсорах не может выполнять одновременные количественные анализы в реальном времени для больших массивов, но использование изготовления кантилеверов в микро- и нанометрах может сделать это возможным (Dias et al., 2014).

Еще одна крупная техническая революция в биосенсорах - открытие генетически закодированных или синтетических флуоресцентных биосенсоров для анализа молекулярных механизмов биологических процессов (Kunzelmann et al., 2014; Oldach and Zhang, 2014; Randriamampita and Lellouch, 2014). Хотя эти датчики имеют огромные перспективы для обнаружения одиночных молекул с определенным измерением аналитов, методология, подготовка и обнаружение зонда сложны и также требуют высококлассного оборудования.Что касается биоматериалов, биосенсоры на основе микробного топлива также отличаются высокой чувствительностью и селективностью, однако методы массового производства и генной инженерии для создания штамма микробов требуют сложных процедур и высокой стоимости. Однако еще одним преимуществом микробных биосенсоров является возможность использовать их в качестве инструмента для биоремедиации, что имеет большее значение с точки зрения мониторинга окружающей среды. Однако разработка и выпуск такого генетически модифицированного штамма должны строго анализироваться с соблюдением соответствующих регулирующих законов и этического разрешения в дополнение к управлению производственными затратами.

Собрано с точки зрения Scheller et al. (2014), разработка различных платформ микро- и нанобиосенсоров, включающих интегрированные технологии, использующие электрохимические или оптические биоэлектронные принципы с комбинацией биомолекул или биологических материалов, полимеров и наноматериалов, необходима для создания высокочувствительных и миниатюрных устройств.

Текущие направления исследований, будущие задачи и ограничения биосенсорной технологии

Интегрированные стратегии с использованием нескольких технологий, начиная от электрохимических, электромеханических и флуоресцентно-оптических биосенсоров и генно-инженерных микробов, являются современными методами для открытий биосенсоров (Таблица 1).Некоторые из этих биосенсоров имеют огромные перспективы применения в диагностике заболеваний и медицине (таблица 2). Поскольку потребность и потребность в использовании биосенсора для быстрого анализа с экономической эффективностью требует биофабрикации, которая проложит путь для идентификации активности от клеток до целого животного с пределом обнаружения с высокой точностью для отдельных молекул. Затем биосенсоры должны быть нацелены на работу в мультиплексных условиях. В этой ситуации требуется как двумерное, так и трехмерное обнаружение со сложными датчиками для нацеливания и количественной оценки небольших представляющих интерес аналитов (Dias et al., 2014). При этом было сделано несколько важных открытий с использованием контактного или бесконтактного построения паттернов на разных уровнях. Следующий уровень развития должен быть направлен на открытие более надежных регенеративных биосенсоров для длительного использования. Если это произойдет, могут быть разработаны новые диагностические биосенсоры для терапевтов, которые в долгосрочной перспективе помогут как клиницистам, так и пациентам в более комплексном понимании болезней и терапии. Ввиду этого биосенсор на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии обеспечивает отличную диагностическую процедуру для оценки эффективности лечения иматинибом при хроническом миелоидном лейкозе (Fracchiolla et al., 2013). Текущее использование аптамеров, аффител, пептидных массивов и молекулярно импринтированных полимеров является классическим примером перспективных исследовательских подходов в этой области (Citartan et al., 2013; Abe et al., 2014; Verma and Bhardwaj, 2015). Небольшой успех также достигается с небольшим количеством потенциальных молекул для новых терапевтических, противомикробных средств и доставки лекарств. Изобретение в этом направлении привело к открытию электрохимических биосенсоров как надежных аналитических устройств для обнаружения патогенов вируса птичьего гриппа в сложных матрицах (Grabowska et al., 2014). Более поздний отчет выявил потенциальные возможности применения биосенсоров на основе аффинности в спортивной медицине и анализе допинг-контроля (Mazzei et al., 2014). Совсем недавно были подробно рассмотрены различные носимые электрохимические биосенсоры для неинвазивного скрининга в реальном времени электролитов и метаболитов в биологических жидкостях в качестве индикаторов состояния здоровья пользователя (Bandodkar and Wang, 2014). Еще одно интересное приложение - оценка качества мяса и рыбы с использованием гипоксантиновых биосенсоров путем их изготовления (Lawal and Adeloju, 2012).Разработка биосенсоров для обнаружения боевых биологических агентов, начиная от бактерий, вирусов и токсинов, часто предпринимается с использованием различных устройств биосенсоров, начиная от электрохимических, нуклеиновых, кислотных, оптических и пьезоэлектрических, которые будут иметь огромное применение в вооруженных силах и здравоохранении, а также в обороне. и безопасность (Кумар и Рани, 2013). Взятые вместе, сочетание наноматериалов и полимеров с различными типами биосенсоров обеспечит гибридные устройства для лучшего использования в вышеупомянутых приложениях (Citartan et al., 2013; Тернер, 2013). Кроме того, научный прогресс в разработке микробных биосенсоров с использованием подхода синтетической биологии будет в значительной степени способствовать мониторингу окружающей среды и потреблению энергии (Sun et al., 2015). Авторы этого отчета также подчеркнули важность использования микробных топливных элементов для разработки метода очистки воды и в качестве источников питания для датчиков окружающей среды. В более широкой перспективе мы выделили тип биосенсоров, потенциальное применение и характеристики, такие как способность обнаружения аналитов, время анализа, портативность, стоимость и индивидуальная настройка (таблица 3).

Таблица 1. Список биосенсоров с указанием принципа, применения и библиографии .

Таблица 2. Использование биосенсоров в диагностике болезней .

Таблица 3. Тип биосенсоров с применением и характеристиками .

В заключение, разработка биосенсоров в основном зависит от чувствительности, специфичности, нетоксичности, обнаружения малых молекул и экономической эффективности.Принятие во внимание этих характеристик в конечном итоге позволит решить критически важные параметры, а также проблемы, связанные с основными ограничениями технологии биосенсоров. Некоторый прогресс наблюдается в электрохимических сенсорах в сочетании с наноматериалами, что приводит к появлению новых типов биосенсоров (Kwon and Bard, 2012; Bandodkar and Wang, 2014). С этой точки зрения стоит упомянуть об изобретении «электронной кожи» в виде печатных электрохимических биосенсоров с временной переносной татуировкой для физиологического и безопасного обнаружения химических ингредиентов (Windmiller et al., 2012а, б). В целом, лучшее сочетание биосенсоров и биопроизводства с подходами синтетической биологии, использующими либо электрохимические, либо оптические, либо биоэлектронные принципы, или их комбинацию, будет ключом к успешной разработке мощных биосенсоров для современной эпохи.

Авторские взносы

Первый автор задумал и внес большой вклад в обзор, в то время как все другие авторы внесли свой вклад в организацию.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Финансирование

CS выражает признательность Департаменту науки и технологий (DST) за грант и стипендию DST-Women Scientist (WOS-A). BS является стипендиатом инновационной стипендии TATA от Департамента биотехнологии Индии. HP является стипендиатом Рамануджана от DST, Индия.

Ссылки

Читартан, М., Гопинатх, С. К., Томинага, Дж., И Танг, Т. Х. (2013). Безмаркированные методы сообщения о биомолекулярных взаимодействиях с помощью оптических биосенсоров. Аналитик 138, 3576–3592. DOI: 10.1039 / c3an36828a

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кларк, Л. К. младший, и Лайонс, К. (1962). Электродные системы для непрерывного мониторинга в сердечно-сосудистой хирургии. Ann. Акад. Sci. 102, 29–45. DOI: 10.1111 / j.1749-6632.1962.tb13623.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дин Л., Бонд А. М., Чжай Дж. И Чжан Дж. (2013). Использование меток наночастиц для усиления сигнала в сверхчувствительных электрохимических биосенсорах сродства: обзор. Анал. Чим. Acta 797, 1–12. DOI: 10.1016 / j.aca.2013.07.035

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ду З., Ли Х. и Гу Т. (2007). Обзор современного состояния микробных топливных элементов: перспективной технологии очистки сточных вод и биоэнергетики. Biotechnol. Adv. 25, 464–482. DOI: 10.1016 / j.biotechadv.2007.05.004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Грабовская, И., Малецка К., Яроцка У., Радецки Дж. И Радецка Х. (2014). Электрохимические биосенсоры для обнаружения вируса птичьего гриппа - текущее состояние и будущие тенденции. Acta Biochim. Pol. 61, 471–478.

Google Scholar

Гутьеррес, Дж. К., Амаро, Ф., и Мартин-Гонсалес, А. (2015). Цельноклеточные биосенсоры тяжелых металлов с использованием эукариотических микроорганизмов: обновленный критический обзор. Перед. Microbiol. 6:48. DOI: 10.3389 / fmicb.2015.00048

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хамиди-Асл, Э., Палчетти И., Хашеминеджад Э. и Машини М. (2013). Обзор электрохимических биосенсоров для определения микроРНК. Таланта 115, 74–83. DOI: 10.1016 / j.talanta.2013.03.061

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Харрис, Дж. М., Рейес, К., Лопес, Г. П. (2013). Общие причины нестабильности глюкозооксидазы при биосенсинге in vivo: краткий обзор. J. Diabetes Sci. Technol. 7, 1030–1038.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Химджи, И., Келли, Э. Ю., Хелва, Ю., Хоанг, М., и Лю, Дж. (2013). Визуальные оптические биосенсоры на основе ДНК-функционализированных полиакриламидных гидрогелей. Методы 64, 292–298. DOI: 10.1016 / j.ymeth.2013.08.021

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, Дж., Имани, С., де Араужо, В. Р., Уорчалл, Дж., Вальдес-Рамирес, Г., Пайшао, Т. Р. и др. (2015). Переносной биодатчик мочевой кислоты слюнной капы со встроенной беспроводной электроникой. Biosens.Биоэлектрон. 74, 1061–1068. DOI: 10.1016 / j.bios.2015.07.039

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ко, П. Дж., Исикава, Р., Сон, Х., и Сандху, А. (2013). Платформа из пористого кремния для оптического обнаружения функционализированных магнитных частиц биочувствительности. J. Nanosci. Nanotechnol. 13, 2451–2460. DOI: 10.1166 / jnn.2013.7406

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кумар, Х., и Рани, Р. (2013). Разработка биосенсоров для обнаружения боевых биологических агентов: проблемы и проблемы. Sci. Прог. 96, 294–308. DOI: 10.3184 / 003685013X13777066241280

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Квон, С. Дж., И Бард, А. Дж. (2012). Анализ ДНК с применением электрохимической амплификации наночастиц Pt с ответом на одну метку. J. Am. Chem. Soc. 134, 10777–10779. DOI: 10.1021 / ja304074f

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лампрехт, К., Хинтердорфер, П., Эбнер, А. (2014). Применение биосенсорной атомно-силовой микроскопии для мониторинга доставки лекарств и наночастиц. Эксперт. Opin. Препарат Делив. 11, 1237–1253. DOI: 10.1517 / 17425247.2014.917078

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лаваль А. Т., Аделоджу С. Б. (2012). Прогресс и последние достижения в изготовлении и использовании гипоксантиновых биосенсоров для оценки качества мяса и рыбы: обзор. Таланта 100, 217–228.DOI: 10.1016 / j.talanta.2012.07.085

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, М., Ли, Р., Ли, К. М. и Ву, Н. (2011). Электрохимические и оптические биосенсоры на основе наноматериалов и наноструктур: обзор. Перед. Biosci. (Schol Ed) 3: 1308–1331. DOI: 10.2741 / 228

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лонг, Ф., Чжу, А., Ши, Х. (2013). Последние достижения в области оптических биосенсоров для мониторинга окружающей среды и раннего предупреждения. Сенсоры (Базель) 13, 13928–13948. DOI: 10.3390 / s131013928

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мацей, Ф., Антиохия, Р., Ботре, Ф., Фаверо, Г., и Тортолини, К. (2014). Биосенсоры на основе аффинности в спортивной медицине и анализе допинг-контроля. Биоанализ 6, 225–245. DOI: 10.4155 / bio.13.308

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мелло, Л. Д., Киснер, А., Гуларт, М.О., Кубота, Л.Т. (2013). Биосенсоры для оценки антиоксидантов в биологических системах. Расческа. Chem. Экран с высокой пропускной способностью. 16, 109–120. DOI: 10.2174/138620713804806265

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ни, С., Син, Ю., Ким, Дж. Дж., И Саймонс, Дж. У. (2007). Применение нанотехнологий при раке. Annu. Преподобный Биомед. Англ. 9, 257–288. DOI: 10.1146 / annurev.bioeng.9.060906.152025

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Оги, Х.(2013). Беспроводные безэлектродные биосенсоры кварцевого кристалла и микровесов для изучения взаимодействий между биомолекулами: обзор. Proc. Jpn. Акад. Сер. B Phys. Биол. Sci. 89, 401–417. DOI: 10.2183 / pjab.89.401

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Олдах, Л., и Чжан, Дж. (2014). Генетически кодируемые флуоресцентные биосенсоры для визуализации фосфорилирования белков живыми клетками. Chem. Биол. 21, 186–197. DOI: 10.1016 / j.chembiol.2013.12.012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Парк К., Юнг Дж., Сон Дж., Ким С. Х. и Чанг Б. Х. (2013). Закрепление чужеродных веществ на поверхности живых клеток с помощью пептида, специфичного для связывания Сортазы А. Chem. Commun. (Camb) 49, 9585–9587. DOI: 10.1039 / c3cc44753g

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пэн, Ф., Су, Ю., Чжун, Ю., Фань, К., Ли, С. Т., и Хэ, Ю.(2014). Платформа из кремниевых наноматериалов для биоимиджинга, биосенсинга и терапии рака. В соотв. Chem. Res. 47, 612–623. DOI: 10.1021 / ar400221g

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пундир, С.С., Чаухан, Н. (2012). Биосенсоры на основе ингибирования ацетилхолинэстеразы для определения пестицидов: обзор. Анал. Biochem. 429, 19–31. DOI: 10.1016 / j.ab.2012.06.025

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Санг, С., Ван, Ю., Фэн, К., Вэй, Ю., Цзи, Дж., И Чжан, В. (2015). Прогресс новых методов без использования этикеток для биосенсоров: обзор. Crit. Rev. Biotechnol. 15, 1–17. DOI: 10.3109 / 07388551.2014.991270

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Scheller, F. W., Yarman, A., Bachmann, T., Hirsch, T., Kubick, S., Renneberg, R., et al. (2014). Будущее биосенсоров: личное мнение. Adv. Biochem. Англ. Biotechnol. 140, 1–28. DOI: 10.1007 / 10_2013_251

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сентилкумаран, Б. (2015). Нарушение эндокринной системы, вызванное пестицидами и аналогами половых стероидов, по-разному нацелено на гипоталамо-гипофизарно-гонадную систему во время гаметогенеза у костистых насекомых - обзор. Gen. Comp. Эндокринол. 219, 136–142. DOI: 10.1016 / j.ygcen.2015.01.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шен, М.Ю., Ли, Б. Р., Ли, Ю. К. (2014). Биосенсоры на основе кремниевых нанопроволок на полевых транзисторах: от чувствительных до сверхчувствительных. Biosens. Биоэлектрон. 60, 101–111. DOI: 10.1016 / j.bios.2014.03.057

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Су Т., Чжан З. и Луо К. (2012). Ратиометрическая флуоресцентная визуализация двойных биомолекулярных событий в отдельных живых клетках с использованием новой пары FRET биосенсора на основе mVenus / mKOkappa и одного флуоресцентного белкового биосенсора. Biosens. Биоэлектрон. 31, 292–298. DOI: 10.1016 / j.bios.2011.10.034

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сан, Дж. З., Питер, К. Г., Си, Р. В., Чжай, Д. Д., Ляо, З. Х., Сан, Д. З. и др. (2015). Биосенсоры на основе микробных топливных элементов для мониторинга окружающей среды: обзор. Water Sci. Technol. 71, 801–809. DOI: 10.2166 / wst.2015.035

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тунеманн, М., Schmidt, K., de, W. C., Han, X., Jain, R.K, Fukumura, D., et al. (2014). Корреляционная прижизненная визуализация сигналов цГМФ и вазодилатации у мышей. Перед. Physiol. 5: 394. DOI: 10.3389 / fphys.2014.00394

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Валентини Ф., Галаче Ф. Л., Тамбурри Э. и Паллески Г. (2013). Одностенные углеродные нанотрубки / композитные пленки полипиррол-GOx для модификации золотых микроэлектродов для биосенсоров глюкозы: исследование расширенной линейности. Biosens. Биоэлектрон. 43, 75–78. DOI: 10.1016 / j.bios.2012.11.019

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Верма, Н., Бхардвадж, А. (2015). Биосенсорная технология для пестицидов - обзор. Заявл. Biochem. Biotechnol. 175, 3093–3119. DOI: 10.1007 / s12010-015-1489-2

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван Б., Такахаши С., Ду X. и Анзай Дж. (2014). Электрохимические биосенсоры на основе ферроценбороновой кислоты и ее производных: обзор. Биосенсоры (Базель) 4, 243–256. DOI: 10.3390 / bios4030243

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван Дж., Чен Г., Цзян Х., Ли З. и Ван Х. (2013). Достижения в области наноразмерных биосенсоров для биомедицинских приложений. Аналитик 138, 4427–4435. DOI: 10.1039 / c3an00438d

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван С., Пун Г. М. и Уилсон В. Д. (2015). Количественное исследование взаимодействий белок-нуклеиновая кислота с помощью поверхностного плазмонного резонанса биосенсора. Methods Mol. Биол. 1334, 313–332. DOI: 10.1007 / 978-1-4939-2877-4_20

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Виндмиллер, Дж. Р., Бандодкар, А. Дж., Пархомовский, С., и Ван, Дж. (2012a). Электроды для переноса штампа для электрохимического зондирования неплоских и негабаритных поверхностей. Аналитик 137, 1570–1575. DOI: 10.1039 / c2an35041f

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Виндмиллер, Дж.Р., Бандодкар, А. Дж., Вальдес-Рамирес, Г., Пархомовский, С., Мартинес, А. Г., и Ван, Дж. (2012b). Электрохимическое зондирование на основе временных татуировок для печати. Chem. Commun. (Camb) 48, 6794–6796. DOI: 10.1039 / c2cc32839a

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжан, З., Лю, Дж., Ци, З. М., и Лу, Д. Ф. (2015). Исследование самосборных нанокомпозитных пленок in situ с помощью спектрального датчика ППР. Mater. Sci. Англ. C Mater.Биол. Прил. 51, 242–247. DOI: 10.1016 / j.msec.2015.02.026

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжоу Ю., Чиу К. В. и Лян Х. (2012). Межфазные структуры и свойства органических материалов для биосенсоров: обзор. Датчики (Базель) 12, 15036–15062. DOI: 10.3390 / s121115036

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *