Разное

Р 415 ттх: Радиостанции Р-415 | Военная радиосвязь

Содержание

Радиостанции Р-415 | Военная радиосвязь

Серия подвижных малоканальных ДМВ радиорелейных станций

 

Р-415

подвижная малоканальная ДМВ радиорелейная станция “Азид-1” (“Диапазон” )

  

Радиорелейная станция для создания временных быстроразвертываемых малоканальных радиорелейных линий связи.Радиостанция допускает встречную работу в радиолинии с радиорелейной станцией типа Р—405М. По условиям эксплуатации станция может быть установлена в автомобилях, самолетах, вертолетах. РРС изготавливается в шести вариантах, отличающихся количеством и типом приемопередатчиков (Н, В, Н+В) и напряжением питания (27 В, 220 В 50 Гц/27 В).

Диапазон 1(“Н”)

  • Диапазон частот, МГц 80-120
  • Количество рабочих частот 800
  • Дискретность сетки частот, кГц 50
  • Минимальный дуплексный разнос, МГц 8,05

Мощность передатчиков, Вт:

  1. – номинальная 10
  2. – пониженная 0,5-2,5

Чувствительность приемников при отношении сигнал/шум 35 дБ, мкВ:

  1. – в первом канале ТЧ 2,2
  2. – во втором канале ТЧ 5,5

Коэффициент усиления антенн, дБ 7

Дальность связи:

  1. – при работе на направленные антенны при высоте подвеса 16 м, км не менее 30
  2. – при работе на ненаправленные антенны в движении, км 10

Электропитание станции Р—415:

  1. – от постоянного тока, напряжением +27В
  2. – от переменного однофазного тока 50 Гц 220В
  3. – от переменного трехфазного тока 50 Гц 380В

Максимальная мощность потребляемая станцией, Вт:

  1. – от сети переменного тока 240
  2. – от сети постоянного тока 180

Масса аппаратуры, кг:

  1. – однодиапозонной 78
  2. – двух диапазонной 106

Рабочий диапазон температур, °С (-30…. .+50)

Относительная влажность при +40 °С,%: 98

Пониженное атмосферное давление, гПа 613

Диапазон 2(“В”)

  • Диапазон частот, МГц 390-430
  • Количество рабочих частот 200
  • Дискретность сетки частот, кГц 200
  • Минимальный дуплексный разнос, МГц 15,00

Мощность передатчиков, Вт:

  1. – номинальная 6
  2. – пониженная 0,3-1,3

Чувствительность приемников при отношении сигнал/шум 35 дБ, мкВ:

  1. – в первом канале ТЧ 5,0
  2. – во втором канале ТЧ 5,0

Коэффициент усиления антенн, дБ 11

Дальность связи:

  1. – при работе на направленные антенны при высоте подвеса 16 м, км не менее 30
  2. – при работе на ненаправленные антенны в движении, км 10

Электропитание станции Р—415:

  1. – от постоянного тока, напряжением +27В
  2. – от переменного однофазного тока 50 Гц 220В
  3. – от переменного трехфазного тока 50 Гц 380В

Максимальная мощность потребляемая станцией, Вт:

  1. – от сети переменного тока 240
  2. – от сети постоянного тока 180

Масса аппаратуры, кг:

  1. – однодиапозонной 78
  2. – двух диапазонной 106

Рабочий диапазон температур, °С (-30…. .+50)

Относительная влажность при +40 °С,%: 98

Пониженное атмосферное давление, гПа 613

Р-415 обеспечивает следующие режимы работы:

  1. – режим внутреннего уплотнения, при котором обеспечивается одновременная работа по двум телефонным и двум телеграфным каналам;
  2. – режим внешнего уплотнения аппаратурой типа “Азур” по трем оперативным и одному служебному телефонным каналам;
  3. – режим внешнего уплотнения аппаратурой передачи данных со скоростью 12—4 8 кБит/с;
  4. – режим дистанционного управления КБ или УКВ радиостанциями;
  5. – симплексный режим, при котором обеспечивается работа по одному из телефонных каналов с повышенной девиацией частоты;
  6. – режим автоматизированного контроля, обеспечивающий определение неисправного блока.

 

Р-415-3А

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция (автомобильная). Шасси ГАЗ-66 с кузовом-фургоном К66Н

Р-415-3А1

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция (автомобильная). Шасси ГАЗ-66

Р-415-3А2

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция (автомобильная). Шасси ГАЗ-66

Р-415-3Б2

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция (на бронебазе) . Шасси К1.Ш1

Р-415А

подвижная малоканальная ДМВ радиорелейная станция

Р-415В

возимая малоканальная ДМВ радиорелейная станция “Азид-1Д”

Р-415ВН

радиорелейная станция

Р-415Д

подвижная авиадесантная малоканальная ДМВ радиорелейная станция. Шасси ГАЗ-66

Р-415М

возимая малоканальная радиорелейная станция

Р-415Н

подвижная малоканальная МВ радиорелейная станция

Р-415НВ

возимая малоканальная МВ радиорелейная станция (ЖЫ1.100.033)

Р-415РА

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция

Р-415РА-1

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция (ШКИС.464212.017)

Р-415РА-2

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция. Шасси К1.Ш1

Р-415РА-3

подвижная малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция (ШКИС.464418.002)

Р-415-С5

малоканальная радиорелейная станция “Азид-5” (ИЯТН.464415.006)

Р-415-С5А

малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция “Азид-5А” (ИЯТН.464415.006-24)

Р-415-С5Ц

малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция “Азид-5Ц” (ИЯТН.464411.066)

Р-415-С5ЦМ

малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция “Азид-5ЦМ” (ИЯТН.464411.099 и ИЯТН.464411.124)

Р-415-С5ЦФ

малоканальная МВ-ДМВ радиорелейная станция “Азид-5ЦФ” (ИЯТН.464411.066-02)

Важная информация!  На данном сайте размещены только описания устройств! И сайт не торгует этими устройствами, в иных случаях в описании указаны ссылки на предложения продавцов!

Вконтакте

Одноклассники

Pinterest

Автор публикации

0

Неизменное хобби — радиосвязь.
QTH — г. Донецк, ДНР.

Комментарии: 33Публикации: 1885Регистрация: 11-08-2015

Радиорелейная станция Р-415

>

РРС Р-415 предназначена для создания временных быстроразвертываемых малоканальных радиорелейных линий связи. Радиостанция допускает встречную работу в радиолинии с радиорелейной станцией типа Р—405М. По условиям эксплуатации станция может быть установлена в автомобилях, самолетах, вертолетах. РРС изготавливается в шести вариантах, отличающихся количеством и типом приемопередатчиков (Н, В, НВ) и напряжением питания (27 В, 220 В 50 Гц/27 В).

Р-415 обеспечивает следующие режимы работы:

  • режим внутреннего уплотнения, при котором обеспечивается одновременная работа по двум телефонным и двум телеграфным каналам;
  • режим внешнего уплотнения аппаратурой типа “Азур” по трем оперативным и одному служебному телефонным каналам;
  • режим внешнего уплотнения аппаратурой передачи данных со скоростью 12—4 8 кБит/с;
  • режим дистанционного управления КБ или УКВ радиостанциями;
  • симплексный режим, при котором обеспечивается работа по одному из телефонных каналов с повышенной девиацией частоты;
  • режим автоматизированного контроля, обеспечивающий определение неисправного блока.

Основные характеристики:

Диапазон 1(“Н»)

Диапазон 2(“В”)

Диапазон частот, МГц

80-120

390-430

Количество рабочих частот

800

200

Дискретность сетки частот, кГц

50

200

Минимальный дуплексный разнос, МГц

8,05

15,00

Мощность передатчиков, Вт:

  

номинальная

10

6

пониженная

0,5-2,5

0,3-1,3

Чувствительность приемников при отношении сигнал/шум 35 дБ, мкВ:

  

в первом канале ТЧ

2,2

5,0

во втором канале ТЧ

5,5

5,0

Коэффициент усиления антенн, дБ

7

11

Дальность связи:

 

при работе на направленные антенны при высоте подвеса 16 м, км

не менее 30

при работе на ненаправленные антенны в движении, км

10

Электропитание станции Р—415 осуществляется. В:

постоянным током

+27

переменным однофазным током 50 Гц

220

переменным трехфазным током 50 Гц

380

Максимальная мощность, потребляемая станцией, ВА:

от сети переменного тока

240

от сети постоянного тока

180

Масса аппаратуры, кг:

однодиапозонной

78

двух диапазонной

106

Рабочий диапазон температур, °С

(-30…..+50)

Относительная влажность при +40 °С,%:

98

Пониженное атмосферное давление, гПа

613


53. Состав и назначение блоков станции р-415

в комплект станции входят:

щит распределительный — предназначен для вывода телефонных и телеграфных каналов;

дуплексер антенный — предназначен для подключения антенн и одному фидеру или приемо­передатчиков к одному фидеру.

Назначение блоков:

Блок уплотнения каналами является блоком внутреннего уплотнения, обеспечивающий частотное разделение телефонных и телеграфных каналов .Блоки приемопередатчиков предназначены для выделения принятых антенной ВЧ ЧМ сигналов корреспондента и их демодуляции, а также для формирования мощных ВЧ сигналов передатчика.

Синтезатор частот предназначен для образования рабочих частот передатчика и первого гетеродина приемника, пуска и контроля работы автоматической настройки фильтров (АНФ). Блок контроля и управления предназначен для управления стойкой станции, для установки режимов работы и контроля работоспособности станции. Блок питания предназначен для питания станции стабильными напряжениями: 5в б.Зв -б.Зв 12.6в-12.бв27в.

Пульт переключения предназначен для коммутации цепей блоков приемо-передатчиков диапазонов 1 или Д..

Состав:

  • блок контроля управления

  • синтезатор частот

  • блок приемопередатчика

  • блок питания

  • направленная антенна

  • ненаправленная антенна

  • блок управления каналов

  • аппаратный шкаф

54. Классификация и характеристика орбит

По типу используемых орбит. По этому признаку орбиты делятся на два класса — системы с космическими аппаратами (КА) на геостационарной орбите (GEO) и на негеостационарной орбите. В свою очередь, негеостационарные орбиты подразделяются на низкоорбитальные (LEO), средневысотные (МЕО) и эллиптические (НЕО)

Круговая орбита обращения геостационарного спутника Земли, лежащая в плоскости земного экватора

По геометрической форме

Эллиптические и круговые

высокоэллиптическая орбита (спутника)

геостационарная орбита

Орбита обращения спутника, имеющая форму эллипса, в одном из фокусов которого находится центр Земли, и оси которого имеют фиксированное направление по отношению к звездам

По высоте круговые(негеостационарные) орбиты подразделяются:

средневысотная орбита (спутника)-Круговая орбита обращения спутника на высотах от 5000 до 15000 км над поверхностью Земли medium-earth orbit (of satellite ) MEO

низкая орбита (спутника)Круговая орбита обращения спутника на высотах от 700 до 1500 км над

поверхностью Земли

55. Основные режимы работы ррс р-415

Режим БУК — режим одновременной работы по двум телефонным и двум телеграфным каналам;

Режим А-6Б-резким работы по трем оперативным Тф каналам и одному служебному каналу с аппаратурой уплотнения АЗУР~6Б, которая в комплект станции не входит;

Режим А11Д — режим передачи данных, которая в комплект стации не входит;

Режим СИМПЛ. — одноканальный режим, при котором обеспечивается симплексная работа по любому телефонному каналу с повышенной девиацией частоты;

Режим КАНАЛ ДУ — резким дистанционного управления КВ и УКВ радиостанциями (передатчиками).

Резким КОНТР: «Работа» автоматический контроль наличия связи.

Режим НАСТРОЙКА — режим автоматической настройки приемопередатчика, при котором обеспечивается возможность настройки па любую фиксированию пару частот приема и передачи с помощью декадных переключателей синтезатора частот.

Установка заданного режима работы станции обеспечивается установкой тумблеров и переключателей на блоке контроля и управления.

Из истории становления отечественной военной радиорелейной и тропосферной связи

К. И. Кукк

Задачей военной связи является передача и приём сообщений в системе управления войсками и оружием. Главнейшими её видами являются: связь централизованного боевого управления; связь оперативного боевого управления; связь обеспечения боевых действий; связь взаимодействия и связь оповещения.

Для успешного ведения войны любого масштаба боевое управление должно быть эффективным и гибким, а средства связи – надёжными, устойчивыми и функционировать на суше, в воздухе, в космосе, в море и его глубинах.

Современные войны ведутся с широким использованием средств радиоэлектронной борьбы, что определяет высокие требования к системам и средствам связи в части использования специальных мер помехозащиты. Важное внимание уделяется также защите оборудования и обслуживающего персонала от поражающих факторов – как обычного оружия, так и оружия массового воздействия.

Среди многообразия видов военной связи за последние 50-60 лет широкое распространение получили такие её виды, как радиорелейная и тропосферная связь. Они используются в различных звеньях принятой системы управления: стратегическом, оперативно-тактическом, оперативном и тактическом.

Мне, автору этих строк, посчастливилось быть участником процесса – если уж не зарождения, то, по крайней мере, начального становления отечественной радиорелейной и тропосферной связи в войсках. Поэтому ниже рассмотрены события, которые проходили на глазах автора. Я заранее приношу извинения у тех, кого я не упомянул в этой статье, но кто имеет прямое отношение к развитию радиорелейной и тропосферной технологии в нашей стране.

Радиорелейные линии прямой видимости

По мере роста объёма передаваемой информации различного назначения, как правило, растёт передаваемая полоса частот. Это приводит к необходимости освоения более высоких диапазонов частот, то есть к переходу к УКВ и СВЧ. Однако в таких диапазонах радиоволны могут распространяться практически только в пределах прямой видимости. Для передачи сигналов на более дальние расстояния необходимо было их переизлучение с помощью специальных ретрансляторов, чтобы обогнуть кривизну Земли. Так возникла идея построения радиорелейных линий. Собственно, идея ретрансляции была предложена академиком петербургской академии наук Б.С. Якоби ещё в 1858 г. для телеграфной связи. В 1921 г. патент на телефонную ретрансляцию получил В.И. Коваленко. Большой вклад в развитие ретрансляции сигналов радиовещательных станций был внесён М.А. Бонч-Бруевичем.

Теоретические и практические предпосылки для построения радиорелейных линий и освоения более высокочастотных диапазонов создавались в 1930-е годы. Значительный вклад в решение этих проблем был внесён советскими учеными В.А. Котельниковым, В.И. Сифоровым, А.А. Харкевичем, Н.Д. Девятковым и др.

Работы по созданию мобильных радиорелейных линий для применения в войсках были начаты в Германии ещё в конце 1930-х годов и в США перед самым началом Второй мировой войны. Было разработано несколько модификаций американских станций, которые получили шифр ANTRC-1, -5, -6, -8. Однако об использовании их на фронтах ничего не известно.

С первыми войсковыми немецкими радиорелейными станциями нам пришлось столкнуться во время Великой Отечественной войны. Эти станции метрового диапазона назывались “Михаэль” (ДМГ-5А, ДМГ-7А) и обеспечивали одноканальную или двухканальную связь до 150 км при длине одного интервала до 40-50 км. На исходе войны появились радиорелейные станции “Рудольф” и “Штутгарт”. Наши специалисты внимательно изучили трофейное оборудование, провели целый ряд исследований по созданию более совершенной радиорелейной аппаратуры для Советской Армии, и уже в последние военные годы на Западном фронте проходил испытание образец отечественной УКВ радиорелейной линии “Комета”.

Высшим армейским руководством была признана перспективность использования радиорелейных линий связи практически во всех звеньях управления войсками.

Сразу после войны, в начале 1946 г., в лаборатории 4-го отдела радиолокационного института НИИ-244 (ныне ФГУП ВНИИРТ) с участием ЦНИИИС СВ им. К.Е. Ворошилова (ныне 16 ЦНИИ ордена Красной Звезды институт имени маршала войск связи А.И. Белова МО РФ) начались работы по созданию радиолиний с импульсной модуляцией “Рубин” и “Диск”. Обе работы были позже объединены и получили название “Диск-Рубин”. Использование импульсной модуляции диктовалось необходимостью выделения части каналов на промежуточных пунктах без демодуляции каналов, проходящих транзитом. Главным конструктором был назначен начальник лаборатории НИИ-244 Ф.П. Липсман. На базе разработки РРС “Диск-Рубин” были созданы подвижные 6-канальные станции Р-400 с использованием фазовой импульсной модуляции (ФИМ).

Станции приняты на вооружение в 1950 г. Радиорелейная линия в режиме ретрансляции обеспечивала связь на расстоянии до 500 км, а несколько позже – до 1000 км. Станция размещалась на трёх автомашинах ЗИС-151. Использовалась оригинальная антенная опора “УНЖА” высотой 20 м, которая впоследствии была доведена до 30 м. Работа по созданию станции Р-400 ввиду её важности и положительных результатов применения в войсках была отмечена в 1950 г. Сталинской премией с формулировкой “За разработку новой радиоаппаратуры”. В числе лауреатов были главный конструктор Ф.П. Липсман, сотрудники ЦНИИИС СА В.Н. Сосунов, В.Е. Клингер, Г.В. Длугач (впоследствии доктор технических наук Г.В. Длугач перешёл на работу во вновь организованный научно-исследовательский институт НИИ-129).

Дальнейшие работы по модернизации РРЛ с фазовой импульсной модуляцией были направлены на расширение рабочего диапазона частот, увеличение числа каналов до 12, доведение качества телефонных каналов до норм ММКР, а также на уменьшение количества транспортных средств, в том числе за счет снижения числа каналов, ответвляемых на промежуточных пунктах (Р-402, Р-400М).

Одновременно под методическим руководством 16 ЦНИИИС СА на различных предприятиях промышленности разрабатываются малоканальные (два телефонных и два телеграфных канала) мобильные РРЛ, работающие в метровом, а впоследствии и в дециметровом диапазонах волн (Р-401, Р-401М, Р-403, Р-403М, Р-405, Р-405М). Малоканальные станции получили широкое распространение в оперативно-тактических звеньях управления войсками. Они устанавливались в командно-штабных машинах (КШМ) и различных аппаратных машинах, в железнодорожных поездах, на самолетах и вертолетах.

Станции Р-401М работали в диапазоне 60-70 МГц, обеспечивая передачу двух каналов тональной частоты и двух телеграфных каналов на расстояние до 120 км при трёх интервалах. Станции размещались на автомашине ГАЗ-63.

Станция Р-405 имела два диапазона рабочих частот: 60-70 МГц и 390-420 МГц. Она, как и Р-401М, обеспечивала передачу двух каналов тональной частоты и двух телеграфных каналов на расстояние до 120 км при трёх интервалах и размещалась на автомашине ГАЗ-63.

В интересах развития и разработки техники РРС для армии постановлением правительства СССР в марте 1956 г. на базе 4-го отдела НИИ-244 был создан научно-исследовательский институт НИИ-129. При этом нельзя не вспомнить заместителей министра радиопромышленности Г.П. Казанского и А.И. Шокина, которые, понимая роль нового направления техники связи, проявили инициативу и настойчивость при подготовке правительственных документов. Сейчас НИИ-129 называется Московским научно-исследовательским радиотехническим институтом (МНИРТИ). Первым директором МНИРТИ был назначен Г.С. Ханевский, главным инженером – Ф.П. Липсман. В штате института тогда насчитывалось 96 инженеров и 33 рабочих (общая численность МНИРТИ перед развалом СССР превысила 4000 человек) [1, 2].

Г.С. Ханевский был типичным ленинградским интеллигентом, неплохим руководителем, но недостаточно хорошо знающим тонкости радиорелейной техники, к тому же с неважным здоровьем, поэтому почти всеми проблемами института занимался Ф.П. Липсман. Благодаря его активности, уже в 1956 г. в НИИ-129 были разработаны дециметровые РРС “Астра” и 6- и 12-канальные линии с импульсной модуляцией “Лютик” (Р-402).

Почти в то же время при конструкторском бюро Главного управления связи и сигнализации МПС (сокращённо КБ ЦШ) под руководством начальника отдела Главного управления В.Ф. Соколова и заведующего кафедрой Московского института инженеров транспорта А.А. Устинского была организована бригада из молодых инженеров, разрабатывающих импульсную радиорелейную линию для технологических нужд железнодорожного транспорта. Я тоже, как молодой сотрудник КБ ЦШ, попал в эту бригаду. В дальнейшем группа увеличивалась за счет выпускников Ленинградского института инженеров железнодорожного транспорта. По техническим требованиям в линии должно было быть не менее 24 каналов связи. Наши руководители приняли решение начать разработку с создания специализированных измерительных приборов – эталонного модулятора и эталонного демодулятора. И эти приборы были изготовлены. В течение многих лет они верой и правдой служили на благо развития целого семейства радиорелейных линий с фазовой импульсной модуляцией.

Железнодорожные руководители знали об успешных работах, проводимых в НИИ-129, в области разработки систем радиорелейной связи, и организовали встречу с Ф.П. Липсманом. Фрол Петрович радушно встретил путейцев и с гордостью показал новейшие образцы военной радиорелейной техники, которые действительно были выполнены на самом современном для того времени уровне технологий. Когда же речь зашла о необходимости разработки для железнодорожного транспорта 24-канальной РРЛ, Ф.П. Липсман раскритиковал эту идею, считая задачу технически очень сложной, да и потребности такой, как он сказал, как будто бы не было. Стороны расстались, причём каждая из них осталась при своем мнении.

Однако недели через две после этой встречи Ф.П. Липсман пригласил наше руководство в КБ ЦШ. На этой встрече Фрол Петрович предложил провести совместную разработку 24-канальной РРЛ при условии, что большинство разработчиков из КБ ЦШ будут работать в стенах НИИ-129, который в то время переехал в дом 2 в Большом Вузовском переулке (ныне Большой Трехсвятительский переулок). Это предложение было принято, и в августе-сентябре 1956 г. группа специалистов КБ ЦШ перебралась в НИИ-129. В числе прикомандированных оказался и автор этих строк.

Сотрудники института встретили нас очень приветливо. Были предоставлены хорошие рабочие места, необходимое измерительное оборудование. Не могу не вспомнить добрым словом М.М. Головчинера, М.Ю. Гринкруга, Л.В. Елдашеву, Л.И. Жукова и многих других талантливых ученых и инженеров этого молодого института.

До этого мне довелось возглавлять небольшую группу инженеров в КБ Главного управления связи и сигнализации МПС, которой, помимо общих вопросов, была поручена разработка передатчика для 24-канальной РРС. В НИИ-129 я продолжил работу над созданием передающего устройства.

С целью снижения переходных помех в каналах радиорелейной линии необходимо было уменьшить длительность и без того коротких радиоимпульсов (~1 мкс) более чем в два раза. Применяемые в СВЧ однокаскадных передатчиках высоковольтные трансформаторы из-за больших паразитных параметров не позволяли решить эту задачу. Попытки найти новые конструктивные решения построения трансформаторов не приводили к желаемым результатам, даже с привлечением к разработке ряда родственных по профилю московских научно-исследовательских институтов.

Когда уже казалось, что эту задачу построения импульсного передатчика по традиционной схеме решить практически невозможно, родилась мысль вообще отказаться от трансформатоpa. Это было достаточно смелое решение, и многие специалисты восприняли его скептически. Потребовалась новая конструкция установки генераторной лампы (металлокерамического триода) в СВЧ колебательный контур. При этом вместо привычного подключения катода к корпусу все электроды лампы оказались под высоким напряжением. Так или иначе, задача была решена, тем более что, к счастью, в 1950-е годы появились новые изоляционные материалы с высокой электрической прочностью, успешно работающие в СВЧ-полях. Эта схема на долгие годы определила построение импульсных передатчиков радиорелейных линий [3].

В начале 1960-х годов разработанная КБ ЦШ совместно с НИИ-129 железнодорожная РРЛ “Жасмин” (УРЛ-24) была внедрена на заводе п/я А-7506 (ныне ростовское ПО “Электроаппарат”) и прошла успешные испытания на железных дорогах Кавказа.

Когда стало ясно, что РРЛ “Жасмин” получается, интерес к разработке проявило Министерство обороны. В НИИ-129 была открыта опытно-конструкторская работа по созданию 24-канальной РРЛ для войск связи “Василёк” (Р-404). При разработке был учтён положительный опыт создания железнодорожной радиорелейной линии.

После успешного проведения ОКР внедрение РРС “Р-404” также проходило на ростовском заводе п/я А-7506 (директором в то время был А.А. Серкин). Расскажу забавный эпизод. На заводе соблюдались все строгости пропускного режима. И вот мы, два еще довольно молодых инженера из НИИ-129 – Леня Жуков и Калью Кукк, приехав в командировку, звоним начальнику цеха с просьбой выписать заявки на пропуска. Через час или два дежурный в бюро пропусков потребовал наши документы и, едва взглянув, вернул: “Заявка прислана на фамилии Кук и Жук. Звоните снова”. Звоним. Еще через час приходит заявка, но уже на Кукова и Жукова. Снова звоним. В общем, на проникновение в цех понадобилось более пяти часов, а на решение технических вопросов – едва ли не вдвое меньше.

Рис. 1. Радиорелейная станция Р-404

Рис. 2. Радиорелейная станция Р-414-03

Разработанная радиорелейная аппаратура Р-404 оказалась очень удачной, и она в 1958 г. была принята на вооружение (рис. 1).

Станция работала в относительно широком диапазоне частот от 1550 МГц до 2000 МГц, обеспечивая плавную и оперативную перестройку частоты при выходной мощности до 50 Вт в импульсе (средняя мощность – около 5 Вт). РРС располагалась на трёх автомобилях ЗИЛ-131. Экипаж из восьми человек обеспечивал развёртывание станции, включая установку антенны (“Унжа”), за 2-2,5 часа. Протяжённость линии составляла до 1000 км.

Такие качества, как простота обслуживания, высокая надёжность, небольшое время развертывания, достаточное для оперативно-тактической связи количество каналов получили высокую оценку в войсках. В течение 30 лет РРС Р-404 выпускалась на наших заводах. Документация также была передана в Польшу, где в течение многих лет производилось это изделие. Аппаратура Р-404, несмотря на давний срок разработки, до настоящего времени находится на вооружении войск – российских и ряда стран СНГ.

С целью дальнейшего увеличения протяжённости РРЛ, повышения надёжности, снижения массо-габаритных параметров в 1973-1974 гг. была проведена модернизация РРС. Новая станция под шифром Р-404М была принята на вооружение в 1975 г. Дальнейшим развитием станций подобного типа является РРС Р-414, принятая на вооружение в 1978 г. и её модернизированный вариант Р-414-03 (рис 2. ). Эта станция воплотила в себе все достигнутые к тому времени успехи электронной промышленности, что позволило повысить её аппаратурную надёжность.

Успехи в создании импульсных РРС для войск связи привлекли внимание связистов других видов и родов войск. Наибольшее применение они получили в войсках противоздушной обороны. Специально для ПВО были разработаны РРС “Циклоида” (5Я662/63) и “Интеграл” (5Я662/5Я663).

Большой вклад в разработку РРЛ с ФИМ внесли сотрудники института М.М. Головчинер, А.А. Мацков, Г.В. Длугач, С.И. Коротков и др.

В 1960 г., после трёхлетнего пребывания в качестве прикомандированного, я был приглашён на постоянную работу в НИИ-129. Я согласился, тем более, что уже тогда втянулся в параллельные разработки по военной тематике.

В те годы для передачи широкополосной информации, включая телевизионную, были созданы аналоговые и аналого-цифровые РРС с частотной модуляцией типа “Левкой” (Р-406, 1962 г.), “Гранит” (Р-416Г, Р-426, 1978 г).

Станция Р-406 обеспечивала передачу в сантиметровом диапазоне частот 48 телефонных каналов и одной программы телевидения, или передачу данных со скоростью 480 кбит/с на расстояние до 1000 км, а при использовании дополнительного блока усилителя мощности (8 Вт) до 2500 км. При этом общее число интервалов могло достигать 60.

В связи с повышением требований к стабильности частоты в станции впервые были применены синтезаторы частоты, которые в то время назывались системами с диапазонно-кварцевой стабилизацией частоты (ДКСЧ). Этими работами руководил начальник лаборатории А.С. Галин.

Оборудование станции размещалось на четырёх автомобилях ЗИЛ-157. При экипаже девять человек время развертывания не превышало 2,5 часа.

Для замены станции Р-406 в середине 1970-х годов была создана РРС Р-416, способная передавать 60 телефонных каналов ТЧ и одну телевизионную программу или данные со скоростью 480 кбит/с. Протяженность линии при 60 интервалах достигала 2500 км. Станции Р-416 до настоящего времени используются в войсках и в качестве средств резервирования военных и гражданских кабельных линий связи. Они выпускались в течение 15 лет, начиная с 1978 г.

Большой научный вклад в создание широкополосных РРС внесли такие специалисты МНИРТИ, как Л.П. Меркадер, М.П. Завельский, Г.В. Безяев и др.

Немаловажное значение для тактического звена управления имели и имеют мобильные и стационарные малоканальные радиорелейные линии (от одного до шести телефонных каналов).

Разработку и производство этих станций, в основном, осуществляло предприятие п/я А-1339 (позднее омское ПО “Радиозавод им. А.С. Попова”). Как указывалось выше, в 1950-е годы были разработаны РРС Р-403 и Р-405. Для подвижных РРС используются телескопические антенные мачты высотой 20 м. Мачта выдерживает воздействие ветра со скоростью до 50 м/с, а при покрытии слоем льда толщиной до 10 мм – скорость ветра до 15 м/с. Многие из разработанных в КБ предприятия дециметровых РРС “Днепр” (Р-409), “Азид” (Р-415, Р-419) до настоящего времени широко используются в различных модификациях в оперативно-тактическом звене управления практически во всех видах Вооруженных Сил России.

Рис. 3. Радиорелейная станция Р-415-ЗА

Рис. 4. Радиорелейная станция Р-415 НВ

На рис. 3 воспроизведено изображение станции Р-415-ЗА, работающей в двух диапазонах частот – 80-120 МГц и 390-430 МГц. Она обеспечивает одновременную связь в трёх направлениях по двум телефонным и двум телеграфным каналам. Станция размещается в кузове-фургоне на шасси автомобиля ГАЗ-66. Время развертывания станции и вхождения в связь составляет 25 минут.

Радиорелейная станция Р-415НВ (рис. 4) выпускается отдельной упаковкой и может устанавливаться как в стационарных условиях, так и на подвижных средствах.

Более поздней разработкой является малоканальная радиостанция типа Р-419-А. Эта станция перекрывает диапазон от 160 до 645 МГц, разделенный на четыре поддиапазона и обеспечивает работу в двух независимых направлениях в 6-канальном режиме. Станция с телескопической антенной высотой 20 м смонтирована в кузове К2-131 на автошасси ЗИЛ-131.

В сентябре 2004 г. омское производственное объединение “Радиозавод им. А.С. Попова” отметило 50-летие. За эти годы объединение сумело решить важнейшие государственные задачи по оснащению современными военными малоканальными станциями радиорелейной связи в различных диапазонах частот.

Самое активное участие в разработках РРС принимали сотрудники 16 ЦНИИИС МО, которые не только готовили тактико-технические задания для промышленных НИИ и КБ, но и вносили личный вклад в разработку средств и систем связи для оборонных нужд. Среди них — А. П. Борисов, Г. А. Малолепший и др.

В последние годы существования СССР значительное внимание уделялось повышению помехозащищенности в линиях радиорелейной связи за счёт расширения спектра сигналов, адаптивной компенсации узкополосных помех, использования методов помехоустойчивого кодирования.

Радиорелейная станция миллиметрового диапазона “Гваюла” (Р-421) является одной из последних разработок МНИРТИ для военной связи. Ее основное назначение – привязка узлов связи (УС) к пунктам управления (ПУ) и УС ПУ к опорной сети. Протяжённость радиорелейной линии – до 300 км при интервале 15 км. “Гваюла” обеспечивала передачу данных со скоростью до 8448 кбит/с. Станция размещалась в одном автомобиле КАМАЗ с прицепом. РРС была принята на вооружение в 1990 г., однако её промышленное производство на ростовском заводе “Электроаппарат” так и не было налажено.

В табл. 1 и 2 приведены характеристики отечественных радиорелейных линий, получивших наибольшее распространение в войсках. Следует отметить, что каждый типономинал имеет ряд модификаций, связанных с особенностями войскового применения, транспортными средствами или вариантом поставки, используемой компонентной базой и т. д. Однако приведённые в таблицах данные являются основными для большинства типономиналов.

После 1991 г. многие, даже не профильные НИИ и КБ, стали активно разрабатывать гражданские радиорелейные станции практически во всех разрешённых диапазонах частот. Нельзя сказать, что у всех это стало хорошо получаться, но, тем не менее, на российском рынке появилось более полутора десятков отечественных цифровых РРЛ. Это не только позволило противодействовать поголовному проникновению на наш рынок зарубежных РРЛ, но и создать соответствующие модификации для военного применения. Так, например, коллектив разработчиков АО “Радиус-2”, который образовался из специалистов во главе с С.А. Мусаэляном, выделившихся из МНИРТИ после 1991 г., разработал линейку РРС, в том числе с модификациями для военного применения. На основе станций “Радиус-ДС” и “Радиус-15” в 2001 г. на вооружение была принята в составе системы “Гранит-В” цифровая РРС Р-169, обеспечивающая передачу данных со скоростью 34 Мбит/с. В настоящее время поставку этих станций осуществляет вновь образованная московская компания “Радиосвязь-ФМ”.

При создании военных радиорелейных линий коллективы разработчиков неизменно поддерживали деловые и творческие контакты с Научно-исследовательским институтом радио (НИИ-100). Опыт разработки в НИИР станций серии “Стрела”, Р-60/120, Р-600, “Восход”, “Курс”, “Радуга” был максимально использован при построении станций специального назначения. Производство многих гражданских радиорелейных станций, разработанных в этом институте, также базировалось на ростовском заводе «Электроаппарат». Неоценимую помощь при этом оказали работы НИИР, связанные с исследованиями распространения радиоволн и методами анализа электромагнитной совместимости. Личные контакты с такими специалистами, как С.В. Бородин, А.И. Калинин, Н.Н. Каменский, В.М. Минкин во многом способствовали становлению военных радиорелейных линий связи [4, 5].

В период интенсивных разработок военных радиорелейных линий начальником связи Вооруженных Сил (НС ВС), заместителем начальника Генерального штаба ВС СССР был маршал А.И. Белов, который уделял этому виду связи особое внимание. И это не удивительно. Будучи старшим преподавателем кафедры тактики связи в Ленинградской академии связи, в начале 1950-х годов Андрей Иванович защитил кандидатскую диссертацию о применении радиорелейной связи в армейской операции. Диссертация была основана на практическом опыте учений в районе Мурома. Эта работа способствовала дальнейшему широкому внедрению радиорелейной связи в войсках. Значительный вклад в это направление техники внесли генералы Управления НС ВС Е.А. Шитов, А.А. Недин, А.П. Редин и др. [6-7].

Таблица 1: Основные характеристики военных малоканальных (до 12 телефонных каналов) РРЛ

ТипДиапазон частот, МГцПротяженность линии, кмЧисло интерваловЧисло каналов/скорость передачи, кбит/сМетод модуляцииТранспортные единицыВремя развертывания, минГод принятия на вооружение
Р-4001550-1750500106ТЧИФМ3 ЗИЛ-15190-1201950
Р-400М1550-175010002012 ТЧИФМ3 ЗИЛ-15790-1201958
Р-40166-70до 12032 ТЧ + 2 ТГЧМГАЗ-61451954
Р-401М66-70до 12032 ТЧ + 2 ТГчмГАЗ-63451957
Р-403, Р-403М60-70до 12032 ТЧ + 2 ТГчмГАЗ-69А
Р-405, Р-405 М60-70, 390-420до 12032 ТЧ + 2 ТГчмГАЗ-63451959, 1968
Р-40960-480до 150-2504-93-6 ТЧчмЗИЛ-131451967
Р-415-НВ80-120, 390-430до 3012ТЧ + 2ТГ, или до 48чм5-101983
Р-415-ЗА80-120, 390-430до 9032ТЧ + 2ТГ,
или до 48
чмГАЗ-66251986
Р-419А160-645до 3007-96 (12, 24, 60) ТЧ или до 480чмГАЗ-66401983

Таблица 2: Основные характеристики военных многоканальных (более 12 телефонных каналов) РРЛ

ТипДиапазон частот, МГцПротяженность линии, кмЧисло интерваловЧисло каналов/скорость передачи, кбит/сМетод модуляцииТранспортные единицыВремя развертывания, минГод принятия на вооружение
Р-4041550-2000100020-2524 ТФФИМ3 авто ЗИЛ-157120-1501961
Р-404М1550-2000150030-4024 ТФФИМ3 авто ЗИЛ-157120-1501975
Р-4063456-381425006048 ТЧ + 1 ТВ
или 480 кбит/с
чм4 авто ЗИЛ-157120-1501963
Р-414-031550-2000до 15003721 ФИМ ТЧ или 2048ФИМ3 ЗИЛ-1311201978
Р416Г5689-6179до 25006060 ТЧ + 1 ТВ
или 60
ТЧ + 480
чм3 ЗИЛ-131 + 2 прицепа120-1501979
Р-42136000-37500до 30020до 120 ТЧ или до 8448Контейнер1990

Литература

  1. Мырова Л. О. Страницы 50-летней истории МНИРТИ// Электросвязь. –2006. –№ 8.
  2. Кукк К. И. Двадцать семь лет служения МНИРТИ// Электросвязь. –2006. –№ 8.
  3. Кукк К.И., Соколинский В.Г. Радиопередающие устройства многоканальных радиорелейных систем связи. –М.: Связь, 1968.
  4. Гусятинский И.А., Немировский А.С., Рыжков Е.В. Радиорелейные линии связи. –М.: Связь, 1965.
  5. Инженерно-технический справочник по электросвязи. Радиорелейные линии. –М.: Связь, 1971.
  6. Биографическая энциклопедия развития отечественных средств связи и автоматизации управления. Под общей редакцией А. И. Колесникова. –Москва, 2004.
  7. Базовые средства, комплексы и системы военной связи. Энциклопедический справочник, том 1. -16 ЦНИИИ МО РФ, Мытищи. –2005.

Часть II

Статья опубликована в журнале «Электросвязь: история и современность» № 1, 2008 г.
Перепечатывается с разрешения редакции.
Статья помещена в музей 29.06.2009

Назначение, технические характеристики, состав автоматизированной станции помех р–378а(б), страница 46

             Устройство информационно – технического сопряжения (УИТС) предназначено для сопряжения прибора АИ 011 с УУС, а также для формирования управляющих сигналов для АИ011 и  РРС Р415В.

РАДИОРЕЛЕЙНАЯ СТАНЦИЯ  Р – 415В

Назначение  и технические данные

                Диапазон рабочих частот 390 – 429,800 МГц.

                Количество рабочих частот – 200.

                Сетка частот через 200 кГц.

   Разнос между частотами приёмника и передатчика не менее 75 фиксированных волн или не менее 15 МГц.

   Дальность связи при работе на ненаправленную антенну – не менее 30 км.

   Антенны: ненаправленная ДБ12;

                    направленная ДБ11.

   Полоса частот:  Ι канала – 0,3 – 3,4 кГц;

                              Ι Ι канала – 0,3 – 3,4 кГц с блоком Б17;

                                                 0,3 – 2,7 кГц с блоком Б171.

   Мощность передатчика – 6,5 Вт

   Пониженная  мощность – 0,05 – 0,25 от величины нормальной (0,3 – 1,3) Вт.

             Режимы работы:

1.  Режим одновременной работы по двум ТЛФ и двум ТЛГ каналам (режим БУК).

2.  Режим передачи данных (АПД).

3.  Одноканальный режим (режим  СИМПЛЕКС), при котором обеспечивается симплексная работа по любому ТЛФ каналу с повышенной девиацией частоты.

4.  Режим дежурного приёма (ДЕЖ. ПРИЁМ), при котором обеспечивается приём вызова по любому ТЛФ каналу.

5.  Режим автоматического контроля (КОНТРОЛЬ) передачи – КОНТР. ПРД и приёма – КОНТР. ПРМ без излучения в пространство, при котором обеспечивается контроль исправности аппаратуры.

6.  Режим автоматической настройки приёмопередатчика (НАСТРОЙКА), при котором обеспечивается возможность настройки на любую фиксированную пару частот.

   Режим дистанционного управления и работа с аппаратурой уплотнения не используются.

   Электропитание – от трёхфазной сети 380 В частотой 50 Гц или источника постоянного тока напряжением 27 В в зависимости от комплекта поставки и объекта установки.

                      Состав

—  блок уплотнения каналов (БУК) Б17 или  Б171;

—  блок контроля и управления  (БКУ)  Б011;

—  блок приёмопередатчика (БПП)  ДБ03

—  синтезатор частот (СЧ)  Б02

—  блок питания Б04;

—  антеннофидерная система.

Принцип работы и особенности устройства

   Принятый антенной ВЧ сигнал через измеритель проходящей мощности (ИПМ) и приёмное плечо фильтра частотных развязок (ФРЧ) поступает в приёмник, где усиливается, преобразуется в сигнал группового спектра и подаётся в БКУ.

   ИПМ предназначен для контроля и измерения по прибору БКУ падающей и отражённой мощности передатчика в режимах НОРМ. МОЩН и ПОНИЖ. МОЩН, организации работы БПП на внутреннюю нагрузку в режимах КОНТРОЛЬ и НАСТРОЙКА, ответвления в основной тракт сигнала с частотой приёма в режимах КОНТРОЛЬ и НАСТРОЙКА. Конструктивно входит в БПП.

   ФРЧ предназначен для обеспечения одновременной работы приёмника и передатчика на одну антенну. Перестройка фильтров осуществляется автоматически механизмом перестройки с помощью шаговых двигателей.

   Сам блок приёмопередатчика предназначен для выделения принятых антенной ЧМ сигналов, их демодуляции, а также для формирования мощных ВЧ сигналов передатчика.

   Кроме того, в блоке обеспечивается выработка сигналов контроля наличия связи и индикации уровня ВЧ сигнала на входе БПП, индикации падающей и отражённой мощности, нормальная работоспособность блока после обрыва и короткого замыкания антенного тракта.

   Блок обеспечивает контрольные сигналы работоспособности приёмного и передающего трактов. В режиме КОНТРОЛЬ предусмотрена возможность ручного контроля узлов.

Лекции по ВТП — Тема №10 «Техническая эксплуатация техники связи»_тДЦ10.doc


Лекции по ВТП
скачать (31867.3 kb.)

Доступные файлы (9):


содержание

Тема №10 «Техническая эксплуатация техники связи»_тДЦ10.doc

Южно-Уральский государственный университет

Факультет военного обучения

Военная кафедра связи

Цикл военно-специальной и военно-технической подготовки

«Утверждаю»

Начальник кафедры связи
полковник =А.Сергеев=
« » 200 г.

Методическая разработка

для проведения занятий по военно-технической подготовке со студентами

ВУС 121000

Тема №10: «Техническая эксплуатация техники связи»

занятие 1, 2

Обсуждена на заседании цикла

« » 200 г.

Занятие №1 «Обслуживание и эксплуатация техники связи»

1. Освидетельствование и ввод в эксплуатацию техники связи. Допуск

личного состава к самостоятельной работе на технике связи.

2. Техническое обслуживание техники связи, виды ремонтов техники

связи. Планирование ремонта.

3. Списание техники связи.

Занятие №2 «Планирование эксплуатации техники связи»

1. Планирование и учет эксплуатации техники связи.

2. Обязанности должностных лиц по проверке технического состояния

средств связи.

В результате изучения данной темы студенты должны:

Знать:


  • Электрические характеристики каналов и групповых трактов в системах
    радиорелейной связи и требования к ним, порядок регулировки каналов

  • Порядок сопряжения радиоканала с оконечной аппаратурой

Уметь:

  • Использовать методы эксплуатации, методики настройки и регулировки
    аппаратуры многоканальных систем передачи военного назначения

  • Производить измерение и оценку параметров каналов связи

  • Обеспечивать контроль качества связи и проверку работоспособности
    аппаратуры радиорелейной связи

  • Работать с типовыми измерительными приборами, измерять основные
    характеристики каналов и трактов радиорелейной связи, обрабатывать
    результаты измерений и устанавливать их соответствие с действующими
    нормами

^




^

Время(ч)

Вид занятия

Метод проведения

^

1

Обслуживание и эксплуатация техники связи

2

Лекция

Рассказ, беседа

Класс ВТП

2

Планирование эксплуатации техники связи

2

Лекция

Рассказ, беседа

Класс ВТП

Итого:

4

^

Основными видами занятий данной темы являются лекции. Преподаватель готовят место проведения занятий таким образом, чтобы обеспечить обзор доски и плакатов по средствам связи. Накануне преподаватель готовит форму проведения опроса на занятиях, время опроса и намечает, кто и по каким вопросам будет опрошен.

В зависимости от темы, содержания занятия, преподаватель определяет цель демонстрации техники, что, когда и как будет демонстрироваться, сколько это займет времени.

Организуя занятие, преподаватель определяет формы, приемы и методы контроля по уяснению обучаемыми материала занятия. В целях контроля знаний обучаемых, активизации их работы, обучения методики ответов и повторения предыдущего материала на каждом занятии проводится опрос.

Рекомендуются следующие формы опроса:


  • постановка вопроса и ответ на него обучаемого перед группой

  • проведение письменной работы с постоянным охватом обучаемых.

По результатам опроса или письменной работы преподаватель акцентирует внимание обучаемых на слабо уясненные вопросы или неправильное изложение вопросов.

Выработка моральных, профессионально-боевых и психологических качеств у студентов основывается на положении военной доктрины России и ее военной науки на выводах общей и военной психологии о личности на принципах воспитания обучения.

Формирование у обучаемых моральных, профессионально-боевых и психологических качеств следует достигать с помощью следующих приемов и методов:


  • проводить занятие с высокой идейной направленностью

  • проводить занятие так, чтобы содержание изучаемого материала, способы и
    приемы его изучения не только обеспечивали формирование необходимых
    навыков, но и способствовали выработке соответствующих моральных,
    профессионально-боевых и психологических качеств

  • постановка задач, требующих самостоятельного решения

  • организация соревнования между студентами при изучении отдельных
    вопросов.

В ходе занятия студенты накапливают и систематизируют знания, учатся творчески применять их на практике.


  • Напомнить тему занятия

  • Отметить степень достижения поставленных целей

  • Объявить оценки и отметить лучших студентов

  • Нацелить студентов на взаимопомощь при изучении материала занятия

  • Отметить характерные недостатки и указать пути их устранения

  • Напомнить студентам к чему их готовят и отметить необходимость данного занятия для подготовки командиров взводов связи

При проведении занятий руководствоваться принципами:

  • Объективности

  • Перспективности достижения воспитательного эффекта

  • Мобилизация студентов на выполнение новых задач

Задание на самостоятельную подготовку разрабатывается к каждому конкретному занятию и должно содержать следующие указания:

• Какие страницы учебника должны прочитать обучаемые

• Какие вопросы нужно уяснить из прочитанного, что нужно сделать практически
Объем задания должен быть определен с учетом реальных возможностей.

Общие:


  • Строго и точно соблюдать свои функциональные обязанности

  • При проведении работ пользоваться только исправным инструментом

  • Соблюдать дисциплину на занятиях

  • Не проводить работ, не указанных в заданиях

При проведении занятий:

• Тщательно следить за качеством заземления аппаратуры

Занятие №1. Обслуживание и эксплуатация техники связи

Учебные и воспита- Изучить условия эксплуатации техники связи, допуск

тельные цели: личного состава к самостоятельной работе на технике

связи, изучить виды ремонтов техники связи и порядок

их проведения.

Воспитывать у студентов бережное отношение к ВТС.

Время: 2 часа

Вид занятия: Лекция

Материальное 1. Методическая разработка.

обеспечение: 2. РТОС и АСУВ.

3. Видеопроектор, компьютер.

План занятия и расчет времени


^

5 минут

П.

5 минут

Скачать файл (31867.3 kb.)


НОВОСТИ ВПК, ИСТОРИЯ ОРУЖИЯ, ВОЕННАЯ ТЕХНИКА, БАСТИОН, ВОЕННО-ТЕХНИЧЕСКИЙ СБОРНИК. BASTION, MILITARY-TECHNICAL COLLECTION. MILITARY-INDUSTRIAL COMPLEX NEWS, HISTORY OF WEAPONS, MILITARY EQUIPMENT


ПОДВИЖНАЯ ЦИФРОВАЯ РАДИОРЕЛЕЙНАЯ СТАНЦИЯ Р-419Л1
THE MOBILE DIGITAL RADIO RELAY STATION R-419L1

09.06.2017

В бригаду управления общевойсковой армии из учебных центров прибыло около 200 военнослужащих, завершивших подготовку в учебных центрах. Более 30% из них имеют среднее техническое и высшее образование. С поступившим пополнением проводятся занятия по освоению средств связи нового поколения.
Связистам предстоит научиться развертывать полевые подвижные пункты управления, узлы связи, обеспечивать связь в различных диапазонах частот, а также освоить радиорелейную станцию связи Р-419-МП «Андромеда-Д», унифицированные радиостанции Р-166-0,5, модернизированные аппаратные и другую технику.
Благодаря компьютеризированной системе управления средствами связи нового поколения, время на развертывание и настройку аппаратуры сократилось в 2,5 — 3 раза, а дальность связи увеличилась в 2 раза.
Особое внимание в ходе занятий будет уделено практическим действиям по настройке видеоконференцсвязи и электронного обмена данными между абонентами для обеспечения непрерывного управления войсками в различных видах боевых действий в сложных условиях горной местности.
На завершающем этапе одиночной подготовки связисты сдадут нормативы по развертыванию полевых подвижных пунктов управления, полевых узлов связи, с ними проведут комплексные тренировки в различных диапазонах частот.
Пресс-служба Южного военного округа

КОМБИНИРОВАННАЯ РАДИОСТАНЦИЯ Р-166

11.07.2018

Новые средства связи — две радиорелейные станции Р-419Л1 — поступили на вооружение мотострелковой горной бригады Центрального военного округа (ЦВО), дислоцированной в Республике Тыва.
Р-419Л1 предназначена для быстрого развертывания самостоятельных радиорелейных или кабельных линий связи, а также для ответвлений каналов от многоканальных радиорелейных, тропосферных и проводных линий связи, применяемых в качестве временной радиовставки на повреждённых или ремонтируемых кабельных линиях связи. Новая аппаратура позволяет организовывать защищенную видеоконференцсвязь и передавать видеоданные по радиосигналу на скорости от 2048 до 8448 кбит/с.
Радиорелейные станции оснащены аппаратурой определения координат и могут реализовывать топографическую привязку через российскую глобальную спутниковую систему навигации ГЛОНАСС. Кроме того, многофункциональные станции имеют систему кондиционирования и обогрева воздуха, удобные места для работы и отдыха военнослужащих.
Специалисты бригады приступили к освоению современных средств связи нового поколения в полевых условиях.
Формирование бригады в Туве началось в конце 2014 года. Она стала единственным горнострелковым соединением Вооруженных Сил Российской Федерации, дислоцированным за Уралом.
Пресс-служба Центрального военного округа

20.09.2018

На вооружение общевойсковой армии Восточного военного округа, дислоцированной на территории Амурской, Еврейской автономной области и Хабаровского края, поступила партия новых цифровых радиорелейных станций Р-419Л1. Данные станции в разы повысят возможности подразделений связи соединений и воинских частей объединения.
Станции исполнены на базе автомобилей высокой проходимости КамАЗ-4350. Они позволяют осуществлять прием и передачу информации на удалении до 400 км в режиме радиорелейной линии, а также организовать видеоконференцсвязь. Кроме того, станция может определять местоположение в спутниковой системе навигации ГЛОНАСС и работать автономно до 15 суток в любых климатических условиях Дальнего Востока.
Благодаря компьютеризированной системе управления и продуманной компоновке, скорость развертывания станций уменьшилась в 2,5-3 раза, а дальность передачи сигнала увеличилась почти в два раза по сравнению с предшественниками.
Пресс-служба Восточного военного округа

16.07.2019

Партия из 12 современных многоканальных радиорелейных станций Р-419Л поступила по гособоронзаказу на вооружение подразделений связи Центрального военного округа. Новую технику осваивают специалисты войск связи общевойсковых объединений, дислоцированных в Сибири, Поволжья и на Урале.
Поступившие станции связи предназначены для организации самостоятельных радиорелейных линий связи и создания ответвлений от многоканальных радиорелейных, тропосферных и проводных линий связи.
Благодаря компьютеризированной системе управления новых радиостанций, установленных на базе автомобиля КАМАЗ, удалось до 30% сократить время подготовки связистов к выполнению задач по предназначению, в 2,5 раза быстрее снизить время развертывания и настройку цифровой техники, значительно улучшилось качество и дальность связи – более чем на 500 километров.
Применяя современное оборудование, военные связисты смогут организовать работу в цифровых режимах на линиях связи протяженностью до 1,5 тыс. километров.
Пресс-служба Центрального военного округа

24.12.2020

В соединение связи общевойсковой армии Восточного военного округа (ВВО), дислоцированное в Амурской области, поступила первая цифровая автоматизированная радиорелейная станция нового поколения Р-419Л1М. Она смонтирована на базе автомобиля повышенной проходимости КамАЗ-5350. В сравнении с радиорелейными средствами связи прошлых поколений новая станция обладает рядом характеристик, заметно повышающих мобильность узлов связи, а также надежность линий связи, организованных на их основе, сообщает Пресс-служба Восточного военного округа.
Подвижная цифровая радиорелейная станция Р-419Л1 серийно производится Радиозаводом им. А.С.Попова. Р-419Л1 предназначена для организации дуплексных каналов передачи информации по одно- и многопролетным линиям радиорелейной связи в сетях тактического и оперативного звеньев управления, напоминает ВТС «Бастион».
Радиорелейная станция выполнена на современной элементной базе, что позволило поднять надежность, простоту эксплуатации и ремонтопригодность средств связи на новый уровень. Кроме улучшения технических и эксплуатационных характеристик, значительно улучшен комфорт работы экипажей.
Поступившие на вооружение цифровые автоматизированные средства связи разработаны для работы в сложных климатических условиях и обладают высокой устойчивостью к воздействию средств радиоэлектронной борьбы. Экипаж новой станции уже прошел переобучение и приступит к работе в ходе ближайшей радиотренировки, говорится в сообщении Минобороны.
ВТС «Бастион»


ПОДВИЖНАЯ ЦИФРОВАЯ РАДИОРЕЛЕЙНАЯ СТАНЦИЯ Р-419Л1

Подвижная цифровая радиорелейная станция Р-419Л1 серийно производится Радиозаводом им. А.С.Попова.
Р-419Л1 предназначена для организации дуплексных каналов передачи информации по одно- и многопролетным линиям радиорелейной связи в сетях тактического и оперативного звеньев управления.
Обеспечение встречной работы по радиоканалу с РРС: Р-419Л1, Р-419МП,Р-419М, P-419MЦ,P-419MC, P-419MAf P-419MC2, P-415B, P-419A, P-419C, AзидC1, P-764,P-419MР, Р-409, Р-414-3.
ЦРРС Р-419Л1, выполненная в соответствии с нормативно-технической документацией на военную технику связи, предназначена для быстрого развертывания самостоятельных радиорелейных или кабельных линий связи, ответвления каналов от многоканальных радиорелейных, тропосферных и проводных линий связи, использование в качестве временной радиовставки на повреждённых или ремонтируемых кабельных линиях связи, организации видеоконференцсвязи, передачи видеоданных по радиосигналу.
Станция обеспечивает работу на линиях привязки по 6 каналам ТЧ аппаратуры П-330-6 с возможностью переприема по ТЧ каналам аппаратуры П-340 ГМН на линиях связи протяженностью до 120 км в диапазоне 390-645 МГц, и в цифровых режимах на линиях связи протяженностью до 400 км в диапазоне 390-645 МГц и до 1500 км в диапазоне 1550-1850 МГц.

На Международном военно-техническом форуме «Армия-2016» Радиозавод им. А.С.Попова была представлена подвижная цифровая радиорелейная станция Р-419Л1.
В сентябре 2016 года соединения и воинские части Западного военного округа (ЗВО) в рамках гособоронзаказа получили на вооружение мобильные цифровые радиорелейные станции Р-419Л1 и тропосферные станции связи Р-423АМ (ПМ).
Они позволят значительно увеличить пропускную способность и качество каналов связи, а также существенно облегчат работу командиров различного уровня по управлению войсками.

Все новые образцы в настоящий момент проходят обкатку в полевых условиях в рамках учения войск противовоздушной обороны ЗВО в Астраханской области. Связисты выполняют нормативы по развертыванию новых комплексов и комплексные радиотренировки по организации и поддержанию надежной и устойчивой связи между пунктами управления.
Особое внимание в ходе занятий уделяется практическим действиям военнослужащих по электронному обмену данными между абонентами для обеспечения непрерывного управления войсками в различных видах боевых действий в сложных природно-климатических условиях.
Благодаря компьютеризированной системе управления и средствам связи нового поколения, время на развертывание и настройку аппаратуры сократилось в 2,5-3 раза, а дальность связи возросла вдвое.

В декабре 2016 года в соединения и воинские части общевойскового объединения Центрального военного округа, дислоцированные в Сибири, поступили новые образцы техники связи. Связисты получили подвижные цифровые радиорелейные станции Р-419Л1 и Р-419ГМ на базе автомобиля КамАЗ-4350, которые позволяют организовывать видеоконференцсвязь и передавать видеоданные по радиосигналу.
Данные машины оснащены аппаратурой определения координат и могут реализовывать топографическую привязку через спутниковую систему навигации ГЛОНАСС.
Вся спецтехника обеспечивает передачу высокоскоростных потоков информации на скоростях до 150 Мбит/с.
Многофункциональные станции имеют систему кондиционирования и обогрева воздуха, удобные места для работы и отдыха военнослужащих.

МОДИФИКАЦИИ:
Р-419 “Азид-2” – комплекс малоканальной МВ-ДЦВ радиорелейной связи
Р-419А “Азид-2А” – автомобильная станция (ЖЫ1.100.035) комплекса Р-419 (“Азид-2”). Шасси ЗиЛ-131 с кузовом-фургоном К2.131
Р-419АР – автомобильная станция (без базового шасси) (ЖЫ1.100.035-02) комплекса Р-419 (“Азид-2”)
Р-419АЦ – автомобильная станция (с блоком УЦС) (ЖЫ1.100.035-03) комплекса Р-419 (“Азид-2”)
Р-419БР – возимая станция (ЖЫ1.100.035-01) комплекса Р-419 (“Азид-2”)
Р-419Л1 – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция (ИЯТН.464415.042)
Р-419М “Ускорение-2” – возимая малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция (ИЯТН.464414.020)
Р-419МА – автомобильная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция
Р-419МА1 – автомобильная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция
Р-419МП “Андромеда-Д” – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция (ИЯТН.464415.038). Шасси КамАЗ-4350
Р-419МР – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция (радиально-узловой связи)
Р-419МС – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция
Р-419МС1 – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция
Р-419МС2 – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция
Р-419МТ – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция
Р-419М-УС – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция
Р-419МЦ – подвижная малоканальная МВ-ДЦВ радиорелейная станция (с блоком УЦС) (ИЯТН.464411.095)
Р-419С – стационарная станция (ЖЫ1.000.050) комплекса Р-419 (“Азид-2”) (существует 7 вариантов исполнения)
Р-419СП – стационарная станция (ЖЫ1.000.050-06) комплекса Р-419 (“Азид-2”)
Р-419СУ – стационарная станция комплекса Р-419 (“Азид-2”)
Р-419СЯ “Комендант” – стационарная станция (ящичная) комплекса Р-419 (“Азид-2”)

ХАРАКТЕРИСТИКИ

Транспортная база КАМАЗ 4350
Протяженность интервала, км до 40
Протяженность радиорелейной линии, км до 400
Экипаж, человек 4
Количество направлений связи 2
Диапазон рабочих частот, МГц 390 — 645 (шаг сетки 100 кГц) 1550 -1850 (шаг сетки 1 МГц)
Ориентация антенны дистанционная автоматизированная,
с электроприводом по азимуту и углу места
Аппаратура каналообразования УЦС-Е ТЧ, С1-ФЛ, ОЦК, Е1, Е2, Ethernet
Режим работы непрерывный, круглосуточный, время автономной работы до 15 суток
Высота подвеса антенны, м 20
Мощность потребления oт сети переменного тока кВт не более 4
Электропитание
— 9 от промышленной сети переменного трехфазного тока напряжением 380 В;
— 9 от двух электроагрегатов работающих на борту или выне¬сенных на расстояние до 100 м
Масса снаряженной станции, кг, не более 11 900

Источники: материалы Армия-2016, relero.ru, military.trcvr.ru, пресс-служба ЗВО, пресс-служба ЦВО и др.

ПОДВИЖНАЯ ЦИФРОВАЯ РАДИОРЕЛЕЙНАЯ СТАНЦИЯ Р-419Л1 НА ФОРУМЕ АРМИЯ-2016
РАДИОЗАВОД ИМЕНИ А.С. ПОПОВА ОМПО ОАО (РЕЛЕРО)
РАДИОСВЯЗЬ, ТЕЛЕКОММУНИКАЦИИ

Конъюгаты полимер-тетродотоксин для индукции длительной местной анестезии с минимальной токсичностью

Реагенты

Себациновая кислота (99,0%), малоновая кислота (99,0%), глутаровая кислота (99,0%), триол поликапролактона (триол PCL, 300 Да), глицерин (99,0%), PEG (200, 1000, 2000 Da), N, N’-диизопропилкарбодиимид (DIC, 99,0%), 4-диметиламинопиридин (DMAP, 99,0%), безводный N, N-диметилформамид (DMF, 99,8%) ), безводный диметилсульфоксид (ДМСО, 99,9%), безводный дихлорметан (DCM, 99.8%), дейтерохлороформ (99,96 ат.% D), октилсульфат натрия (SOS, 95,0%), дексаметазон (98,0%), изомер I флуоресцеина изотиоцианата (FITC, 90,0%), натриевая соль флуоресцеина, гексаметилендиизоцианат (HMDI, 99,0%) ), дилаурат дибутилолова (Sn (II), 95,0%) и PBS (pH 7,4) были приобретены у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США). Карбоновая кислота Cyanine5.5 (Cy5.5, 95,0%) была приобретена у Lumiprobe Corporation (Халландейл-Бич, Флорида, США). Тетродотоксин (ТТХ) был получен от Abcam (Кембридж, Массачусетс, США).Наборы TTX ELISA были приобретены у Reagen LLC (Мурстаун, Нью-Джерси, США). Минимальная основная среда Дульбекко (DMEM), фетальная бычья сыворотка (FBS) и пенициллин-стрептомицин были приобретены в Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA).

Синтез полимеров TDP и TD

Полимеры TDP были синтезированы путем этерификации по Стеглиху с использованием DIC в качестве реагента сочетания и DMAP в качестве катализатора. Вкратце, сухой ПЭГ и себациновая кислота (количества корма см. В Таблице 2 и Дополнительной Таблице 1) добавляли в сухую круглодонную колбу.После добавления 8 мл безводного ДМФ, 8 мл безводного ДМСО и 4 мл безводного ДХМ и обработки смеси ультразвуком в течение нескольких минут добавляли DIC (4,336 мл, 28 ммоль) и DMAP (0,489 г, 4 ммоль). Смесь выдерживали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 24 часов. Добавляли глицерин (количества корма см. В таблице 2 и дополнительной таблице 1) и смесь оставляли при комнатной температуре на 24 часа. После реакции DCM из реакционной смеси удаляли с помощью роторного испарителя (Buchi R-210, Marshall Scientific, Hampton, NH, USA).Остаток осаждали 30 мл деионизированной воды и дополнительно промывали 2 раза 30 мл деионизированной воды, содержащей 10 об.% Этанола. Твердый остаток сушили лиофилизацией (Virtis sentry 2.0, SP Scientific, Гардинер, Нью-Йорк, США) в течение ночи. Затем высушенный полимер повторно растворяли в DCM и очищали осаждением 30 мл диэтилового эфира. Затем удаляли супернатант и сушили под вакуумом в течение ночи. Полимеры TDP и TD в виде слегка желтоватого твердого вещества были получены с выходами 88–96%.Высушенные полимеры TDP и TD хранили в эксикаторе для дальнейшего использования.

Синтез конъюгатов TDP – лекарство и TD – лекарство

Конъюгаты TDP – лекарство были синтезированы этерификацией по Стеглиху. Вкратце, сухой ПЭГ и себациновая кислота (количество корма см. В таблице 2 и дополнительной таблице 1) добавляли в круглодонную колбу. После добавления 8 мл безводного ДМФ, 8 мл безводного ДМСО и 4 мл безводного ДХМ и обработки смеси ультразвуком в течение нескольких минут, DIC (4,336 мл, 28 ммоль) и DMAP (0.489 г, 4 ммоль). Смесь выдерживали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 24 часов. Добавляли глицерин (количества корма см. В таблице 2 и дополнительной таблице 1) и смесь оставляли при комнатной температуре на 24 часа. Безводная суспензия ТТХ в ДМСО (8 мл) (для количества корма см. Таблицу 2 и Дополнительную Таблицу 1) и / или дексаметазон (для количества корма см. Таблицу 2 и Дополнительную Таблицу 5) и / или FITC (1 мг, 0,003 ммоль ) и / или Cy5.5 (1,6 мг, 0,003 ммоль), и смесь оставляли при комнатной температуре на 7 дней.После реакции DCM из реакционной смеси удаляли на роторном испарителе. Остаток осаждали 30 мл деионизированной воды и дополнительно промывали 2 раза 30 мл деионизированной воды, содержащей 10 об.% Этанола. Твердый остаток сушили лиофилизацией в течение ночи. Затем высушенный полимер повторно растворяли в DCM и очищали осаждением 30 мл диэтилового эфира. Затем удаляли супернатант и сушили под вакуумом в течение ночи. Конъюгаты TDP – лекарственное средство, слегка желтоватое твердое вещество, были получены с выходами 88–96%.Высушенные конъюгаты TDP – лекарство хранили в эксикаторе для дальнейшего использования.

Синтез T

г D 8 –изоцианат

При обычном синтезе 2,4 г T г D 8 (Mn = 6011, 0,4 ммоль) сушили в колбе на 100 мл под вакуумом в течение ночи. . Затем в колбу добавляли 5 мл безводного ДМСО и последовательно добавляли 1,13 г HMDI (240 мкл, 1,5 ммоль) и 8 мг дилаурата дибутилолова. Реакционную смесь перемешивали при 60 ° C в атмосфере азота в течение ночи.В конце реакции полученные полимеры осаждали диэтиловым эфиром и дополнительно очищали повторным растворением в DCM с последующим осаждением в смеси метанола и диэтилового эфира (5/95, об. / Об.) Для удаления оставшегося дилаурата дибутилолова 32 . При сушке в вакууме получали Т г D 8 –изоцианат с выходами 80–95%.

Синтез T

г D 8 –TTX уретан

Обычно 0,325 г изоцианата T г D 8 сушили в колбе на 100 мл в высоком вакууме в течение ночи.Затем в колбу добавляли 5 мл безводного ДМСО и последовательно добавляли 4 мг дилаурата дибутилолова и 0,1 мг ТТХ, суспендированного в 0,05 мл безводного ДМСО. Реакционную смесь перемешивали при 60 ° C в атмосфере азота в течение ночи. В конце реакции полученные полимеры осаждали диэтиловым эфиром и дополнительно очищали повторным растворением в DCM с последующим осаждением в смеси метанола и диэтилового эфира (5/95, об. / Об.) Для удаления оставшегося дилаурата дибутилолова 32 .После сушки в вакууме получали уретан T г D 8 –TTX с выходом 90–95%.

Измерение краевого угла смачивания

Измерения краевого угла смачивания с водой проводились для полимерной пленки, покрытой центрифугированием на кремниевых подложках, с помощью гониометра, оборудованного автоматическим дозатором (модель 500, Rame-Hart, Succasunna, NJ, USA). Применялся метод статической лежачей капли. На поверхность образца наносили 2 мкл воды и определяли угол смачивания на основе изображений.

1 H ЯМР измерения

Полимер и конъюгаты полимер-лекарство были проанализированы с помощью спектроскопии ядерного магнитного резонанса ( 1 H ЯМР) (Varian 400 МГц, оснащенная 5-миллиметровым AutoX OneProbe и автосэмплером Varian 7600) (Varian, Palo Alto, CA , США). Полимеры растворяли в дейтерохлороформе, и спектры регистрировали при 400 МГц. Химические сдвиги (δ, в ppm) для пиков, соответствующих атомам водорода, выделены курсивом в следующем списке полимеров 15 .s / d / m обозначают форму пика (т. е. синглет, дублет, триплет). 1 H ЯМР (T g D 8 ) (400 МГц, CDCl3) δ / частей на миллион: 1,30 (2 H, м, -C H 2 -), 1,62 (2 H, д, -C H 2 CH 2 O (CO) -), 2,35 (2 H, м, -C H 2 O (CO) -), 3,50–3,85 (2 H, м, OHC H 2 CHO-), 3,94 (1 H, м, -OCH 2 C H OH), 4,05λ – 4,35 (2 H, м, -OC H 2 CHO- ), 5.09 (1 H, с, OHCh3C H O-), 5,26 (1 H, с, -OCH 2 C H O-). 1 H ЯМР (T g D 8 P 1000 ) (400 МГц, CDCl 3 ) δ / частей на миллион: 1,30 (2 H, м, -C H 2 -), 1,62 (2 H, d, -C H 2 CH 2 O (CO) -), 2,35 (2 H, м, -C H 2 O (CO) -), 3,64 ( 2 H, м, -OC H 2 -), 3,94 (1 H, м, -OCH 2 C H OH), 4,05–4,35 (2 H, м, -OC H 2 СНО-), 5.09 (1 H, с, OHCH 2 C H O-), 5,26 (1 H, с, -OCH 2 C H O-). Спектр ЯМР 1 H всех полимеров TDP показан на рис. 2а с указанием ключевых структурных элементов. Некоторые пики не могут быть назначены из-за перекрытия сигналов.

FTIR-измерения

Инфракрасные спектры с преобразованием Фурье (FTIR) были получены с использованием спектрометра Thermo Nicolet Nexus 870, работающего в режиме ослабленного полного отражения (ATR) с детектором дейтерированного триглицинсульфата KBr.Спектры, скорректированные по базовой линии, были собраны на площади 400–4000 см –1 при разрешении 4 см –1 и усреднены по 256 сканированным изображениям для улучшения отношения сигнал / шум. Спектры обрабатывали с помощью программного пакета OMNIC (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, США).

Измерение молекулярной массы

Молекулярную массу определяли методом ГПХ с использованием тетрагидрофурана в качестве растворителя и полистирола в качестве стандартов. ГПХ выполняли с использованием системы Waters, оснащенной дифференциальным рефрактометром 2400.Насос 515 и автоматический пробоотборник 717-plus (Waters Corporation, Милфорд, Массачусетс, США). Скорость потока 1.0 мл мин. -1 .

Деградация полимеров in vitro

Исследования потери массы проводили путем помещения полимеров в устройство для диализа Slide-A-Lyzer MINI (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, США) с пороговым значением 10 000 МВт, диализ против 14 мл. PBS и инкубировали при 37 ° C на платформенном шейкере при 60 об / мин (New Brunswick Innova 40, Eppendorf, Гамбург, Германия). В каждый момент времени диализный раствор заменяли свежим, предварительно нагретым PBS.14 мл диализного раствора замораживали, лиофилизировали и массу остатка взвешивали для анализа потери массы. Половина потери массы рассчитывалась на основе времени, необходимого для накопления потерянной массы, равной половине первоначальной загруженной массы.

Культура клеток

Культура клеток миобластов мышей C2C12 (Американская коллекция типовых культур (ATCC), Манассас, Вирджиния, США) и клеток феохромоцитомы надпочечников крыс PC12 (ATCC, Манассас, штат Вирджиния, США) была проведена, как сообщалось 21 .Вкратце, клетки C2C12 культивировали в среде DMEM с 20% FBS и 1% пенициллина стрептомицина. Клетки высевали на 24-луночный планшет при 50 000 клеток / мл -1 и инкубировали в течение 10–14 дней в среде DMEM с 2% лошадиной сывороткой и 1% пенициллина стрептомицином для дифференцировки в миотубулы. Клетки PC12 выращивали в среде DMEM с 12,5% лошадиной сывороткой, 2,5% FBS и 1% пенициллина стрептомицина. Клетки высевали на 24-луночный планшет и через 24 часа после посева добавляли 50 нг мл фактора роста нервов -1 .

Жизнеспособность клеток

Миобласты мыши C2C12 и клетки феохромоцитомы надпочечника крысы PC12 (1 × 10 4 на лунку) инкубировали с различными концентрациями полимера в течение 24 часов.После инкубации клетки промывали до 5 раз PBS для удаления любых оставшихся полимеров. Жизнеспособность клеток определяли с помощью МТТ. Вкратце, культуральные супернатанты из контрольных лунок и лунок, содержащих полимер, собирали, и клетки инкубировали с МТТ (0,5 мг мл -1 ; 3 часа). Формазан растворяли в 200 мкл ДМСО и измеряли оптическую плотность при 550 нм. Оптическая плотность контрольных лунок была принята за 100%, и жизнеспособность клеток обработанных лунок была определена по отношению к контрольным лункам.

Определение равновесной растворимости ТТХ

Исследования растворимости ТТХ проводили путем уравновешивания избытка ТТХ в органических растворителях.Анализы проводили в пробирках на 2 мл. В каждую пробирку добавляли 1 мл органического растворителя и 1 мг ТТХ. Количество ТТХ было достаточным для насыщения каждого растворителя, о чем свидетельствует осаждение нерастворенного ТТХ. Шейкер-инкубатор использовали для выдерживания образцов при 25 ° C при перемешивании со скоростью 150 об / мин в течение 72 часов (пока образцы не достигли равновесия 33 ). Затем образцы фильтровали через одноразовый капсульный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Для определения растворимости ТТХ в ДМСО и ДМФ фильтраты разбавляли PBS до конечной концентрации 10% ДМСО или ДМФ.Концентрацию ТТХ в смеси измеряли с помощью набора ТТХ ELISA, и стандартную кривую ELISA получали растворением свободного ТТХ в растворе PBS, содержащем 10% ДМСО или ДМФ.

Для определения растворимости TTX в DCM 1 мл фильтрата переносили в круглодонную колбу и DCM удаляли с помощью роторного испарителя. В круглодонную колбу добавляли 0,1 мл лимонного буфера для растворения любого ТТХ. 50 мл раствора разбавляли 450 мл PBS. Концентрацию ТТХ в смеси измеряли с помощью набора ТТХ ELISA.

Определение доли лекарственного средства, связанного с полимером

После завершения реакции этерификации DCM из реакционной смеси удаляли с помощью роторного испарителя. Затем реакционную смесь промывали 30 мл деионизированной воды. Конъюгаты полимер-лекарство центрифугировали при 48 384 × g в течение 5 мин, супернатант собирали как супернатант № 1. Конъюгаты полимер-лекарство промывали 40 мл деионизированной воды и снова центрифугировали. Супернатант собирали как супернатант №2.Концентрацию ТТХ в собранных супернатантах измеряли с помощью ELISA. Концентрацию дексаметазона в собранных супернатантах определяли с помощью ВЭЖХ.

Доля лекарственного средства, связанного с полимером, была рассчитана следующим образом:

$$ {\ mathrm {Proportion}} \, {\ mathrm {of}} \, {\ mathrm {drug}} \, {\ mathrm {bound} } \, {\ mathrm {to}} \, {\ mathrm {полимер}} = \ frac {{{\ mathrm {Drug}} _ {{\ mathrm {feed}}} — {\ mathrm {Drug}} _ {{\ mathrm {unbound}}}}} {{{\ mathrm {Drug}} _ {{\ mathrm {feed}}}}} \ times 100 {\ mathrm {\%}} $$

(1)

Определение загрузки лекарственного средства

Из-за высокой доли лекарственного средства, связанного с полимером (> 99.0%), загрузку лекарственного средства определяли как количество лекарственного средства, деленное на общую массу реагента, подаваемого в реакцию этерификации.

$$ {\ mathrm {Drug}} \, {\ mathrm {loading}} = \ frac {{{\ mathrm {Mass}} _ {{\ mathrm {drug}}}}} {{{\ mathrm { Mass}} _ {{\ mathrm {dicarboxylic}} \, {\ mathrm {acid}}} + {\ mathrm {Mass}} _ {{\ mathrm {triol}}} + {\ mathrm {Mass}} _ { {\ mathrm {PEG}}}}} \ times 100 {\ mathrm {\%}} $$

(2)

Нагрузка лекарством на молекулу TDP рассчитывалась следующим образом:

$$ \ frac {{{\ mathrm {Drug}}}} {{{\ mathrm {TDP}} \, {\ mathrm {Molele}}}} = {\ mathrm {Drug}} \, {\ mathrm {loading}} \, \ times \ frac {{{\ mathrm {Mn}} _ {{\ mathrm {TDP}}}}} {{{\ mathrm {MW }} _ {{\ mathrm {drug}}}}} $$

(3)

Высвобождение лекарственного средства in vitro

Высвобождение лекарственного средства осуществляли путем помещения конъюгатов полимер-лекарственное средство в устройство для диализа Slide-A-Lyzer MINI (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс) с пороговым значением 10 000 МВт, далее диализ с 14 мл PBS и инкубировали при 37 ° C на платформенном шейкере (New Brunswick Innova 40, 60 об / мин).В каждый момент времени диализный раствор заменяли свежим, предварительно нагретым PBS. 0,5 мл диализного раствора было сохранено для анализа лекарств. Концентрацию ТТХ в высвобождающей среде количественно определяли с помощью ELISA. Концентрацию дексаметазона определяли с помощью ВЭЖХ (Agilent 1260 Infinity, Agilent, Санта-Клара, Калифорния, США) с использованием колонки C18 (Poroshell 120 EC-C18, 4,6 × 100 мм, внутренний диаметр 2,7 мкм, Agilent, Санта-Клара, Калифорния, США). ) с подвижной фазой ацетонитрил / вода (70:30) и расходом 0,5 мл мин. -1 .Дексаметазон определяли по УФ-поглощению при λ = 254 нм. Полупериод высвобождения лекарственного средства рассчитывали на основании времени, необходимого для накопления высвобожденного лекарственного средства, равного половине загруженного лекарственного средства.

Оборудование и условия для ЖХ-МС

Анализ выполнялся на приборе Agilent 6130 Single Quadrupole LC / MS. Хроматографическое разделение было достигнуто с использованием колонки Kinetex Hilic (100 × 2,1 мм, 100 Å, частицы 2,6 мкм; Phenomenex, Торранс, Калифорния, США). 0,1% (об. / Об.) Муравьиной кислоты в воде использовали в качестве подвижной фазы А и 0.1% (об. / Об.) Муравьиной кислоты в ацетонитриле использовали в качестве подвижной фазы B. Скорость потока подвижной фазы составляла 500 мкл мин -1 . Объем инъекции составлял 5 мкл. Метод градиентного элюирования был следующим: от 90% B до 10% B от 0 до 10 минут, выдержка при 10% B от 10 до 13 минут, от 10% B до 90% B от 13 до 14 минут.

Изготовление инъекционных составов

Для приготовления инъекционного состава TDP – TTX / PEG200 или TDP – TTX / PEG200 / PPG4000 100 мг конъюгатов TDP – TTX полностью растворяли в избытке DCM с последующим добавлением заранее определенное количество PEG200 или PEG200 / PPG4000 (концентрации см. в дополнительной таблице 7).Полученную смесь встряхивали в течение 1 мин до получения однородного раствора. DCM удаляли на роторном испарителе с последующим вакуумированием при комнатной температуре в течение 2 дней.

Реологические испытания

Реологические свойства составов TDP – TTX / PEG200 контролировали с помощью реометра AR2000 (TA instruments, New Castle, DE, USA), оборудованного регулятором температуры. Для всех испытаний использовалась параллельная пластина диаметром 20 мм. Расстояние между пластинами составляло 0,3 мм.Развертка по частоте от 0,1 до 100 рад / с проводилась при комнатной температуре. Использовалось постоянное напряжение 0,1 Па.

Исследования на животных

Исследования на животных проводились в соответствии с протоколами, утвержденными Комитетом по уходу и использованию животных Бостонской детской больницы в соответствии с руководящими принципами Международной ассоциации по изучению боли. Взрослых самцов крыс Sprague-Dawley (Charles River Laboratories, Уилмингтон, Массачусетс, США) массой 350–400 г содержали группами при 12-часовом / 12-часовом цикле свет / темнота с включенным светом в 6:00 утра.

Инъекции седалищного нерва выполнялись иглой 23 G в левый седалищный нерв под кратковременной изофлуран-кислородной анестезией. 4,34 . Иглу вводили задне-медиально к большому вертлугу, указывая в переднемедиальном направлении, и при контакте с костью препараты вводили в седалищный нерв. Внутривенные инъекции выполнялись иглой 23 G через хвостовую вену под кратковременной изофлуран-кислородной анестезией.

Нейроповеденческое тестирование проводилось на обеих задних конечностях 4,34 .Дефицит в правой (без инъекции) конечности служил показателем системного распределения препарата.

Блокада сенсорного нерва оценивалась с помощью модифицированного тестирования на горячей пластине. Вкратце, задние лапы последовательно (слева, затем справа) подвергали воздействию горячей плиты с температурой 56 ° C (Стултинг, Вуд-Дейл, Иллинойс, США), и время, в течение которого животное позволяло лапе оставаться на горячей плите (тепловая задержка), составляло измеряется. Температурная латентность 2 с указала на отсутствие блокады нерва (исходный уровень), а тепловая латентность в 12 с была максимальной латентностью.Успешная блокада нервов определялась как достижение теплового латентного периода более 7 с. Задние лапы снимали с плиты через 12 с, чтобы предотвратить термическое повреждение. Измерения повторялись трижды для каждого животного в каждый момент времени, и медиана использовалась для дальнейшего анализа данных.

Блокада двигательного нерва оценивалась с помощью теста на нагрузку для определения двигательной силы задней лапы крысы. Короче говоря, крысу помещали одной задней лапой на цифровые весы и позволяли нести ее собственный вес.Регистрировали максимальный вес, который могла выдержать крыса, не касаясь лодыжкой весов, и моторный блок считали достигнутым, когда моторная сила была меньше половины максимальной 4,9 . Измерения повторялись трижды в каждый момент времени, и медиана использовалась для дальнейшего анализа данных.

Продолжительность сенсорного блока рассчитывалась как время, необходимое для возврата тепловой задержки к 7 с (на полпути между базовой линией и максимальной задержкой). Продолжительность моторного блока была определена как время, необходимое для того, чтобы нагрузка вернулась на полпути между нормальным и максимальным блоком.

Конфокальная визуализация

Под кратковременной изофлуран-кислородной анестезией крысам вводили 0,5 мл тестируемого препарата (25 мг конъюгатов FITC-T г D 8 конъюгатов в PEG200, 0,25 мг флюоресцеина натрия в PEG200, 0,25 мг флуоресцеина натрия в PBS), затем умерщвляли через заданные промежутки времени. Седалищные нервы вместе с окружающими тканями собирали и помещали в состав OCT (VWR, Radnor, PA, USA), затем замораживали и хранили при -20 ° C. Срезы (10 мкм) готовили с использованием микротома-криостата (Leica CM3050 S, Wetzlar, Германия) и помещали на предметные стекла.После этого предметные стекла фиксировали предварительно охлажденным 4% параформальдегидом в течение 20 мин при комнатной температуре, промывали 3 раза в PBS (pH 7,4). Наконец, на предметные стекла наносили покрытие ProLong Gold Antifade Mountant (с 4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндолом, DAPI) и покровные стекла. Все изображения были выполнены с использованием многофотонной конфокальной микроскопии Zeiss LSM 710 (Carl Zeiss AG, Оберкохен, Германия).

Система визуализации in vivo (IVIS)

Под изофлуран-кислородной анестезией крыс брили и вводили 0.5 мл исследуемой композиции (25 мг конъюгатов Cy5.5-T г D 8 в PEG200). Были получены изображения флуоресценции in vivo, и интенсивность флуоресценции была оценена в заранее определенные моменты времени после инъекции (под кратковременной изофлуран-кислородной анестезией) с использованием Spectrum IVIS (PerkinElmer, Waltham, MA, USA). Изображения всего тела животных были записаны неинвазивным способом. Для визуализации использовались возбуждающий фильтр 675 нм и эмиссионный фильтр 700 нм. Для исследований распределения тканей ex vivo крыс умерщвляли через 1 день после инъекции и визуализировали седалищный нерв и окружающие ткани.

Сбор ткани и гистология

Крыс умерщвляли через 4 и 14 дней после инъекции (поскольку мы обнаружили, что эти временные точки полезны для оценки как острого, так и хронического воспаления и миотоксичности), и седалищный нерв собирали вместе с окружающими его тканями. ткани. Диссектор не знал, какой раствор вводили каждой крысе.

Образцы мышц фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине и обрабатывали для гистологии (слайды, окрашенные гематоксилином-эозином), используя стандартные методы.Слайды анализировались наблюдателем (MM), не знающим природы отдельных образцов. Образцы оценивали на воспаление (0–4 балла) и миотоксичность (0–6 баллов) 21,35 . Балл воспаления представлял собой субъективную оценку степени тяжести (0: отсутствие воспаления, 1: периферическое воспаление, 2: глубокое воспаление, 3: мышечное гемифасцикулярное воспаление, 4: мышечное голофасцикулярное воспаление). Оценка миотоксичности отражала две характерные особенности миотоксичности местного анестетика: интернализацию ядра и регенерацию.Ядерная интернализация характеризуется миоцитами нормального размера и цветности, но с ядрами, расположенными далеко от их обычного местоположения на периферии клетки 9 . Для регенерации характерны сморщенные миоциты: клетки со скудной эозинофильной цитоплазмой и гиперхроматическими ядрами. Оценка была следующей: 0. нормально; 1. перифасцикулярная интернализация; 2. глубокая интернализация (> 5 клеточных слоев), 3. перифасцикулярная регенерация, 4. глубокая регенерация (> 5 клеточных слоев), 5. гемифасцикулярная регенерация, 6.голофасцикулярная регенерация. Оценка для образца представляет собой наихудшую область (наиболее серьезные повреждения), присутствующую на слайде.

Седалищные нервы фиксировали в растворе KII Карновского, обрабатывали и заливали Epon для окрашивания толуидиновым синим. Их оценивали с помощью оптической микроскопии замаскированно.

Статистика

Данные представлены как средние значения ± стандартное отклонение ( n = 4 в кинетике высвобождения, работе клеток, нейроповеденческих и гистологических исследованиях). Статистические различия между группами были проверены с помощью одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) для множественных сравнений с использованием программного обеспечения Origin (OriginLab Corp.Нортгемптон, Массачусетс, США). p <0,05 считалось статистически значимым.

Заявление об этическом соответствии

Здоровые взрослые крысы-самцы линии Sprague – Dawley весом 350–400 г были приобретены в Charles River Laboratories, и за ними ухаживали в соответствии с протоколами, утвержденными в учреждениях и на национальном уровне. Эксперименты проводились в соответствии с Руководством по использованию животных Детской больницы Бостона и одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Бостонской детской больницы.

Микробиом кожи способствует выработке адаптивного тетродотоксина у ядовитых тритонов

В этом исследовании мы обнаружили, что бактериальные изоляты из четырех родов, Aeromonas, Pseudomonas, Shewanella, и Sphingopyxis , культивированные с кожи T. granulosa , продуцируют ТТХ в лабораторных условиях. Хотя симбионты, продуцирующие ТТХ, были идентифицированы у морских животных (Chau et al., 2011), это первая идентификация бактерий, продуцирующих ТТХ, связанных с пресноводными или наземными животными.Происхождение ТТХ у тритонов с грубой кожей и других земноводных является спорным: пойманные в дикой природе токсичные тритоны сохраняют свою токсичность в длительном лабораторном неволе (Hanifin et al., 2002), а тритоны, вынужденные секретировать свой ТТХ с помощью электрического шока, регенерируют. их токсичность через девять месяцев, несмотря на лабораторные условия, которые препятствовали доступу к диетическим источникам ТТХ (Cardall et al., 2004). Такие результаты демонстрируют, что тритоны не получают ТТХ из своего естественного рациона, но результаты явно не исключают симбиотическое происхождение токсичности ТТХ.В последующем исследовании была предпринята попытка амплифицировать гены 16S рРНК из ДНК, выделенной из тканей тритона с помощью ПЦР, но авторы не смогли амплифицировать бактериальную ДНК из любой ткани, кроме кишечника (Lehman et al., 2004). Этот результат широко цитируется, чтобы утверждать, что у тритонов вообще отсутствуют симбиотические бактерии, что подтверждает эндогенное происхождение ТТХ (Cardall et al., 2004; Gall et al., 2011; Gall et al., 2014; Hanifin, 2010; Hanifin and Гилли, 2015; Уильямс, 2010). Однако подходы, основанные на секвенировании, для характеристики микробных сообществ в то время были ограничены, и становится все более очевидным, что большинство, если не все, животные обладают кожными бактериальными сообществами на внешнем эпителии (McFall-Ngai et al., 2013). Таким образом, наши результаты убедительно свидетельствуют о том, что симбиотические бактерии являются основным источником токсичности ТТХ у тритонов с грубой кожей.

Удивительно, но многие из штаммов-продуцентов ТТХ, выделенных от тритонов, принадлежат к тем же родам, что и ранее идентифицированные у морских животных. ТТХ-продуцент Pseudomonas spp. были выделены из токсичных иглобрюхов, синекольчатых осьминогов и морских улиток (Cheng et al., 1995; Hwang et al., 1989; Yotsu et al., 1987), а также от продуцирующих ТТХ Aeromonas spp.и Shewanella spp. оба были изолированы от иглобрюхов и морских улиток (Auawithoothij and Noomhorm, 2012; Cheng et al., 1995; Simidu et al., 1990; Wang et al., 2008; Yang et al., 2010). ТТХ-продуцирующий Sphingopyxis spp. не были идентифицированы у животных-хозяев или образцов окружающей среды, и этот штамм может быть уникальным для пресноводных или наземных сред. Интересно, что несколько других видов тритонов из разных родов, как известно, обладают ТТХ, в том числе Notophthalmus, Triturus , Cynops , Paramesotriton , Pachytriton и Laotriton (Brodie et al., 1974; Ёцу-Ямасита и Мебс, 2001; Yotsu-Yamashita et al., 2007; Yotsu-Yamashita et al., 2017). Лягушки и жабы из родов Atelopus , Brachycephalus, Colostethus и Polypedates также обладают ТТХ (Daly et al., 1994; Kim et al., 2003; Mebs et al., 1995; Tanu et al., 2001; Yotsu-Yamashita, Tateki, 2010), а также два вида пресноводных плоских червей (Stokes et al., 2014). Таким образом, токсичность ТТХ, наблюдаемая у других земноводных и пресноводных животных, может быть получена из бактериальных источников, аналогичных тем, которые были выявлены в этом исследовании.

Одно из наиболее интересных открытий, сделанных в результате этой работы, — это возможность того, что микробиом кожи способствует гонке вооружений хищник-жертва между токсичными тритонами и устойчивыми к ТТХ подвязочными змеями. Популяции подвязочных змей, симпатичных тритонам, нагруженным ТТХ, обладают несколькими аминокислотными заменами в каналах Na v , которые предотвращают связывание ТТХ, что позволяет устойчивым змеям охотиться на высокотоксичных тритонов (Feldman et al., 2009; Geffeney, 2002; Geffeney et al. др., 2005). По мере того как популяции змей накапливают ступенчатые адаптивные мутации в каналах Na v , отбор приводит к увеличению уровня токсичности у тритонов.Взаимный отбор на повышенную токсичность и резистентность у тритонов и змей, соответственно, приводит к асимметричной эскалации этих двух признаков или «коэволюционной гонке вооружений» (Brodie and Brodie, 1999; Brodie et al., 2005; Dawkins and Krebs, 1979). Если отбор, проводимый хищными подвязочными змеями, способствует повышению уровня токсичности в популяциях тритонов, отбор может влиять не только на генетические вариации вида-хозяина, но также потенциально на вариации микробиома кожи.

Selection может также действовать за счет увеличения относительной численности симбионтов, продуцирующих ТТХ, в коже (Bordenstein and Theis, 2015; Theis et al., 2016). В соответствии с этой гипотезой мы обнаружили, что три многочисленные ОТЕ Pseudomonas присутствовали в большей относительной численности в микробиоте токсичных тритонов по сравнению с нетоксичными тритонами (рис. 2C – D). Pseudomonas OTU00042 был особенно распространен среди токсичных тритонов и являлся важным фактором бета-разнообразия между токсичными и нетоксичными популяциями. Многочисленные продуцирующие ТТХ штаммы Pseudomonas также были выделены в нашем анализе культивирования, что позволяет предположить, что это различное количество может вносить вклад в наблюдаемые вариации токсичности ТТХ в популяциях тритонов.Однако мы не наблюдали дифференциальной численности Aeromonas OTU, которые были многочисленны в обеих популяциях, ни Shewanella или Sphingopyxis OTU, которые были обнаружены только у токсичных тритонов, но присутствовали только в нескольких образцах и в очень низкой численности (рисунок 2 — приложение к рисунку 2). Эти результаты могут также отражать более благоприятные условия культивирования для TTX-продуцирующих Pseudomonas spp. чем для других родов. Таким образом, необходимы дальнейшие сравнения токсичных и нетоксичных тритонов на уровне популяции, чтобы определить, влияет ли состав и / или структура микробиома напрямую на токсичность тритона.

Кроме того, если изменение токсичности ТТХ зависит от селективных сил, симбионты, продуцирующие ТТХ, должны передаваться по наследству, прямо или косвенно, из поколения в поколение. Механизмы, лежащие в основе наследственности микробиома, варьируются от приобретения микробов в окружающей среде в каждом поколении до прямой вертикальной передачи от родителей к потомству (Mandel, 2010). Развитие ассоциированных с кожей микробных сообществ у тритонов и амфибий в более широком смысле неясно, поскольку и идентичность вида-хозяина, и среда обитания, по-видимому, играют важную роль в разных таксонах амфибий (Ellison et al., 2019; Росс и др., 2019). У тритонов одна возможность заключается в том, что бактерии, продуцирующие ТТХ, вертикально переносятся от самок к их яйцам, поскольку яйца тритона содержат ТТХ, а токсичность яиц коррелирует с токсичностью для матери (Gall et al., 2012; Hanifin et al., 2003 ). Другая возможность заключается в том, что тритоны обладают адаптивными особенностями, способствующими приобретению и размножению ТТХ-продуцирующих бактерий заново из окружающей среды в каждом поколении. Факторы хозяина, влияющие на микробиом, могут включать экспрессию антимикробных пептидов (SanMiguel and Grice, 2015) или продукцию метаболитов, которые благоприятствуют микробам, продуцирующим ТТХ.Другие признаки могут влиять на межвидовые взаимодействия в микробиоме, способствуя колонизации и пролиферации симбионтов, продуцирующих ТТХ. Эти черты могут находиться под давлением отбора, чтобы в конечном итоге принести пользу симбионтам, продуцирующим ТТХ, и повысить токсичность ТТХ в популяциях тритонов (Carroll et al., 2003; Magarlamov et al., 2017). Дальнейшие исследования по сравнению токсичных и нетоксичных тритонов на стадиях развития в дикой природе и в неволе могут пролить свет на этот сложный процесс.

Кроме того, из-за проблем, связанных с культивированием in vitro и характеристикой микробной физиологии симбиотических микробов, изолированных от их хозяев, трудно определить, как динамика продукции ТТХ регулируется в сообществах, связанных с хозяином in vivo (Магарламов и др. , 2017). В лабораторных условиях выращивания мы наблюдали продукцию ТТХ, которая обычно составляла менее 0,5 нг / мл -1 . Однако, учитывая, что бактерии, продуцирующие ТТХ, идентифицированные в этом исследовании и на других токсичных животных, выращивались в искусственных лабораторных условиях, независимо от факторов хозяина и взаимодействия с другими микробами, связанными с хозяином, оценка истинного биосинтетического потенциала этих бактерий, продуцирующих ТТХ, представляет собой серьезную проблему. серьезная техническая проблема.Выявление генетической основы производства ТТХ может помочь обойти эту проблему и позволить будущим исследователям применять основанные на секвенировании метагеномные подходы для определения того, какие организмы способны продуцировать ТТХ (Chau and Ciufolini, 2011; Chau et al., 2011). Эти усилия могут также способствовать разработке целевых стратегий культивирования для лучшего воспроизведения среды хозяина и более точного измерения продукции ТТХ in vitro.

Наши результаты также показывают, что токсичные тритоны обладают адаптациями в каналах Na v , которые придают устойчивость к ТТХ.Присутствие параллельных мутаций в семействе каналов Na v у тритонов и других TTX-устойчивых животных предполагает, что эволюция устойчивости включает в себя строго ограниченное прохождение через узкий адаптивный ландшафт. Например, исследования изоформы скелетных мышц Na v 1.4 у различных видов TTX-устойчивых змей выявляют многочисленные конвергентные замены в областях P-петли DIII и DIV, но никогда в DI или DII (Feldman et al., 2012). Модель Na против 1.4 подтипа ТТХ-устойчивых тритонов, включая T. granulosa , также обладают несколькими мутациями в DIV и одной в DIII, но ни одной мутации в DI или DII. Напротив, мутации в сайте DI Y / F-371 часто наблюдаются у нейральных подтипов TTX-устойчивых иглобрюхов, и мы обнаружили, что эта мутация присутствует у трех из четырех нервных подтипов тритонов. Кроме того, сравнивая последовательности каналов Na v у тритонов и других TTX-устойчивых животных, мы обнаружили, что последовательности Na v 1.6 у тритонов и подвязочных змей имеют две идентичные замены в P-петлях DIII V1407I и DIV 1699V (рис. 4 — приложение к рисунку 1).Последовательности Na v как тритона, так и змеи были получены от особей, пойманных в Бентон Ко., Штат Орегон, где тритоны высокотоксичны, а змеи обладают высокой устойчивостью. Эти мутации могут отражать конвергентную молекулярную эволюцию хищников и жертв, реагирующих на одно и то же давление отбора. Возникли ли эти паттерны случайно или из-за ограничений подтипа Na против на эволюцию P-петли, было бы интересно изучить в будущих исследованиях.

Учитывая потенциальную силу отбора на взаимодействия между тритонами и их симбиотической микробиотой в отношении токсичности ТТХ, может быть более уместным рассмотреть эффекты отбора по гологеному , коллективной генетической изменчивости, присутствующей как у хозяина, так и у симбионтов (Bordenstein и Тайс, 2015; Розенберг, Зильбер-Розенберг, 2013).Многие недавние исследования подчеркивают критическую важность связанных с хозяином микробов в базовой физиологии, развитии, питании, функции нервной системы и даже поведении животных (Archie and Theis, 2011; Eisthen and Theis, 2016; McFall-Ngai et al., 2013; Shropshire, Bordenstein, 2016; Theis et al., 2016; van Opstal, Bordenstein, 2015). В коэволюционной гонке вооружений между токсичными тритонами и резистентными змеями отбор может воздействовать на фенотип, который возникает в результате коллективных взаимодействий между хозяином тритона и бактериальными симбионтами, называемыми холобионтами .Одно из предсказаний теории хологенома состоит в том, что адаптивная эволюция может происходить быстро за счет увеличения относительной численности конкретных симбионтов, если метаболиты, полученные из этого симбионта, имеют решающее значение для приспособленности холобионта (Theis et al., 2016). Эта потенциальная эволюционная сила позволила бы избежать долгого и извилистого пути через сложный адаптивный ландшафт для хозяина, особенно для эпистатических признаков, таких как биосинтез ТТХ, который, по прогнозам, включает дюжину или более ферментов (Chau and Ciufolini, 2011; Chau et al., 2011). Будущие исследования, изучающие взаимосвязь между токсичностью тритона-хозяина и составом микробиоты кожи тритона, могут предоставить механистическую основу для наблюдаемых вариаций токсичности тритона в разных популяциях, выявив потенциально интересные случаи параллельной эволюции, происходящей на гологеномном уровне. В целом, химическая защита, такая как нейротоксины, обеспечивает отличные модели для исследования адаптивной эволюции, поскольку эти токсины часто нацелены на эволюционно консервативные белки в нервной системе животных, выявляя механистические связи между последовательностью белков, физиологией и эволюцией.

Инактивация гиппокампа с помощью TTX ухудшает долгосрочное извлечение пространственной памяти и изменяет метаболическую активность мозга

Abstract

Методы функциональной инактивации позволяют изучить участие гиппокампа в каждой фазе формирования пространственной памяти у крысы. В этом исследовании мы применяли тетродотоксин в одностороннем или двустороннем порядке в дорсальный гиппокамп, чтобы оценить роль этой структуры мозга в восстановлении воспоминаний, приобретенных за 28 дней до этого в водном лабиринте Морриса.Мы объединили инактивацию гиппокампа с оценкой метаболизма мозга с использованием гистохимии цитохромоксидазы. Были рассмотрены несколько областей мозга, включая гиппокамп и другие родственные структуры. Результаты показали, что как односторонняя, так и двусторонняя инактивация гиппокампа нарушала восстановление пространственной памяти. Следовательно, в то время как субъекты с двусторонней инактивацией гиппокампа демонстрировали круговой рисунок плавания у боковых стенок бассейна, односторонняя инактивация благоприятствовала плаванию в квадрантах, смежных с целевым.Анализ активности цитохромоксидазы выявил региональные различия в зависимости от степени функциональной блокады гиппокампа. По сравнению с контрольной группой животные с двусторонней инактивацией показали повышенную активность СО в областях СА1 и СА3 гиппокампа во время извлечения, в то время как активность зубчатой ​​извилины существенно снизилась. Однако у односторонних инактивированных животных наблюдалось снижение активности СО в роге Аммона и зубчатой ​​извилине. Это исследование продемонстрировало, что при извлечении по-разному задействованы субрегионы гиппокампа, и баланс между ними нарушается функциональными поражениями гиппокампа.

Образец цитирования: Conejo NM, Cimadevilla JM, González-Pardo H, Méndez-Couz M, Arias JL (2013) Инактивация гиппокампа с помощью TTX ухудшает долгосрочное восстановление пространственной памяти и изменяет метаболическую активность мозга. PLoS ONE 8 (5): e64749. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0064749

Редактор: Грейс Э. Штутцманн, Университет Розалинд Франклин, Соединенные Штаты Америки

Поступила: 17 января 2013 г .; Одобрена: 16 апреля 2013 г .; Опубликовано: 28 мая 2013 г.

Авторские права: © 2013 Conejo et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Эта работа была поддержана Министерством науки и инноваций (Испания) (PSI2008-02106; PSI2010-19348; PSI2011-26985). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Решение загадки памяти включает понимание роли гиппокампа в пространственном поведении, выяснение особого вклада как гиппокампа, так и его взаимодействия с другими структурами мозга. В нескольких исследованиях описывалось влияние односторонних вмешательств в гиппокамп на задачи памяти. В этом отношении кажется хорошо установленным, что частичная инактивация гиппокампа тетродотоксином (ТТХ) или лидокаином вызывала серьезные проблемы с памятью при выполнении различных задач, зависящих от гиппокампа, таких как водный лабиринт Морриса, арены вращения или задачи пассивного избегания, изменяя эти процессы, задействованные в памяти. формирование [1], [2], [3], [4].В последние годы было показано, что гиппокамп может быть необходим для восстановления воспоминаний, приобретенных за несколько дней или недель до [5], [6], [7]. Однако сравнение функциональной односторонней и двусторонней инактивации через длительные периоды после приобретения еще не проводилось.

Оценка активности мозга во время таких экспериментальных манипуляций с использованием гистохимии цитохромоксидазы (CO) пролила свет на взаимодействия между гиппокампом и другими родственными структурами [8], [9], [10].Эти результаты могут предоставить доказательства роли различных структур мозга, участвующих в любой из фаз формирования памяти во время обучения. Таким образом, функциональные интегральные схемы гиппокампа-коры кажутся важными для успешного выполнения и восстановления пространственной памяти [11], [12], [13], [14], [15], [16].

CO — митохондриальный фермент, который катализирует перенос электронов к кислороду, генерируя АТФ, посредством сопряженного процесса окислительного фосфорилирования [17].Активность CO отражает изменения в метаболической способности мозга, вызванные потребностями в энергии, а активность CO регулируется и тесно коррелирует с функциональной активностью мозга [18], [19].

Несколько авторов продемонстрировали изменения СО в схемах памяти, связанных с пространственной памятью, после нескольких экспериментальных манипуляций. Следовательно, он был применен для определения того, как различные структуры изменяют свои метаболические потребности у субъектов, решающих задачи рабочей памяти [20] или при других экспериментальных манипуляциях [9], [21].

Однако неясно, как система гиппокампа и связанные с ней структуры функционально взаимодействуют, когда гиппокамп односторонне или двусторонне неактивен, и субъект вынужден вспоминать пространственную информацию, полученную несколькими неделями ранее, с неповрежденным мозгом. Точно так же неизвестно, как инактивация гиппокампа может влиять на функциональные взаимоотношения между гиппокампом и префронтальной корой и, следовательно, влиять на пространственное поведение. Здесь мы применили гистохимию CO для определения метаболизма мозга у грызунов, которым необходимо восстановить долговременные воспоминания в водном лабиринте Морриса при односторонней или двусторонней обратимой инактивации гиппокампа.Таким же образом, межрегиональные корреляции активности CO среди медиальной префронтальной коры и дорсального гиппокампа также используются для определения функциональных изменений в нейронных сетях после церебральной инактивации.

Материалы и методы

Животные

В этом исследовании использовались тридцать взрослых крыс-самцов линии Вистар (300–350 г) из племенной колонии Университета Овьедо (Овьедо, Испания). Их содержали в стандартных условиях (12-часовой цикл свет / темнота с включенным светом с 08:00 до 20:00), при постоянной комнатной температуре 21 ± 2 ° C с неограниченным доступом к пище и воде.Все экспериментальные процедуры, проводимые с животными, были одобрены комитетом по биоэтике Университета Овьедо и строго следовали Директиве Совета Европейских сообществ (2010/63 / UE) и испанскому законодательству (RD 1201/2005) в отношении ухода и использования экспериментальных животных. животные.

Хирургия

Крыс анестезировали кетамином (100 мг / кг внутрибрюшинно) и ксилазином (5 мг / кг внутримышечно) и вводили дополнительные дозы кетамина внутрибрюшинно. по мере необходимости для поддержания глубокой анестезии. Субъекты были помещены в стереотаксическую рамку (Наришинге, Токио, Япония), и скальп был рассечен и втянут.Череп обнажали и регулировали до тех пор, пока брегма и лямбда не оказались в одной горизонтальной плоскости. После того, как были просверлены небольшие заусенцы, канюли из нержавеющей стали (размер 26) были имплантированы с обеих сторон или односторонне в дорсальный гиппокамп (координаты относительно брегмы: AP –3,5 мм, ML ± 2,5 мм, DV –2,00 мм от твердой мозговой оболочки) в соответствии с Паксиносом. и Атлас Ватсона [22]. Канюли фиксировали с помощью стоматологического цемента и анкерных винтов.

Аппарат

Животные обучались в водном лабиринте Морриса с использованием круглого резервуара для воды из черного стекловолокна (диаметр = 1.5 м и высотой 75 см) на высоте 50 см от пола [23]. Бассейн был заполнен водопроводной водой на высоту 32 см, а черная аварийная платформа была размещена на 2 см ниже поверхности воды. Температура воды поддерживалась на уровне 23 ± 1 ° C в течение всего периода испытаний. В экспериментальной комнате на стенах висели многочисленные визуальные подсказки, такие как плакаты, пластиковая посуда и полка. Бассейн косвенно освещался двумя галогенными прожекторами (500 Вт), расположенными на полу и обращенными к стенам. Водный лабиринт Морриса был разделен практически на четыре квадранта в соответствии с кардинальными точками (север, юг, восток, запад), а пути плавания были записаны и проанализированы с помощью компьютеризированной системы видеонаблюдения (Ethovision Pro, Noldus Information Technologies, Wageningen, The Нидерланды).

Поведенческая процедура

Привыкание.

Крысам давали возможность выздороветь в течение 7 дней, в течение которых они обрабатывались ежедневно. В первый день каждая крыса получила два сеанса привыкания с интервалом в 1 час. Крыс произвольно выпускали четыре раза за сеанс, лицом к стене бассейна из одного из четырех точек компаса вокруг бассейна. Между сеансами испытуемых возвращали в их домашние клетки. Платформа для эвакуации, использованная в первый день, была выкрашена в белый цвет и возвышалась на 2 см над поверхностью воды.Крысам позволяли свободно плавать, чтобы найти спасательную платформу, или помещали на нее, если прошло 60 секунд. Они оставались на платформе 15 с. Затем их поместили в черный пластиковый ведерко на 30 с. Воду перемешивали между испытаниями, чтобы удалить обонятельные следы предыдущих моделей плавания [24].

Фаза обучения.

После фазы привыкания каждое животное получало один сеанс из четырех проб в течение пяти дней подряд, дни со 2 по 6. Платформа оставалась в том же положении, что и во время привыкания.В каждом испытании испытуемых произвольно отпускали из одного из четырех положений компаса, и им приходилось искать скрытую платформу, которая оставалась в том же положении в течение всего периода обучения. На 6 день, после завершения последнего испытания фазы обучения, каждую крысу подвергали испытанию зонда. Платформа для побега была удалена, и субъекты были введены в течение 30 с из квадранта, противоположного целевому квадранту.

Внутримозговые инъекции.

Тетродотоксин (ТТХ), высокоселективный блокатор потенциал-управляемых натриевых каналов, был использован для временной инактивации дорсального гиппокампа.Через 28 дней после окончания обучения крысы получали 1 мкл физиологического раствора или 5 нг ТТХ в 1 мкл физиологического раствора. Во время инфузии крыс помещали на колени экспериментатора, где их уход или чрезмерное движение были ограничены. Инъекционная канюля (32 G), выступающая на 2 мм от направляющей канюли, была введена в гиппокамп. Раствор для инъекций подавали в течение 90 с с помощью шприца Гамильтона, соединенного с канюлей для инъекций с помощью короткого отрезка полиэтиленовой трубки. Канюлю для инъекций оставляли на месте еще на 1 мин для достижения правильной диффузии лекарственного средства из ее кончика.Инактивация тканей длится около 3 ч [25].

Субъектов случайным образом распределили в любую из трех групп: двусторонние инъекции ТТХ (BIL; n = 10), правые односторонние инъекции TTX (RU; n = 10) и инъекции физиологического раствора (CTR; n = 10). Впоследствии крыс возвращали в их домашние клетки, и любые отклонения в движении исследовали в течение 30 минут, прежде чем их помещали в лабиринт для удаленного зонда памяти.

Удаленный зонд памяти.

Зонд удаленной памяти начался через 45 минут после внутримозгового введения.Испытуемых выпускали из квадранта, противоположного целевому квадранту, и разрешали плавать в течение 30 с. Время, проведенное в каждом квадранте, и общее плавание на дистанцию ​​регистрировались и анализировались позже с помощью системы видеонаблюдения. Кроме того, бассейн также был концептуально разделен на центральную круглую область и две концентрические кольцевые области (внутреннюю, среднюю и внешнюю области соответственно). Общее количество посещений и время плавания в этих кольцах использовалось для оценки исследовательской активности каждой группы.

Количественная гистохимия цитохромоксидазы

Через 90 минут после поведенческих процедур крыс обезглавливали и их мозг быстро замораживали в изопентане. Корональные срезы головного мозга (толщиной 30 мкм) получали с помощью микротома-криостата (Microm HM-505E, Гейдельберг, Германия) и обрабатывали для гистохимии CO в соответствии с методом, описанным Gonzalez-Lima и Jones [26]. Всего было проведено двенадцать измерений (четыре измерения в трех последовательных коронарных срезах) для каждой области мозга.Эти измерения были усреднены для получения одного среднего значения на область для каждого животного и были выражены в произвольных единицах оптической плотности (OD). Для количественной оценки ферментативной активности и контроля вариабельности окрашивания в различных ваннах для окрашивания в исследование были включены слайды, включающие наборы стандартов гомогената тканей, полученные из мозга взрослых самцов крыс линии Wistar. Эти стандарты были разрезаны на разную толщину (10, 30, 40 и 60 мкм) и помещены в каждую ванну для окрашивания вместе с остальными предметными стеклами.Ранее среднюю цитохромоксидазную (СО) активность гомогената оценивали спектрофотометрически. Поэтому наборы срезов гомогената головного мозга крысы с известной активностью CO использовали в качестве калибровочных стандартов в каждой ванне для окрашивания CO. Серии коронарных срезов из каждого мозга вместе с полным набором стандартов были использованы для выполнения гистохимии CO.

Вкратце, предметные стекла слегка фиксировали в течение 5 минут 1,5% глутаровым альдегидом, трижды промывали фосфатным буфером и предварительно инкубировали в растворе, содержащем хлорид кобальта и диметилсульфоксид, растворенные в Трис-буфере.После промывки срезов в фосфатном буфере (pH 7,6; 0,1 М) их инкубировали в темноте в течение 1 ч при 37 ° C в растворе, содержащем диаминобензидин, сахарозу, цитохром с и каталазу (Sigma-Aldrich, Испания), растворенные в фосфатный буфер (pH 7,6; 0,1 М), который непрерывно перемешивали. Предметные стекла трижды промывали холодным фосфатным буфером, а затем обезвоживали и закрывали энтелланом (Merck, Дармштадт, Германия).

Кривые регрессии между толщиной среза и известной активностью CO, измеренной в каждом наборе стандартов, были рассчитаны для каждой инкубационной ванны.Наконец, средняя региональная оптическая плотность, измеренная в каждой области мозга, была преобразована в единицы активности CO (микромоль окисленного цитохрома с / мин / г влажной массы ткани при 23 ° C) с использованием рассчитанной кривой регрессии в каждом стандарте гомогената. Интенсивность гистохимического окрашивания CO в каждой интересующей области мозга измеряли денситометрически и переводили в единицы CO с помощью компьютерной рабочей станции анализа изображений (MCID, InterFocus Imaging Ltd., Линтон, Англия), состоящей из высокоточного осветителя, цифровой камеры и компьютер со специальным программным обеспечением для анализа изображений.Активность CO как в правом, так и в левом полушариях выбранных областей мозга (расположенных в коре, промежуточном мозге и миндалине) была ранее измерена у каждого субъекта. Однако существенных различий между правым и левым полушариями не обнаружено. Поэтому мы решили показать только эти области мозга в правом полушарии. У каждого испытуемого в одностороннем порядке измеряли восемь областей мозга. Кроме того, с двух сторон были измерены префронтальная кора и дорсальный гиппокамп. Дорсальная часть гиппокампа (области CA1, CA3 и DG) была измерена приблизительно между –4.30 и –4,40 мм переднезадней части от брегмы (атлас мозга крысы Paxinos & Watson), чтобы избежать возможных прямых эффектов диффузии ТТХ из места инъекции на –3,5 мм. Фактическое расширение зоны влияния ТТХ в месте инъекции было оценено в предыдущих пилотных исследованиях в среднем менее 1,5 мм в диаметре.

Шесть животных, четыре из группы BIL и два из группы RU были выброшены после гистологического исследования, поскольку канюли не достигли гиппокампа. В соответствии с этим окончательное количество испытуемых в группе составило: CTR n = 10, RU n = 8, BIL n = 6.

Статистический анализ

Поведенческие данные.

Средние задержки выхода во время фазы обучения были проанализированы с использованием двустороннего дисперсионного анализа с повторными измерениями (группа x дней). Аналогичным образом, двухфакторные повторные измерения ANOVA (группа x квадрант) использовались для оценки различий между группами в среднем времени, проведенном в разных квадрантах во время исследований удержания и удаленной памяти. Кроме того, среднее количество посещений и время, проведенное в ранее упомянутых круговых концентрических областях в удаленном зонде памяти, были проанализированы с помощью двухфакторного дисперсионного анализа с повторными измерениями (группа x область).Наконец, общее расстояние плавания во время дистанционного зондирования памяти было оценено с помощью одностороннего дисперсионного анализа. После получения значимых результатов ANOVA применялись апостериорные тесты HSD Тьюки.

CO активность.

Различия в активности CO между экспериментальными группами в каждой области мозга оценивали с помощью однофакторного дисперсионного анализа. Апостериорные тесты Тьюки использовались, когда ANOVA указывал на значительные групповые различия. Чтобы оценить возможные изменения функциональной связности гиппокампа, вызванные инъекциями ТТХ, данные региональной активности CO были проанализированы с использованием парных корреляций между областями гиппокампа в каждой экспериментальной группе.Анализ межрегиональных корреляций был выполнен путем расчета корреляций продукта Пирсона и момента. Значения активности CO нормализовали путем деления измеренной активности каждой структуры на среднее значение активности CO в областях гиппокампа, измеренных для каждого животного. Это было сделано для уменьшения вариации интенсивности окрашивания CO, не являющейся результатом экспериментальных манипуляций. Кроме того, чтобы избежать ошибок, связанных с вычислением множественных корреляций с использованием небольших размеров выборки, мы использовали процедуру «складного ножа» [27], основанную на вычислении всех возможных парных корреляций, возникающих в результате удаления одного объекта каждый раз и с учетом только те корреляции, которые остаются значимыми (p <0.01) во всех возможных комбинациях. Статистический анализ выполняли с использованием программного обеспечения для статистического анализа (SigmaStat 3.5, Systat Software, Сан-Хосе, Калифорния, США).

Результаты

Поведенческие результаты

Группы не различались по латентности поиска скрытой платформы ( F 2,21 = 0,23; p > 0,05), но был значительный главный эффект дней ( F 4,84 = 74,9; p <0,001) и отсутствие взаимодействия ( F 8,84 = 0.37; p > 0,05). Тест Tukey HSD показал, что испытуемые усвоили задание, поскольку латентность значительно уменьшалась между сессиями в течение пяти дней обучения ( p <0,05) (рис. 1). Кроме того, группы не различались во время ретенционного исследования ( F 2,21 = 1,57, p > 0,05), но был значительный основной эффект квадранта ( F 3,63 = 23,2; p <0,001). Апостериорный анализ показал, что испытуемые запомнили положение скрытой платформы, поскольку они тратили больше времени на плавание в целевой квадрант ( p <0.01) (рис.2).

Рис. 2. Удерживающий датчик и датчик удаленной памяти.

Среднее время, проведенное в разных квадрантах во время удерживания зонда (левый столбец) и после введения ТТХ (дистанционный зонд памяти, правый столбец) в различных экспериментальных группах. Столбцы представляют собой средние задержки плавания в различных квадрантах водного лабиринта во время зондов. D = целевой квадрант, C = напротив, A = против часовой стрелки, B = по часовой стрелке. * p <0,01, существенно отличается от остальных квадрантов, + p <0.05, значительно отличается по сравнению с квадрантом A. CTR: контроль, RU: справа и BIL: двусторонние группы.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0064749.g002

Когда субъекты получали физиологический раствор или ТТХ в одностороннем или двустороннем порядке, анализ данных удаленного датчика памяти показал взаимодействие между группой и квадрантом ( F 6 , 63 = 13,1; p <0,001). Апостериорный анализ показал, что животные CTR запомнили местоположение платформы двадцать восемь дней спустя, проводя больше времени, плавая в квадранте побега ( p <0.001). Однако группы RU и BIL не искали недостающую платформу в правильном квадранте. Следовательно, группа RU продемонстрировала значительную тенденцию плавать в квадранте C ( p <0,001), тогда как группа BIL не показала предпочтения ни к одному из квадрантов (рис. 2).

Анализ количества посещений заранее определенных концентрических круговых областей показал значимые эффекты групповой ( F 2,21 = 3,87; p <0,05) и круговой области ( F 2,42 = 40 .7; p <0,001) и отсутствие взаимодействия ( F 4,42 = 0,9; p = 0,4). Апостериорный тест показал сильную тенденцию в группах RU и BIL чаще пересекать границы колец, чем в группе CTR (p = 0,06). Не было обнаружено значимых групповых различий в общей дистанции плавания (F 2, 21 = p > 0,05).

Средняя активность CO в головном мозге

Количественная оценка активности CO в дорсальном гиппокампе показала различия между группами в области CA1 (справа: F 2,21 = 121.3; p <0,001 и слева: F 2,21 = 196,6; p <0,001) и область CA3 (справа: F 2,21 = 71,3; p <0,001 и слева: F 2,21 = 23,2; p <0,001). Апостериорный анализ показал, что группа BIL имела значительно более высокую активность CO в областях CA1 и CA3 ( p <0,001) в обоих полушариях. Более того, активность CO была выше в группе CTR по сравнению с группой RU в областях CA1 и CA3 обоих полушарий ( p <0.01).

Что касается зубчатой ​​извилины (DG), ANOVA выявил значительные различия между группами в правой DG ( F 2,21 = 36,7; p <0,001) и левой DG ( F 2,21 = 13,8; р <0,001). В правом DG группа CTR показала более высокую активность CO по сравнению с другими группами (p <0,05), а группа BIL показала более высокую активность CO по сравнению с RU ( p <0,05). В левом DG группы CTR и BIL показали более высокую активность CO, чем группа RU.Средняя региональная активность CO, измеренная в экспериментальных группах, представлена ​​в таблице 1. Мы обнаружили групповые различия только в поясной зоне, при этом группа BIL имела более высокую активность CO в левом полушарии ( F 2,21 = 9,3; p < 0,001). См. Таблицу 2.

Что касается количественной оценки остальных областей мозга, групповые различия проявились в латеральном маммиллярном ядре и энторинальной коре ( F 2,21 = 17,7; p <0,001 и F 2,21 = 27.2; p <0,001 соответственно). Апостериорный тест показал более высокие уровни активности СО во всех экспериментальных группах (RU и BIL) по сравнению с группой CTR ( p <0,05). Различия в активности также проявились в дорсальном ядре таламуса ( F 2,21 = 7,7; p <0,01), периринальной коре ( F 2,21 = 26,7; p <0,001) и базолатеральная миндалина ( F 2,21 = 6,44; p <0.01). Апостериорный тест показал, что группа BIL имела более высокую активность CO по сравнению с остальными группами во всех этих регионах ( p <0,05). См. Таблицу 3 для количественной оценки дополнительных областей мозга.

Межрегиональные внутригрупповые корреляции активности CO гиппокампа

Значительные региональные корреляции были обнаружены в определенных областях правого и левого гиппокампа в разных экспериментальных группах (рис. 3). Отрицательная взаимная корреляция между правой областью CA1 и правой DG была обнаружена в группе CTR.Группа BIL показала положительную корреляцию между левой и правой DG и правой областью CA3. Однако в группе RU были значимые корреляции, ограниченные левым гиппокампом (рис. 3).

Рисунок 3. Межрегиональные внутригрупповые корреляции активности СО.

Схематическая диаграмма, показывающая значительную корреляцию активности CO между правой (R) или левой (l) областью гиппокампа и префронтальной области, рассчитанной для различных экспериментальных групп. Сокращения: прелимбическая (PRL) и инфралимбическая (IL) кора, поясная кора (CG), зубчатая извилина гиппокампа (DG) и подполя (CA1 и CA3).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0064749.g003

Обсуждение

Односторонняя инактивация затрудняет извлечение в такой же степени, как и двусторонняя инактивация

Это исследование показало, что дорсальная односторонняя и двусторонняя инактивация гиппокампа оказывает сходное влияние на восстановление воспоминаний, приобретенных за 4 недели до этого. Период времени, используемый для оценки удаленной памяти, был основан на предыдущих исследованиях, в которых использовался один месяц (28 дней) для оценки долгосрочной или удаленной памяти после инактивации или повреждения гиппокампа [28], [29], [30].Обе обработки ухудшили производительность в тесте с дистанционным зондом в водном лабиринте Морриса. Испытуемые не запомнили положение скрытой платформы. Этот результат согласуется с предыдущими работами, в которых сообщалось об участии гиппокампа в восстановлении пространственных воспоминаний, приобретенных за несколько недель до этого в водном лабиринте Морриса [5], [6], [7]. Следовательно, наши результаты согласуются с недавними доказательствами рекрутирования гиппокампа во время восстановления пространственной памяти [30].

Несмотря на нарушение пространственной памяти в обеих группах, следует отметить, что односторонняя и двусторонняя инактивация изменяли пространственную память по-разному.Следовательно, в то время как пациенты с двусторонним лечением распределяли поиск по пулу, односторонние инактивированные субъекты демонстрировали явное предпочтение латеральному квадранту. Это, вероятно, показывает, что субъекты, получавшие одностороннее лечение, сохраняют некоторые воспоминания, хотя и неточные, о цели, аналогично изменениям, проявляемым крысами, которые получили инактивацию гиппокампа после тренировки, зная как, но не где [31].

Влияние односторонней инактивации гиппокампа на поведение до некоторой степени спорно.Односторонние блокады не всегда нарушают гиппокампально-зависимое поведение. Чтобы понять этот эффект, нам, вероятно, нужно обратить внимание как на используемую задачу, так и на фазу памяти, на которую влияет лечение. Следовательно, в задачах, требующих очень большого пространства, таких как водный лабиринт Морриса или арены активного избегания мест, односторонняя инактивация изменяет все фазы формирования памяти, как показали различные исследования, проведенные в течение последних 20 лет [1], [3], [32] ]. Однако одни и те же вмешательства не всегда изменяют воспоминания в задачах, зависящих от гиппокампа, когда требования к ориентации невысоки.Это случай задач пассивного избегания, когда ориентация и навигация в этой среде ограничены, а требования больше связаны с распознаванием контекста [4], [8], [33].

С другой стороны, необходимо учитывать прерывание фазы памяти во время инактивации гиппокампа. Было продемонстрировано, что поиск более подвержен помехам, чем другие фазы формирования памяти. Как показали Мозер и Мозер [2], количество ткани гиппокампа, необходимое для извлечения, превышает количество ткани, необходимое для извлечения.

Другие фазы формирования памяти также были протестированы при односторонних и двусторонних вмешательствах в гиппокампе, и были получены аналогичные результаты. Следовательно, когда внутригиппокампальные инъекции ТТХ применялись для блокирования консолидации, одностороннее и двустороннее лечение не различались [34]. Итак, хотя односторонняя блокада теоретически оставляет нетронутым контралатеральный гиппокамп, чтобы удерживать память, одного гиппокампа не может быть достаточно, чтобы поддерживать и адекватно обрабатывать пространственные воспоминания. Мы должны учитывать, что когнитивные изменения после односторонней блокады могут быть вызваны вероятным вмешательством между инактивированным и необработанным гиппокампом.В этом отношении хорошо известно, что каждый гиппокамп отправляет и принимает волокна из контралатерального гиппокампа [35], а одностороннее поражение одного гиппокампа может нарушать физиологические процессы на контралатеральной стороне [36], [37].

Также возможно, что пространственная память была латерализована в правый гиппокамп [38], и как следствие этого, инактивация правого гиппокампа нарушала восстановление пространственной памяти. Однако этот момент не ясен. Фактически, инактивация правого и левого гиппокампа показала незначительные поведенческие эффекты [38], в то время как другие авторы не обнаружили их [1].Более того, роль каждого гиппокампа в пространственном поведении также является предметом дискуссий у людей. Следовательно, одностороннего эпилептического очага в медиальной височной доле или одностороннего удаления гиппокампа достаточно для предотвращения пространственного обучения в задачах виртуальной реальности, и это может не зависеть от задействованной стороны мозга [39], [40].

Блокада гиппокампа изменяет метаболическую активность в нескольких структурах, участвующих в пространственной ориентации

С помощью гистохимического исследования цитохромоксидазы (CO)

оценили энергетический метаболизм мозга нескольких структур мозга, которые могут быть задействованы в решении этой задачи.Предыдущие работы показали, что активность ЦО может отражать метаболические изменения, связанные с процессами обучения и памяти [8], [10], [21], [41].

Наше исследование доказало, что DG, CA3 и CA1 проявляют различную метаболическую активность в зависимости от полученного лечения. Группа CTR показала положительные корреляции между правой и левой областями DG и между ипсилатеральными областями CA. Также контралатеральные области CA3 показали положительную корреляцию между ними. Этот паттерн изменяется, поскольку активность гиппокампа блокируется.Области DG и CA3 были предложены для обработки геометрии окружающей среды [42], являясь важными входами мшистых волокон в CA3 для кодирования пространственной информации [43]. Кроме того, в отличие от других групп, двусторонне инактивированные животные демонстрировали диссоциацию в отношении активности CO, обнаруженной в различных областях гиппокампа. Животные с двусторонней инактивацией показали повышенную активность в областях CA1 и CA3 во время извлечения, в то время как активность CO зубчатой ​​извилины значительно снизилась. Возможно, что области CA1 / CA3 и зубчатая извилина выполняют противоположные функции во время различных фаз обработки пространственной памяти.Некоторые авторы [44], [45] продемонстрировали, что вход перфорантного пути в область CA3 имеет решающее значение для процессов извлечения памяти (связанных с механизмом завершения паттерна), тогда как зубчатая извилина имеет решающее значение для процессов кодирования памяти (что, вероятно, связано с пространственным паттерном). механизмы разделения). Это означает, что нарушение обучения или общий дефицит памяти, обнаруживаемый у животного, никогда не способного выполнить задание, не свидетельствует о нарушении выполнения паттернов [46]. Различная активность CO, наблюдаемая между областями рога Аммона и зубчатой ​​извилиной, может указывать на эту диссоциацию, поскольку во время извлечения памяти необходимо завершение пространственного паттерна для восстановления всей сохраненной информации, но разделение паттернов, которое происходит во время кодирования и хранение, не является существенным, и по этой причине зубчатая извилина, по-видимому, подавляется во время экспрессии / извлечения.

Поскольку гиппокамп необходим для адекватной ориентации, частичная двусторонняя и односторонняя инактивация вызвала изменения в других структурах, которые играют важную роль в системе ориентации мозга. Следовательно, паттерны корреляций незначительно меняются в группе RU и сильно изменяются в группе BIL. Эта потеря положительных корреляций подтверждает гипотезу о том, что TTX нарушил сеть, участвующую в восстановлении пространственных воспоминаний. Обратите внимание, что сравнение различных корреляций между компонентами гиппокампа дает информацию о нейронной сети, которая лежит в основе изучаемых поведенческих процессов.В связи с этим было продемонстрировано, что анализ на уровне нейронных сетей более чувствителен к пониманию дисфункций мозга, чем анализ только тех частей, которые интегрируют систему [47].

Обращали внимание и на изменение метаболической активности в исследуемых группах. Наша работа показала, что нарушение поведенческой активности действительно соответствовало увеличению активности мозга в энторинальной коре и латеральном маммиллярном ядре, выявленном с помощью гистохимии CO. Группа CTR показала сниженную активность CO в энторинальной коре по сравнению со всеми обработанными группами.Хорошо известно, что энторинальная кора головного мозга в значительной степени связана с системой гиппокампа и содержит клетки, которые, как предполагается, специализируются на кодировании пространственной информации [48]. Более того, сообщалось, что поражения дорсолатеральной области энторинальной коры нарушают восстановление пространственных воспоминаний, приобретенных за неделю до этого [49]. Поскольку физиология гиппокампа нарушается инъекциями ТТХ, это может вызвать повышение активности тех структур мозга, которые участвуют в восстановлении воспоминаний.Альтернативная гипотеза предполагает, что безуспешные попытки выяснить положение платформы могут увеличить исследовательскую активность и метаболизм CO в энторинальной коре. Как было показано ранее, исследовательская деятельность может регулировать деятельность энторинальной коры. Матров и др. [50] сообщили, что у крыс, которые проявляли высокую исследовательскую активность, повышался окислительный метаболизм в энторинальной коре головного мозга. Как мы описали в отношении частоты посещения различных кольцевых сегментов MWM, инактивированные группы меняли сегмент чаще, чем контрольные, хотя не было обнаружено различий в общем пройденном расстоянии.

Подобные метаболические паттерны наблюдались и в других областях мозга, участвующих в пространственной ориентации. Боковые маммиллярные тела и антеродорсальное таламическое ядро, как известно, принимают участие в цепи Папеза и системе направления головы [51], которая вносит вклад в обработку как аллоцентрических, так и геометрических сигналов [52]. Более того, латеральное маммиллярное ядро ​​напрямую проецируется в антеродорсальное таламическое ядро ​​через маммиллоталамический тракт [53]. Соответственно, поражения маммиллоталамического тракта нарушают аллоцентрическую и эгоцентрическую пространственную навигацию в водном лабиринте [54].Предыдущие исследования показали, что активность СО в латеральных маммиллярных телах изменяется после обучения в задаче пространственной рабочей памяти [20], [55]. В нашей работе группы BIL и RU показали повышенную активность по сравнению с группой CTR. Что касается антеродорсального ядра таламуса, мы обнаружили более высокую активность CO в группе BIL по сравнению с группой CTR. Хотя антеродорсальное ядро ​​таламуса получает основную проекцию из субикулюма, основного выхода гиппокампа, поражения гиппокампа, как сообщается, не нарушают сигналы клеток направления головы [56].Однако хорошо известно, что вышеупомянутые структуры являются частью цепи Папеза, и во время процессов обучения и памяти эти области взаимодействуют, изменяя их метаболизм [8]. Поэтому нет ничего необычного в том, что инактивация гиппокампа вызывает изменения активности CO в этих связанных структурах.

Также необходимо отметить, что группа BIL увеличила активность CO во многих других областях мозга, связанных с цепями памяти. Следовательно, двусторонне инактивированные субъекты увеличивают активность CO в периринальной коре, структуре мозга, которая связана с распознаванием объектов [57], [58] и дискриминацией [59], а также с восстановлением пространственной памяти [60].Как показал Ramos [60], крысы с периринальной инактивацией были нарушены в восстановлении пространственных воспоминаний, которые были хорошо усвоены до вмешательства. Активность в коре поясной извилины также повышена в BIL по сравнению с группами CTR и RU. Эта структура мозга связывает корковые и лимбические структуры и, как сообщается, участвует в пространственной памяти у крыс [61], [62]. Наконец, другие структуры, такие как прелимбическая и инфралимбическая кора, не отражали каких-либо изменений в их активности CO и, вероятно, показывают, что они не были напрямую задействованы или обнаружены гистохимией CO после извлечения пространственной информации, необходимой в нашем эксперименте.Как сообщалось ранее, инфралимбическая и прелимбическая кора играют важную роль в процессах внимания и гибкости поведения [63], но они также участвуют в угашении памяти или консолидации воспоминаний о страхе [64], которые, возможно, не были задействованы в фазе восстановления нашей задачи пространственной памяти. . В соответствии с нашими результатами, недавнее исследование удаленного восстановления пространственной памяти с использованием как функциональных техник инактивации, так и экспрессии c-fos подтвердило, что только поясная извилина коры, а не прелимбическая или инфралимбическая корка необходима для удаленного восстановления памяти [30].

В заключение, этот эксперимент показал, что восстановление пространственной памяти зависит от целостности системы гиппокампа даже через несколько недель после начальной тренировки. Однако, поскольку инактивация гиппокампа изменяет метаболическую активность в областях, функционально связанных с гиппокампом, другие области могут лежать в основе зарегистрированных поведенческих дефицитов. Более того, инактивация одного гиппокампа вызывает тот же эффект, что и двусторонняя блокада этой структуры мозга, эффект, о котором сообщалось в других задачах, зависящих от гиппокампа [3].

Благодарности

Благодарим Nobel Perdu за помощь с английским языком.

Вклад авторов

Эксперимент задумал и спроектировал: NMC JMC JLA. Проведены эксперименты: NMC JMC HGP. Проанализированы данные: NMC HGP. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: HGP MMC JLA. Написал документ: NMC JMC JLA.

Список литературы

  1. 1. Фентон А.А., Бурес Дж. (1993) Навигация по месту у крыс с односторонней инактивацией тетродотоксином дорсального гиппокампа: пространственное, но не процедурное обучение может быть латерализовано для одного гиппокампа.Behav Neurosci 107: 552–564.
  2. 2. Moser MB, Moser EI (1998) Распределенное кодирование и извлечение пространственной памяти в гиппокампе. J Neurosci 18: 7535–7542.
  3. 3. Cimadevilla JM, Wesierska M, Fenton AA, Bures J (2001) Инактивация одного гиппокампа ухудшает избегание стабильного определенного места во время отделения сигналов арены от сигналов комнаты путем вращения арены. PNAS 98: 3531–3536.
  4. 4. Cimadevilla JM, Mendez-Lopez M, Mendez M, Arias JL (2007) Односторонняя блокада гиппокампа показывает, что одного гиппокампа достаточно для обучения задаче пассивного избегания.J Neurosci Res 85: 1138–1142.
  5. 5. Riedel G, Micheau J, Lam AGM, Roloff EvL, Martin SJ и др. (1999) Обратимая нейронная инактивация показывает участие гиппокампа в нескольких процессах памяти. Nat Neurosci 2: 898–905.
  6. 6. Martin SJ, De Hoz L, Morris RGM (2005) Ретроградная амнезия: ни частичное, ни полное поражение гиппокампа у крыс не приводит к преимущественному сохранению удаленной пространственной памяти даже после напоминания. Нейропсихология 43: 609–624.
  7. 7.Broadbent NJ, Squire LR, Clark RE (2010) Устойчивая дорсальная активность гиппокампа не обязательна ни для поддержания, ни для восстановления долговременной пространственной памяти. Гиппокамп 20: 1366–1375.
  8. 8. Конехо Н.М., Гонсалес-Пардо Х., Гонсалес-Лима Ф., Ариас Дж.Л. (2010) Пространственное изучение водного лабиринта: прогрессия мозговых цепей, отображаемая с помощью гистохимии цитохромоксидазы. Neurobiol Learn Mem 93: 362–371.
  9. 9. Fidalgo C, Conejo NM, Gonzalez-Pardo H, Arias JL (2011) Кортико-лимбико-полосатое тело после обучения реакции и обратного развития: исследование метаболического картирования.Brain Res 1368: 143–150.
  10. 10. Cimadevilla JM, Mendez-Lopez M, Mendez M, Arias JL (2011) Межгиппокампальный перенос в задаче пассивного избегания изменяет метаболическую активность в лимбических структурах. Гиппокамп 21: 48–55.
  11. 11. Надел Л., Москович М. (1998) Вклад гиппокампа в кортикальную пластичность. Нейрофармакология 37: 431–439.
  12. 12. Bontempi B, Laurent-Demir C, Destrade C, Jaffard R (1999) Зависящая от времени реорганизация схемы мозга, лежащая в основе долговременного хранения памяти.Nature 400: 671–675.
  13. 13. Рос Дж., Пеллерин Л., Магара Ф., Дауге Дж., Шенк Ф. и др. (2006) Паттерн метаболической активации отдельных субрегионов гиппокампа во время пространственного обучения и восстановления памяти. J Cereb Blood Flow Metab 26: 468–477.
  14. 14. Wang GW, Cai JX (2008) Обратимое отключение гиппокампально-прелимбической корковой цепи нарушает пространственное обучение, но не обучение пассивному избеганию у крыс. Neurobiol Learn Mem 90: 365–373.
  15. 15.Churchwell JC, Morris AM, Musso ND, Kesner RP (2010) Вклад префронтальной и гиппокампа в кодирование и извлечение пространственной памяти. Neurobiol Learn Mem 93: 415–421.
  16. 16. Churchwell JC, Kesner RP (2011) Гиппокампально-префронтальная динамика в пространственной рабочей памяти: взаимодействия и независимая параллельная обработка. Behav Brain Res 225: 389–395.
  17. 17. Wong-Riley M (1989) Цитохромоксидаза: эндогенный метаболический маркер нейрональной активности.Trends Neurosci 12: 94–101.
  18. 18. Wong-Riley M (1979) Изменения в зрительной системе кошек с монокулярным швом или удалением ядра, демонстрируемые гистохимическим анализом цитохромоксидазы. Brain Res 171: 11–28.
  19. 19. Sakata JT, Crews D, Gonzalez-Lima F (2005) Поведенческие корреляторы различий в нейронной метаболической способности. Brain Res Rev 48: 1–15.
  20. 20. Mendez-Lopez M, Mendez M, Lopez L, Arias JL (2009) Обучение пространственной рабочей памяти у молодых самцов и самок крыс: вовлечение различных регионов лимбической системы, выявленное с помощью активности цитохромоксидазы.Neurosci Res 65: 28–34.
  21. 21. Mendez-Lopez M, Mendez M, Lopez L, Arias JL (2011) Производительность памяти и скополамин: гипоактивность таламуса, выявленная с помощью гистохимии цитохромоксидазы. Acta Histochem 113: 465–471.
  22. 22. Паксинос Г., Уотсон Ч. (2005) Мозг крысы в ​​стереотаксических координатах — новый корональный набор. (5-е изд). Elsevier Academic Press, Лондон.
  23. 23. Моррис Р. (1984) Разработка процедуры водного лабиринта для изучения пространственного обучения у крыс.J Neurosci Meth 11: 47–60.
  24. 24. Маасвинкель Х., Уишоу IQ (1999) Хоуминг с использованием локали, таксона и стратегии счисления мертвых крыс, добывающих пищу: сенсорная иерархия в пространственной навигации. Behav Brain Res 99: 143–152.
  25. 25. Журавин И.А., Бурес Дж. (1991) Степень блокады, вызванной тетродотоксином, исследовалась при параличе зрачка, вызванном внутримозговым введением препарата. Exp Brain Res 83: 687–690.
  26. 26. Gonzalez-Lima F, Jones D (1994) Количественное картирование активности цитохромоксидазы в центральной слуховой системе песчанок: исследование с калиброванными стандартами активности и гистохимией с усилением металлов.Brain Res 660: 34–49.
  27. 27. Шао Дж, Ту Д (1995) складной нож и бутстрап. (1 ст. Ред.). Спрингер-Верлаг, Нью-Йорк.
  28. 28. Remondes M, Schuman EM (2004) Роль коркового входа в область CA1 гиппокампа в консолидации долговременной памяти. Природа 431: 699–703.
  29. 29. Франкланд П. У., Бонтемпи Б. (2005) Организация недавних и далеких воспоминаний. Nat Rev Neurosci 6: 119–130.
  30. 30. Лопес Дж., Хербо К., Коскер Б., Энгельн М., Мюллер С. и др.(2012) Контекстно-зависимая модуляция рекрутирования гиппокампа и коры при удаленном поиске пространственной памяти. Гиппокамп 2: 827–841.
  31. 31. Micheau J, Riedel G, Roloff EV, Inglis J, Morris RGM (2004) Обратимая инактивация гиппокампа частично диссоциирует, как и где искать в водном лабиринте. Behav Neurosci 118: 1022–1032.
  32. 32. Cimadevilla JM, Miranda R, Lopez L, Arias JL (2005) Частичная односторонняя инактивация дорсального гиппокампа ухудшает пространственную память в MWM.. Cog Brain Res 25: 741–746.
  33. 33. Lorenzini CA, Baldi E, Bucherelli C, Sacchetti B, Tassoni G (1996) Роль дорсального гиппокампа в приобретении, консолидации и извлечении реакции пассивного избегания крыс: исследование функциональной инактивации тетродотоксина. Brain Res 730: 32–39.
  34. 34. Cimadevilla JM, Miranda R, Lopez L, Arias JL (2008) Двусторонняя и односторонняя инактивация гиппокампа не различались по своему влиянию на процессы консолидации в водном лабиринте Морриса.Int J Neurosci 118: 619–626.
  35. 35. Swanson LW, Wyss JM, Cowan WM (1978) Авторадиографическое исследование организации путей внутригиппокампальных ассоциаций у крыс. J Comp Neurol 181: 681–716.
  36. 36. Van Praag H, Black IB, Stäubli UV (1997) Неонатальные и взрослые поражения гиппокампа: дифференциальные изменения контралатерального ритма гиппокампа. Brain Res 768: 233–841.
  37. 37. Van Praag H, Chun D, ​​Black IB, Stäubli UV (1998) Односторонняя абляция гиппокампа при рождении вызывает снижение контралатерального LTP.Brain Res 795: 170–178.
  38. 38. Клар С., Мюллер С., Перейра де Васконселос А., Баллард Т., Лопес Дж. И др. (2009) Зависящие от гиппокампа функции пространственной памяти могут быть латерализованы у крыс: подход, сочетающий профилирование экспрессии генов и обратимую инактивацию. Гиппокамп 19: 800–816.
  39. 39. Astur RS, Taylor LB, Mamelak AN, Philpott L, Sutherland RJ (2002) Люди с повреждением гиппокампа демонстрируют серьезные нарушения пространственной памяти в виртуальном водном задании Морриса.Behav Brain Res 132: 77–84.
  40. 40. Canovas R, Leon I, Serrano P, Roldan MD, Cimadevilla JM (2011) Нарушение пространственной навигации у пациентов с рефрактерной височной эпилепсией: данные из новой задачи, основанной на виртуальной реальности. Эпилепсия, поведение 22: 364–369.
  41. 41. Conejo NM, Gonzalez-Pardo H, Vallejo G, Arias JL (2007) Изменения в окислительном метаболизме мозга, вызванные тренировкой в ​​водном лабиринте. Неврология 145: 403–412.
  42. 42. Кеснер Р. (2007) Поведенческие функции субрегиона CA3 гиппокампа.Выучите Mem 14: 771–781.
  43. 43. Lassalle JM, Bataille T, Halley H (2000) Обратимая инактивация синапсов мшистых волокон гиппокампа у мышей ухудшает пространственное обучение, но не приводит ни к консолидации, ни к извлечению памяти в навигационной задаче Морриса. Neurobiol Learn Mem 73: 243–257.
  44. 44. Lee I, Kesner RP (2004) Кодирование по сравнению с восстановлением пространственной памяти: двойная диссоциация между зубчатой ​​извилиной и входами перфорантного пути в CA3 в дорсальном гиппокампе.Гиппокамп 14: 66–76.
  45. 45. Джерман Т., Кеснер Р.П., Хансакер М.Р. (2006) Анализ разъединения CA3 и DG при посредничестве кодирования, но не при поиске в задаче обучения пространственному лабиринту. . Learn Mem. 13: 458–464.
  46. 46. Hunsaker MR, Kesner RP (2013) Операция разделения шаблонов и процессы завершения шаблонов, связанные с различными атрибутами или областями памяти. . Neurosci Biobehav Rev. 37: 36–58.
  47. 47. Rowe JB (2010) Анализ связи необходим для понимания неврологических расстройств.Front Syst Neurosci 4: 1–13.
  48. 48. Hafting T, Fyhn M, Molden S, Moser MB, Moser EI (205) Микроструктура пространственной карты в энторинальной коре головного мозга. Природа 436: 801–806.
  49. 49. Steffenach HA, Witter M, Moser MB, Moser EI (2005) Пространственная память у крысы требует дорсолатеральной полосы энторинальной коры. Нейрон 45: 301–313.
  50. 50. Матров Д., Кольц И., Харро Дж. (2007) Церебральный окислительный метаболизм у крыс с высокой и низкой исследовательской активностью.Neurosci Lett 413: 154–158.
  51. 51. Таубе Дж. С. (2007) Сигнал направления головы: происхождение и сенсомоторная интеграция. Анну Рев Neurosci 30: 181–207.
  52. 52. Ванн С.Д. (2011) Роль системы направления головы в геометрическом обучении. Behav Brain Res 224: 201–206.
  53. 53. Hayakawa T, Zyo K (1989) Ретроградное исследование с двойной меткой маммиллоталамических и маммиллотегментарных выступов у крыс. J Comp Neurol 284: 1–11.
  54. 54.Winter SS, Wagner SJ, McMillin JL, Wallace DG (2012) Поражения маммиллоталамического тракта нарушают окончательный расчет у крыс. Eur J Neurosci 33: 371–381.
  55. 55. Conejo NM, Gonzalez-Pardo H, Vallejo G, Arias JL (2004) Участие маммиллярных тел в пространственной рабочей памяти, выявленное с помощью активности цитохромоксидазы. Brain Res 1011: 107–114.
  56. 56. Голоб EJ, Taube JS (1997) Клетки направления головы и эпизодическая пространственная информация у крыс без гиппокампа.PNAS 94: 7645–7650.
  57. 57. Hopkins ME, Bucci DJ (2010) Экспрессия BDNF в периринальной коре головного мозга связана с улучшением памяти при распознавании объектов, вызванным упражнениями. Neurobiol Learn Mem 94: 278–284.
  58. 58. Альбассер М.М., Амин Э., Иорданова М.Д., Браун М.В., Пирс Дж.М. и др. (2011) Отдельные, но взаимодействующие системы памяти распознавания для разных органов чувств: роль периринальной коры головного мозга крысы. Выучите Mem 18: 435–443.
  59. 59. Abe H, Ishida Y, Nonaka H, ​​Iwasaki T (2009) Функциональная разница между периринальной корой головного мозга и гиппокампом крысы в ​​задачах распознавания объекта и места.Behav Brain Res 197: 388–397.
  60. 60. Ramos JMJ (2008) Поражения периферической коры вызывают ретроградную амнезию пространственной информации у крыс: консолидация или извлечение? Выучите Mem 15: 587–596.
  61. 61. Sutherland RJ, Whishaw IQ, Kolb B (1988) Вклады поясной коры в две формы пространственного обучения и памяти. J Neurosci 89: 1863–1872.
  62. 62. Whishaw IQ, Maaswinkel H, Gonzalez CLR, Kolb B (2001) Дефицит аллотетического и идиотического пространственного поведения у крыс с поражениями задней части поясной извилины.Behav Brain Res 118: 67–76.
  63. 63. Delatour B, Gisquet-Verrier P (2000) Функциональная роль предлимбико-инфралимбической коры крыс в пространственной памяти: доказательства их участия в внимании и поведенческой гибкости. Behav Brain Res 109: 113–128.
  64. 64. Laurent V, Westbrook RF (2009) Инактивация инфралимбической, но не предлимбической коры головного мозга нарушает консолидацию и возвращение угасания страха. Выучите Mem 16: 520–529.

(PDF) Изучение диеты как источника тетродотоксина у Pleurobranchaea maculata

Mar.Наркотики 2014, 12 15

27. Ян, Г .; Xu, J .; Liang, S .; Ren, D .; Ян, X .; Бао, Б. Новый продуцент ТТХ Aeromonas

, выделенный из яичника Takifugu obscurus. Toxicon 2010, 56, 324–329.

28. Ясумото, Т .; Yasumura, D .; Yotsu, M .; Michishita, T .; Endo, A .; Котаки, Ю. Бактериальная

продукция тетродотоксина и ангидротетродотоксина. Agric. Биол. Chem. 1986, 50, 793–795.

29. Noguchi, T .; Arakawa, O .; Такатани, Т.Токсичность иглобрюха Takifugu rubripes, выращиваемого в сетках

в море или в аквариумах на суше. Комп. Биохим. Phys., D 2006, 1, 153–157.

30. Williams, B .; Ханифин, Ц .; Brodie, E., Jr .; Броди, Э., III. Хищники узурпируют защиту добычи?

Токсикокинетика тетродотоксина у обыкновенных подвязочных змей после употребления в пищу грубокожих

тритонов. Химиоэкология 2012, 22, 179–185.

31. Kono, M .; Matsui, T .; Furukawa, K .; Ёцу-Ямасита, М.; Ямамори, К. Накопление

тетродотоксина и 4,9-ангидротетродотоксина в культивируемых молодых нифобах кусафугу фугу в результате диетического введения

природного токсичного комонфугу Fugu poecilonotus в печени. Toxicon 2008, 51, 1269–1273.

32. Matsui, T .; Hamada, S .; Коносу, С. Разница в накоплении токсина рыбы фугу и кристаллического тетродотоксина

в рыбе фугу, Fugu rubripes rubripes. Бык. Яп. Soc. Sci. Рыбы. 1981, 47, 535–537.

33.Matsui, T.; Taketsugu, S.; Sato, H.; Yamamori, K.; Kodama, K.; Ishii, A.; Hirose, H.; Shimizu, C.

Toxification of cultured puffer fish by the administration of tetrodotoxin-producing bacteria.

Nippon Suisan Gakkaishi 1990, 56, 705.

34. Yamamori, K.; Kono, M.; Furukawa, K.; Matsui, T. The toxification of juvenile cultured

kusafugu Takifugu niphobles by oral administration of crystalline tetrodotoxin. Shokuhin

Eiseigaku Zasshi 2004, 45, 73–75.

35. Williams, B.L .; Hanifin, C.T .; Brodie, E.D., Jr .; Колдуэлл, Р.Л. Онтогенез уровней тетродотоксина у

синекольчатых осьминогов: материнские инвестиции и очевидное независимое производство в потомстве

Hapalochlaena lunulata. J. Chem. Ecol. 2011, 37, 10–17.

36. Kim, Y.H .; Brown, G.B .; Mosher, H.S .; Фурман, Ф.А.Тетродотоксин: встречаемость у ателопидов

лягушек Коста-Рики. Наука (Н.Ю.) 1975, 189, 151–152.

37.McNabb, P .; Селвуд, A.I .; Munday, R .; Wood, S.A .; Taylor, D.I .; MacKenzie, L.A .; van Ginkel, R .;

Rhodes, L.L .; Cornelisen, C .; Heasman, K .; и другие. Обнаружение тетродотоксина у серых слизней с боковыми жабрами

— Pleurobranchaea maculata и связанный с ним нейротоксикоз собак на пляжах, прилегающих к

заливу Хаураки, Окленд, Новая Зеландия. Toxicon 2010, 56, 466–473.

38. Taylor, D.I .; Wood, S.A .; Макнабб, П. Популяционные исследования Pleurobranchaea maculata и

тетродотоксина в гавани Вайтемата.Подготовлено для Совета Окленда, Cawthron Report No.

2006; Каутронский институт: Нельсон, Новая Зеландия, 2011 г .; п. 11.

39. Soong, T.W .; Венкатеш Б. Адаптивная эволюция устойчивости к тетродотоксинам у животных.

Trends Genet. 2006, 22, 621–626.

40. Bricelj, V.M .; Connell, L .; Konoki, K .; MacQuarrie, S.P .; Scheuer, T .; Catterall, W.A .; Тренер, В.

Мутация натриевого канала, приводящая к устойчивости к сакситоксину у моллюсков, увеличивает риск PSP.Природа

2005, 434, 763–767.

41. Geffeney, S.L .; Fujimoto, E .; Brodie, E.D .; Рубен, П. Эволюционная диверсификация ТТХ-устойчивых натриевых каналов

во взаимодействии хищник-жертва. Nature 2005, 434, 759–763.

42. Shiomi, K .; Yamaguchi, S .; Kikuchi, T .; Ямамори, К .; Мацуи, Т. Появление

тетродотоксин-связывающих высокомолекулярных веществ в жидкости организма берегового краба

(Hemigrapsus sanguineus).Toxicon 1992, 30, 1529–1537.

PKCε-зависимое усиление ТТХ-резистентного тока Nav1.8 путем активации рецептора нейрокинина-1 в нейронах ганглиев задних корешков крыс | Молекулярная боль

  • 1.

    Cao YQ, Mantyh PW, Carlson EJ, Gillespie AM, Epstein CJ, Basbaum AI: Первичные афферентные тахикинины необходимы для того, чтобы испытывать умеренную или интенсивную боль. Природа 1998, 392: 390–394. 10.1038 / 32897

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 2.

    Quartara L, Maggi CA: Рецептор тахикинина NK1. Часть II: Распределение и патофизиологические роли. Нейропептиды 1998, 32: 1–49. 10.1016 / S0143-4179 (98) -4

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 3.

    Вульф CJ, Mannion RJ, Neumann S: Нулевые мутации без субстанции: выяснение механизмов боли с помощью генетической фармакологии. Нейрон 1998, 20: 1063–1066.10.1016 / S0896-6273 (00) 80487-0

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 4.

    Khawaja AM, Rogers DF: Тахикинины: рецептор к эффектору. Int J Biochem Cell Biol 1996, 28: 721-738. 10.1016 / 1357-2725 (96) 00017-9

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 5.

    Mantyh PW, Rogers SD, Honore P, Allen BJ, Ghilardi JR, Li J, Daughters RS, Lappi DA, Wiley RG, Simone DA: Ингибирование гипералгезии путем удаления нейронов пластинки I спинного мозга, экспрессирующих вещество Рецептор. Наука 1997, 278: 275–279. 10.1126 / science.278.5336.275

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 6.

    Николс М.Л., Аллен Б.Дж., Роджерс С.Д., Гиларди Дж.Р., Оноре П., Люгер Н.М., Финке М.П., ​​Ли Дж., Лаппи Д.А., Симоне Д.А., Мантих П.В.: Передача хронической ноцицепции спинномозговыми нейронами, экспрессирующими вещество. Рецептор. Наука 1999, 286: 1558–1561. 10.1126 / science.286.5444.1558

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 7.

    Suzuki R, Morcuende S, Webber M, Hunt SP, Dickenson AH: Поверхностные нейроны, экспрессирующие NK1, контролируют возбудимость спинного мозга посредством активации нисходящих путей. Nat Neurosci 2002, 5: 1319–1326. 10.1038 / nn966

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 8.

    Carlton SM, Coggeshall RE: Повышение регуляции рецепторов нейрокинина 1 в голой коже крыс, вызванное воспалением. Neurosci Lett 2002, 326: 29–32. 10.1016 / S0304-3940 (02) 00299-9

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 9.

    Zhang H, Cang CL, Kawasaki Y, Liang LL, Zhang YQ, Ji RR, Zhao ZQ: Рецептор нейрокинина-1 усиливает активность TRPV1 в первичных сенсорных нейронах через PKCepsilon: новый путь тепловой гипералгезии. J Neurosci 2007, 27: 12067–12077. 10.1523 / JNEUROSCI.0496-07.2007

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 10.

    Акасу Т., Ишимацу М., Ямада К: Тахикинины вызывают входящий ток через рецепторы NK1 в сенсорных нейронах лягушки-быка. Brain Res 1996, 713: 160–167. 10.1016 / 0006-8993 (95) 01506-X

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 11.

    Dray A, Pinnock RD: Влияние вещества P на нейроны сенсорных ганглиев взрослых крыс in vitro. Neurosci Lett 1982, 33: 61–66. 10.1016 / 0304-3940 (82) -6

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 12.

    Иноуэ К., Наказава К., Иноуэ К., Фуджимори К.: Неселективные катионные каналы, связанные с рецепторами тахикинина в сенсорных нейронах крыс. J Нейрофизиол 1995, 73: 736–742.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 13.

    Li HS, Zhao ZQ: Маленькие сенсорные нейроны ганглиев задних корешков крыс экспрессируют функциональный тахикининовый рецептор NK-1. Eur J Neurosci 1998, 10: 1292–1299. 10.1046 / j.1460-9568.1998.00140.x

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 14.

    Акопян А.Н., Сивилотти Л., Вуд JN: Тетродотоксин-резистентный потенциалзависимый натриевый канал, экспрессируемый сенсорными нейронами. Природа 1996, 379: 257–262. 10.1038 / 379257a0

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 15.

    Djouhri L, Fang X, Okuse K, Wood JN, Berry CM, Lawson SN: ТТХ-резистентный натриевый канал Nav1.8 (SNS / PN3): экспрессия и корреляция со свойствами мембраны в первичной ноцицептивной реакции у крыс. афферентные нейроны. J. Physiol 2003, 550: 739–752. 10.1113 / jphysiol.2003.042127

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google Scholar

  • 16.

    Renganathan M, Cummins TR, Waxman SG: Вклад Na (v) 1.8 натриевых каналов в электрогенез потенциала действия в нейронах DRG. Дж. Нейрофизиол 2001, 86: 629–640.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 17.

    Акопян А.Н., Суслова В., Инглэнд С., Окусе К., Огата Н., Уре Дж., Смит А., Керр Б.Дж., МакМахон С.Б., Бойс С., Хилл Р., Станфа Л.С., Дикенсон А.Х., Вуд JN: Тетродотоксин-резистентный натриевой канал SNS выполняет специализированную функцию в болевых путях. Nat Neurosci 1999, 2: 541–548. 10.1038 / 9195

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 18.

    Joshi SK, Mikusa JP, Hernandez G, Baker S, Shieh CC, Neelands T, Zhang XF, Niforatos W., Kage K, Han P, et al .: Вовлечение ТТХ-резистентного натрия канал Nav 1.8 при воспалительных и невропатических, но не послеоперационных болевых состояниях. Боль 2006, 123: 75–82.10.1016 / j.pain.2006.02.011

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 19.

    Khasar SG, Gold MS, Levine JD: Тетродотоксин-резистентный натриевый ток опосредует воспалительную боль у крыс. Neurosci Lett 1998, 256: 17–20. 10.1016 / S0304-3940 (98) 00738-1

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 20.

    Lai J, Gold MS, Kim CS, Bian D, Ossipov MH, Hunter JC, Porreca F: Ингибирование невропатической боли за счет снижения экспрессии тетродотоксин-резистентного натриевого канала NaV1.8. Пейн 2002, 95: 143–152. 10.1016 / S0304-3959 (01) 00391-8

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 21.

    Amir R, Argoff CE, Bennett GJ, Cummins TR, Durieux ME, Gerner P, Gold MS, Porreca F, Strichartz GR: Роль натриевых каналов в хронической воспалительной и невропатической боли. J Pain 2006, 7: S1–29. 10.1016 / j.jpain.2006.01.444

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 22.

    England S, Bevan S, Docherty RJ: PGE2 модулирует тетродотоксин-резистентный натриевой ток в нейронах ганглия дорзального корешка новорожденных крыс через каскад циклической АМФ-протеинкиназы А. J. Physiol 1996, 495 (Pt 2): 429–440.

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google Scholar

  • 23.

    Gold MS, Levine JD, Correa AM: Модуляция TTX-R INa с помощью PKC и PKA и их роль в индуцированной PGE2 сенсибилизации сенсорных нейронов крысы in vitro. J Neurosci 1998, 18: 10345–10355.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 24.

    Икеда М., Йошида С., Кадои Дж., Накано Ю., Мастумото S: Влияние активности PKC на токи натрия TTX-R от нейронов узлового ганглия крысы. Life Sci 2005, 78: 47–53. 10.1016 / j.lfs.2005.04.053

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 25.

    Cummins TR, Dib-Hajj SD, Black JA, Akopian AN, Wood JN, Waxman SG: Новый устойчивый тетродотоксин-резистентный натриевый ток в малых первичных сенсорных нейронах SNS-нулевого и дикого типа. Дж. Neurosci 1999, 19: RC43.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 26.

    Rush AM, Craner MJ, Kageyama T., Dib-Hajj SD, Waxman SG, Ranscht B: Contactin регулирует плотность тока и экспрессию аксонов тетродотоксин-резистентных, но не тетродотоксин-чувствительных натриевых каналов в нейронах DRG. Eur J Neurosci 2005, 22: 39–49. 10.1111 / j.1460-9568.2005.04186.x

    PubMed Статья Google Scholar

  • 27.

    Saab CY, Cummins TR, Waxman SG: GTP gamma S увеличивает ток Nav1.8 в нейронах ганглиев дорсальных корешков малого диаметра. Exp Brain Res 2003, 152: 415–419. 10.1007 / s00221-003-1565-7

    PubMed Статья Google Scholar

  • 28.

    Quartara L, Maggi CA: Рецептор тахикинина NK1. Часть I: лиганды и механизмы клеточной активации. Нейропептиды 1997, 31: 537-563. 10.1016 / S0143-4179 (97)-9

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 29.

    Виджаярагаван К., Бутждир М., Шахин М.: Модуляция натриевых каналов периферических нервов Nav1.7 и Nav1.8 протеинкиназой A и протеинкиназой C. J Нейрофизиол 2004, 91: 1556–1569. 10.1152 / jn.00676.2003

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 30.

    Фитцджеральд Э.М., Окусе К., Вуд Дж. Н., Дельфин А.С., Мосс SJ: цАМФ-зависимое фосфорилирование тетродотоксин-резистентного потенциал-зависимого натриевого канала SNS. J. Physiol 1999, 516 (Pt 2): 433–446. 10.1111 / j.1469-7793.1999.0433v.x

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google Scholar

  • 31.

    Cesare P, Dekker LV, Sardini A, Parker PJ, McNaughton PA: Специфическое участие PKC-эпсилон в сенсибилизации нейронального ответа на болезненное тепло. Нейрон 1999, 23: 617–624. 10.1016 / S0896-6273 (00) 80813-2

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 32.

    Хасар С.Г., Лин Ю.Х., Мартин А., Дадгар Дж., МакМахон Т., Ван Д., Хандл Б., Алей К.О., Изенберг В., Маккартер Дж., Грин П.Г., Ходж К.В., Левин Д.Д., Мессинг РО: А. новый ноцицепторный сигнальный путь, обнаруженный у мышей с мутантной протеинкиназой С-эпсилон. Нейрон 1999, 24: 253–260. 10.1016 / S0896-6273 (00) 80837-5

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 33.

    Zhou Y, Li GD, Zhao ZQ: Зависимое от состояния фосфорилирование эпсилон-изофермента протеинкиназы C в ганглиях задних корешков взрослых крыс после воспаления и повреждения нервов. J Neurochem 2003, 85: 571–580.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 34.

    Андох Т., Нагасава Т., Кураиши Y: Экспрессия мРНК рецептора тахикинина NK1 в ганглиях задних корешков мыши. Brain Res Mol Brain Res 1996, 35: 329–332. 10.1016 / 0169-328X (95) 00244-M

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 35.

    Szucs P, Polgar E, Spigelman I, Porszasz R, Nagy I: Экспрессия рецептора нейрокинина-1 в нейронах ганглиев задних корешков молодых крыс. J Peripher Nerv Syst 1999, 4: 270–278.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 36.

    McCarson KE: Центральная и периферическая экспрессия нейрокинина-1 и рецептора нейрокинина-3 и матричных РНК, кодирующих вещество P: периферическая регуляция во время индуцированного формалином воспаления и отсутствия экспрессии рецептора нейрокинина в первичных афферентных сенсорных нейронах. Neuroscience 1999, 93: 361–370.10.1016 / S0306-4522 (99) 00102-5

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 37.

    Dong XW, Goregoaker S, Engler H, Zhou X, Mark L, Crona J, Terry R, ​​Hunter J, Priestley T: Малый интерферирующий РНК-опосредованный селективный нокдаун Na (V) 1.8, устойчивый к тетродотоксинам натриевой канал обращает вспять механическую аллодинию у невропатических крыс. Neuroscience 2007, 146: 812–821. 10.1016 / j.neuroscience.2007.01.054

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 38.

    Roza C, Laird JM, Souslova V, Wood JN, Cervero F: Тетродотоксин-резистентный Na + канал Nav1.8 необходим для выражения спонтанной активности в поврежденных сенсорных аксонах мышей. J. Physiol 2003, 550: 921–926. 10.1113 / jphysiol.2003.046110

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google Scholar

  • 39.

    Bulaj G, Zhang MM, Green BR, Fiedler B, Layer RT, Wei S, Nielsen JS, Low SJ, Klein BD, Wagstaff JD, Chicoine L, Harty TP, Terlau H, Yoshikami D, Olivera BM: Synthetic muO- конотоксин MrVIB блокирует устойчивый к ТТХ натриевый канал NaV1.8 и обладает длительным обезболивающим действием. Биохимия 2006, 45: 7404–7414. 10.1021 / bi060159 +

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 40.

    Ekberg J, Jayamanne A, Vaughan CW, Aslan S, Thomas L, Mold J, Drinkwater R, Baker MD, Abrahamsen B, Wood JN, Adams DJ, Christie MJ, Lewis RJ: мюО-конотоксин MrVIB выборочно блокирует Nav1.8 натриевых каналов, специфичных для сенсорных нейронов, и хроническое болевое поведение без двигательных нарушений. Proc Natl Acad Sci USA 2006, 103: 17030–17035. 10.1073 / pnas.0601819103

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google Scholar

  • 41.

    Natura G, von Banchet GS, Schaible HG: Пептид, связанный с геном кальцитонина, усиливает ТТХ-резистентные натриевые токи в культивируемых нейронах ганглиев дорзального корешка взрослых крыс. Боль 2005, 116: 194–204. 10.1016 / j.pain.2005.04.002

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 42.

    Cardenas LM, Cardenas CG, Scroggs RS: 5HT увеличивает возбудимость ноцицептороподобных нейронов ганглиев дорзального корешка крысы через цАМФ-связанные ТТХ-резистентные Na (+) каналы. J Нейрофизиол 2001, 86: 241–248.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 43.

    Kwong K, Lee LY: Простагландин E2 потенцирует резистентный к ТТХ натриевый ток в чувствительных к капсаицину вагусных легочных сенсорных нейронах крыс. J. Physiol 2005, 564: 437–450. 10.1113 / jphysiol.2004.078725

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google Scholar

  • 44.

    Гарсия М., Сакамото К., Сигекава М., Наканиши С., Ито S: Множественные механизмы высвобождения арахидоновой кислоты в клетках яичников китайского хомячка, трансфицированных кДНК рецептора вещества Р. Biochem Pharmacol 1994, 48: 1735-1741. 10.1016 / 0006-2952 (94)

    -6

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 45.

    Мицухаши М., Охаши Ю., Шичихо С., Кристиан С., Суддут-Клингер Дж., Харроу Г., Пайан Д.Г.: Множественные внутриклеточные пути передачи сигналов рецептора нейропептидного вещества Р. J Neurosci Res 1992, 32: 437–443. 10.1002 / младший 4315

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 46.

    Nakajima Y, Tsuchida K, Negishi M, Ito S, Nakanishi S: Прямое связывание трех рецепторов тахикинина со стимуляцией гидролиза фосфатидилинозитола и каскадов циклического АМФ в трансфицированных клетках яичников китайского хомячка. J Biol Chem 1992, 267: 2437–2442.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 47.

    Takeda Y, Blount P, Sachais BS, Hershey AD, Raddatz R, Krause JE: Кинетика связывания лиганда субстанции P и рецепторов нейрокинина A, стабильно экспрессируемых в клетках яичников китайского хомячка, и доказательства дифференциальной стимуляции инозитола 1 , 4,5-трифосфат и реакции вторичного мессенджера циклического АМФ. J Neurochem 1992, 59: 740–745. 10.1111 / j.1471-4159.1992.tb09430.x

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 48.

    Matsumoto S, Yoshida S, Ikeda M, Tanimoto T, Saiki C, Takeda M, Shima Y, Ohta H: Влияние 8-бром-цАМФ на тетродотоксин-резистентный натриевый ток (Nav 1.8) в нейроны узлового ганглия малого диаметра. Нейрофармакология 2007, 52: ​​ 904–924.10.1016 / j.neuropharm.2006.10.008

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 49.

    Thio CL, Sontheimer H: Дифференциальная модуляция ТТХ-чувствительных и ТТХ-устойчивых Na + каналов в астроцитах спинного мозга после активации протеинкиназы C. J Neurosci 1993, 13: 4889–4897 .

    CAS PubMed Google Scholar

  • 50.

    Black JA, Liu S, Tanaka M, Cummins TR, Waxman SG: Изменения в экспрессии тетродотоксин-чувствительных натриевых каналов в нейронах ганглиев задних корешков при воспалительной боли. Боль 2004, 108: 237–247. 10.1016 / j.pain.2003.12.035

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 51.

    Gould HJ 3rd, England JD, Soignier RD, Nolan P, Minor LD, Liu ZP, Levinson SR, Paul D: Ибупрофен блокирует изменения в Na v 1.7 и 1.8 натриевые каналы связаны с полным воспалением, вызванным адъювантом Фрейнда, у крыс. J Pain 2004, 5: 270–280. 10.1016 / j.jpain.2004.04.005

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 52.

    Танака М., Камминз Т.Р., Исикава К., Диб-Хадж С.Д., Блэк Дж. А., Ваксман С.Г.: Повышение экспрессии Na + канала SNS в нейронах ганглиев дорсального корешка в модели воспалительной боли каррагинана. Neuroreport 1998, 9: 967–972.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 53.

    Villarreal CF, Sachs D, Cunha FQ, Parada CA, Ferreira SH: Роль натриевого канала Na (V) 1.8 в поддержании хронической воспалительной гиперноцицепции. Neurosci Lett 2005, 386: 72–77. 10.1016 / j.neulet.2005.04.060

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • Служба поддержки клиентов компании Ttx — TTXСвяжитесь с нами

    Ищете службу поддержки ttx компании? Вот самая важная информация, связанная с обслуживанием клиентов компании ttx, включая номера телефонов, адреса, местонахождение и многое другое.

    TTX Свяжитесь с нами — TTX

      https://www.ttx.com/contact-us/
      Свяжитесь с нами. Компания ТТХ. 101 Н. Ваккер Драйв. Чикаго, Иллинойс 60606. Общие запросы. 312-853-3223. Служба поддержки M&E. 1-800-TTX-HELP. ИТ-служба поддержки.

    Служба поддержки клиентов | TTXINC

      https://www.ttxinc.com/customerservice
      СЕРВИС. (920) 743-6568. [адрес электронной почты защищен] Карьера. Новости и события. Контакт. TTX Окружающая среда. TTX Мексика. HTF.

    TTX — RAILCAR POOLING EXPERTS — TTX Company

      С 1955 года TTX является уникальным и творческим поставщиком железнодорожной отрасли.По всем Соединенным Штатам, Канаде и Мексике фирменные желтые вагоны TTX Company движутся по железным дорогам Северной Америки, перевозя товары и сырье, на которые полагаются потребители и компании.

    TTx — Отзывы клиентов

      TTx, поставщик систем телефонной связи для бизнеса Mitel VoIP в Огайо, предлагает услуги унифицированных коммуникаций (UCaaS), размещенную АТС и настраиваемые облачные / управляемые услуги.

    TTX Услуги — TTX

      https: // www.ttx.com/main maintenance-services/our-services/services/
      TTX выполняет плановое техническое обслуживание в зависимости от пробега, чтобы предоставить клиентам самое безопасное и надежное оборудование. Плановое обслуживание может включать осмотр, обновления и / или профилактическое обслуживание. TTX помогает вашему автопарку опережать дорогостоящие и опасные отказы оборудования. Модификации вагонов. Транспортировка автомобильных рам

    Работа в качестве представителя службы поддержки клиентов в TTX …

      https: // www.действительно.com/cmp/Ttx-3/reviews?fjobtitle=Customer+Service+Representative
      TTX — замечательное место. Это небольшое давление и хорошая оплата. Водитель / представитель службы поддержки клиентов (текущий сотрудник) — Чаттануга, Теннесси — 6 февраля 2014 г. Это прекрасное место для работы. Это среда с низким давлением, если вы можете работать без присмотра и самостоятельно управлять.

    TTXBPN — TTX

      Если у вас возникнут какие-либо технические проблемы при использовании систем TTX, обратитесь в службу поддержки TTX по телефону 312-984-3709.

    Нгуен Дьё Хай — Менеджер фронт-офиса — Vinpearl Resort …

      https://vn.linkedin.com/in/nguyen-dieu-hai-7820ba75
      Просмотрите профиль Нгуен Дьё Хай в LinkedIn, крупнейшем в мире профессиональном сообществе. В профиле Nguyen Dieu указано 6 вакансий. Просмотрите полный профиль в LinkedIn и узнайте о связях Нгуен Дьё и его работе в аналогичных компаниях.

    Хай Буй — инспектор по качеству; Помощник по продажам — Кханьхоа …

      https: // vn.linkedin.com/in/hai-bui-7578711a6
      Просмотрите профиль Хай Буй в LinkedIn, крупнейшем в мире профессиональном сообществе. В профиле Hai указана 1 вакансия. Просмотрите полный профиль в LinkedIn и узнайте о связях Хай и…

    TTXНаши услуги — TTX

      https://www.ttx.com/main maintenance-services/our-services/
      TTX не только поставляет железнодорожные вагоны на железные дороги Северной Америки. TTX специализируется на полном цикле ремонта и технического обслуживания грузовых вагонов.Наши мобильные ремонтные бригады, полевые работы по техническому обслуживанию, ремонтные мастерские с полным спектром услуг и услуги по ремонту компонентов обеспечивают эффективное решение потребностей вашего автопарка. TTX — это безопасное и надежное решение для обслуживания вагонов …

    Служба поддержки клиентов | Therma-Tron-X, Inc.

      https://www.ttxinc.com/service?lightbox=dataItem-j5zfxlvg1
      Служба поддержки клиентов TTX является поставщиком полного спектра услуг, что означает, что мы берем на себя ответственность за все механические, электрические, структурные и контрольные аспекты наших промышленных систем окраски. .Приобретая систему TTX, вы получаете полную техническую поддержку, оценку, тестирование, проектирование, изготовление, установку, запуск и обслуживание на месте при постоянной поддержке нашей собственной группы обслуживания.

    Автоматизированные системы отделки | Therma-Tron-X, Inc.

      Я не могу поблагодарить [TTX] и ваших сотрудников за все, что вы поддерживаете. Его действия прошли мимо хорошего обслуживания клиентов. … Служба TTX. Для запросов на обслуживание или вопросов, пожалуйста, заполните следующую форму или позвоните по телефону (920) 743-6568…. Политика добросовестности компании.

    Техническая служба | Therma-Tron-X, Inc.

      https://www.ttxinc.com/technical-service
      Перед тем, как ваша система будет запущена и запущена, вам будет представлена ​​группа обслуживания клиентов TTX. Служба поддержки клиентов будет работать с вами, чтобы составить список запасных частей и снабдить ваши полки любыми запчастями, которые вы должны иметь под рукой. Команда обслуживания клиентов TTX также доступна по телефону или через безопасное соединение VPN. TTX MAPP — отличный инструмент, доступный вам при покупке новой системы.

    Кто мы — TTX

      https://ejjc.fa.us6.oraclecloud.com/hcmUI/CandidateExperience/en/sites/CX/pages/1565562109410
      В сотрудничестве с нашими собственниками железных дорог TTX предоставляет эффективные и качественные услуги по техническому обслуживанию для обеих компаний. собственный и другой интермодальный, автомобильный парк и парк вагонов общего назначения. Миссия Каждый день мы сотрудничаем с железными дорогами Северной Америки для поддержки их бизнеса, предоставляя эффективный парк железнодорожных вагонов там, где есть грузы…

    Работает в TTX: 134 отзыва | Indeed.com

      https://www.indeed.com/cmp/Ttx-3/reviews
      Сотрудник отдела продаж / обслуживания клиентов (бывший сотрудник) — Маунт-Киско, штат Нью-Йорк, 20 января 2021 г. Когда я присоединился к отделу продаж в местном TTX -Ко., Я был в плохой форме … Я получил легкое сотрясение мозга на моей последней должности, у меня были ссуды для выплаты, задолженность за CC и т. Д.

    Унифицированные коммуникации: VoIP, UCaaS, Hosted Phone … — TTx

      https: //www.ttx-inc.com / about-us /
      Как ведущий партнер и поставщик ИТ-услуг, TTx может помочь вам и вашей компании в разработке и поддержке систем ИТ-инфраструктуры, чтобы оказать положительное влияние на ваш бизнес сегодня и в будущем. Поскольку мы считаем, что люди имеют значение, мы также считаем: обслуживание клиентов имеет значение // Обслуживание клиентов — это внешнее проявление нашей внутренней культуры.

    Ttx Компания Профиль компании | Денвер, Колорадо | Конкуренты …

      https: // www.dnb.com/business-directory/company-profiles.ttx_company.66c3be62a0428c18861ecdf696776abc.html
      Компания Ttx находится в Денвере, Колорадо, США и является частью вспомогательной деятельности для отрасли железнодорожного транспорта. В компании Ttx работает 10 сотрудников. В корпоративной семье Ttx Company 42 компании.

    TTX Co — Профиль компании и новости — Bloomberg Markets

      https://www.bloomberg.com/profile/company/2700A:US
      TTX Company работает как объединение вагонов.Компания предлагает парк вагонов интермодального, автовозного и общего назначения. Основными клиентами TTX являются железные дороги в США …

    30+ профилей «Christian Baxter» | LinkedIn

      https://www.linkedin.com/pub/dir/christian/baxter
      Компания TTX Представитель службы поддержки клиентов Кристиана Бакстера в Addecco Staffing Greater Savannah Area. Addecco Staffing Christian Baxter Telecommunications Professional …

    Только для использования TTX — казначей и сборщик налогов

      https: // sftreasurer.org / sites / default / files / 2019-07 / BT_PK% 20Monthly% 20Paper% 20Filing_07.01.19.pdf
      Только для использования TTX: www.sftreasurer.org Служба поддержки клиентов — 311 в Сан-Франциско … Банк / Страховая компания Оплачивается только местами, принадлежащими компании, находящимися в собственности города, где доход перечисляется городским агентством. Другое … Служба поддержки клиентов — 311 в Сан-Франциско или (415) 701-2311.

    TTX — oracle.com

      https://www.oracle.com/customers/ttx-oracle-cloud/
      TTX — это частная компания, принадлежащая ведущим железным дорогам Северной Америки, многие из которых являются публичными, поэтому компания не фокусируется на максимизации прибыли. , а скорее экономия денег для отрасли в целом.Бэк-офис TTX работал на локальной системе SAP ERP, пользовательском коде и программном обеспечении в качестве услуги для ряда различных функций.

    200+ профилей «Joe Velasquez» | LinkedIn

      https://ca.linkedin.com/pub/dir/Joe/Velasquez
      Кармен в TTX Company Leipsic, OH. Компания TTX Джо Веласкес Лайнес Перу. Джо Л. Веласкес-старший … Менеджер по работе с клиентами в компании International Water Partners, Метро Манила. Международные водные партнеры, еще +1 университет Филиппин, еще +1 Джо Альфаро Веласкес…

    Роджер О’Тул — генеральный директор по продажам и бизнесу …

      https://ca.linkedin.com/in/roger-o-toole-49462733
      Мы рады быть названы компанией TTX «Отличным поставщиком» 2020 года в категории поставщиков компонентов за наши обязательства. заказчику… По вкусу Роджер О’Тул Samuel Roll Form Group предлагает широкий ассортимент холодногнутых и горячекатаных шпунтовых свай, которые удовлетворят потребности…..
        https://www.rjcorman.com/newsroom/project-reviews/rj-corman-switching-mechanical-crew-turns-field-repair-full-service
        Компания TTX, крупный поставщик железнодорожных вагонов в Северной Америке, требовалась квалифицированная механическая бригада с логистическими возможностями и оперативной эффективностью для ремонта и восстановления трафаретов 500 железнодорожных вагонов. TTX обратилась к R. J. Corman Railroad Switching с этим запросом, и R. J. Corman Charlestown, IN Mechanical Crew была готова удовлетворить потребности клиента.Когда проект был в стадии реализации, и…

      Карьера | Therma-Tron-X, Inc.

        https://www.ttxinc.com/careers
        TTX, производитель промышленных лакокрасочных систем, всегда заинтересован в высококачественных, преданных делу лицах, заинтересованных в нашей компании и отраслях, которые мы обслуживаем. СЕРВИС (920) 743-6568

      30+ профилей «Мэрилин Хесс» | LinkedIn

        https://www.linkedin.com/pub/dir/maryn/hess
        TTX Company Представитель службы поддержки Мэрилин Хесс в All Ins Alberta, Канада.All Ins Мэрилин Хесс — Алтуна, Пенсильвания. Марс Мэрилин Хесс вышла на пенсию из волонтерской компании в Лос-Анджелесе / Калвер-сити …

      Крупнейший в Северной Америке провайдер вагонов заменяет SAP на …

        https://www.oracle.com/news/announcement/ttx-replaces-sap-with-oracle-fusion-cloud-applications-suite-2021-07-13/
        TTX Компания перемещает финансы, цепочку поставок и HR в Oracle Cloud, чтобы повысить эффективность и быстро реагировать на меняющиеся потребности клиентов. Остин, Техас — 13 июля 2021 г.TTX Company, объединяющая железнодорожные вагоны, которая управляет более чем 165 000 вагонов в Северной Америке, заменила SAP на Oracle Fusion Cloud Applications Suite для поддержки …

      Unified Communications (UCaaS) & Managed … — TTx Ohio

        https://www.ttx-inc.com/contact-us/
        Или вы можете напрямую связаться с офисами TTx: чтобы лучше обслуживать потребности предприятий в Огайо в области унифицированных коммуникаций (UCaaS), TTx имеет филиалы в Кливленде и Толедо, обслуживающие территории в Кливленде, Акроне, Янгстауне, Кантоне, Уоррене, Колумбусе, Дейтоне, Толедо и его окрестностях, а также в некоторых…

      Энди Гонта — Управляющий директор — AJG Ventures | LinkedIn

        https: // ca.linkedin.com/in/andy-gonta-a

        32

        Представитель службы поддержки клиентов — руководитель группы Traffic Tech Deux-Montagnes, QC. Джон Хиллард ушел на пенсию в TTX Company Livingston, MT. Майя Пыкина, консультант по прогнозированию и стратегическому планированию в TTX Company Innsbruck. Скотт Монро, вице-президент по новым…

      Торговец Стив — Оценщик — Арматурный стержень для проверки целостности (IRB …

        https://www.linkedin.com/in/trader-steve-47008561
        Полевые работы по техническому обслуживанию в TTX Company Дауни, Калифорния.Тидра Томпсон, сотрудник службы поддержки клиентов, Большой Олбани, штат Джорджия. danex herrera, механик в компании TTX …

      Ричард Осей-Бонсу — Операционный руководитель — TJX Canada …

        https://ca.linkedin.com/in/richard-osei-bonsu-28
        Просмотрите профиль Ричарда Осей-Бонсу в LinkedIn, крупнейшем в мире профессиональном сообществе. В профиле Ричарда указана 1 вакансия. Просмотрите полный профиль в LinkedIn и узнайте о связях Ричарда и работе в аналогичных компаниях.

      Три основных фактора при выборе телефонной системы для моего бизнеса — TTx

        https://www.ttx-inc.com/maven/
        TTx рассмотрит и обработает ваши результаты. У нас есть команда преданных своему делу представителей по обслуживанию клиентов, которые могут дать рекомендации на основе вашего выбора, но это будет полезно только в том случае, если мы сможем вам их показать! Предоставьте нам основную информацию, и мы организуем бесплатную консультационную встречу, чтобы обсудить с вами наше рекомендованное решение.

      Franco Imbrogno — Калгари, Альберта, Канада | Профессиональный…

        https://ca.linkedin.com/in/franco-imbrogno-1315aa87
        июнь 1972 г. — июнь 2010 г. 38 лет 1 мес. Калгари. Оценил отчеты о повреждениях вагонов и принял решение об утилизации или ремонте поврежденных грузовых вагонов на общую сумму 20 миллионов долларов в год, соблюдая протокол и процедуры Компании для обеспечения экономической эффективности. Управлял финансовыми решениями в отношении поврежденных грузовых вагонов, включая собственные, арендованные и иномарки.

      Работа в TTX: 64 отзыва о заработной плате и льготах | Верно.com

        https://www.indeed.com/cmp/Ttx-3/reviews?ftopic=paybenefits
        В некотором смысле все может быть лучше. В то время как выход на пенсию железной дороги, план 401k и медицинское страхование очень хороши, неравная оплата и списки уровней не очень хороши. Максимальная заработная плата 1-го уровня составляет около 29-30 долларов в час, 2-го уровня (на данный момент я) — около 24-25 долларов в час. Рабочая среда может варьироваться от места к месту.

      Трейси Дрейк — Аналитик — Медицинская экономика — CIGNA | LinkedIn

        https: // www.linkedin.com/in/tracy-drake-77bb775
        Старший аналитик службы поддержки клиентов TTX Company Addison, IL. Показать больше профилей Показать меньше профилей Другие по имени Трейси Дрейк. Трейси Дрейк. Трейси Дрейк — Большой Чикаго …

      80+ профилей «Gezime» | LinkedIn

        https://it.linkedin.com/pub/dir/Gezime/+
        Старший бухгалтер по счетам к оплате в TTX Company Chicago. Компания TTX Университет ДеПола … Продажи / обслуживание клиентов Medix Gezime Selmani в Accel International Waterbury, CT.Accel International, +4 altri Общественный колледж долины Наугатук Гезиме Морина Медицинский приемник в…

      Шерил Драхос — руководитель службы поддержки клиентов — General Electric …

        https://www.linkedin.com/in/cheryl-drahos-404a4424
        Руководитель службы поддержки клиентов General Electric Railcar Services, район Большого Чикаго, 10 стыковок. Присоединяйтесь, чтобы подключить General Electric Railcar Services. Пожаловаться на этот профиль …

      Работа инженера по поддержке систем в Кливленде, Огайо, TTx

        https: // www.ziprecruiter.com/c/TTx/Job/Systems-Support-Engineer/-in-Cleveland,OH?jid=c0cfeb40066a6eaa
        TTx ориентирован на предоставление клиентам лучших в своем классе информационных технологий и целенаправленного обслуживания клиентов в нашем убеждении, что «люди имеют значение», и поддержке репутации наших клиентов с помощью помощи, опыта и долгосрочной стратегии. Мы стремимся стать самым надежным поставщиком решений в области информационных технологий на нашем рынке.

      Ttx Company, Chambersburg PA — Профиль компании | BizStanding

        https: // bizstanding.com / p / ttx + company-18259389
        На пенсии. С ноября 2001 г. Менеджер — закупки и материалы, сентябрь 1965 — ноябрь 2001. Менеджер компании TTX — закупки и материалы, сентябрь 1965 — ноябрь 2001. Брайан Пауэрс. Вице-президент по кадрам и трудовым отношениям с апреля 2008 года. Управляющий / директор / AVP — производственные отношения с августа 1998 года по март 2008 года. Член Совета директоров Центра заботливых компаний с 2011 по 2013 год. Кэрол Бойлан.

      Джош Эрнандес — Данные представителя службы поддержки клиентов …

        https: // тел.linkedin.com/in/josh-hernandez-5248b1138
        Сохраните профиль Джоша Эрнандеса в LinkedIn, чтобы узнать больше о предложениях по всему миру. Джош имеет 1 опыт работы в своем собственном профиле. Создайте полный профиль на LinkedIn и получите доступ к настройкам и работе с компьютерами.

      Стеффани Фуэнтес — руководитель логистики — TMC, подразделение …

        https://mx.linkedin.com/in/steffanyfuentes
        окт.de 2017 — сен. de 20203 anños. Район Монтеррей, Мексика. Руководить и поддерживать операционную группу для решения логистических проблем и улучшения операций при оптимизации затрат и поддержании ключевых показателей эффективности. Для оценки и удовлетворения потребностей клиентов, налаживания и развития продуктивных отношений, обеспечения отличного обслуживания клиентов.

      Работа регионального руководителя по обучению в Северной Огасте, Южная Каролина в …

        https://www.ziprecruiter.com/c/TTX-Company/Job/Regional-Training-Supervisor/-in-North-Augusta,SC?jid=ca78eb0c83f43731
        Региональный руководитель обучения.Разрабатывать, администрировать, координировать и проводить технические / механические практические занятия, обучение в классе, виртуальной / дополненной реальности и онлайн-обучение, чтобы помочь учащимся в приобретении знаний, навыков и компетенций эффективным и качественным образом. Ответственный и подотчетный за разработку и ведение контактов …

      Рошан Рафла — специалист по продажам облачных вычислений Azure — Microsoft …

        https://eg.linkedin.com/in/roshan-rafla-39b99a16a
        * Обеспечьте выигрыш новых клиентов для Microsoft Cloud: Максимально используйте возможности дополнительных и перекрестных продаж, сотрудничая с ресурсами партнеров, чтобы представить ценностные предложения Microsoft Cloud которые соответствуют бизнес-целям заказчика и ИТ-инициативам.* Стремитесь изучать бизнес клиента и свой профессиональный рост.

      TTX Company Corporate … __TTX — Деловой справочник Иллинойса.

        https://bizstanding.com/directory/IL/TT/17/
        TTX COMPANY TTX Co. Причина бездействия: Поправка об изменении имени. Регистрация: 8 сентября 1995 г. Неактивна с: 13 июня 1991 г. Сайт: ttx.com, ttxcompany.com. Телефон: (312) 853-3223, (312) 984-3790 (факс), (312) 984-2681, (312) 984-3763, (312) 984-3707, (312) 606-3885.Описание: Мы TTX, компания, которая поставляет вагоны и связанные с ними грузовые вагоны …

      Старший инженер по надежности Работа в Чикаго, штат Иллинойс, в компании TTX

        https://www.ziprecruiter.com/c/TTX-Company/Job/Senior-Reliability-Engineer/-in-Chicago,IL?jid=fe2cc9bf870bda29
        Старший инженер по надежности будет использовать инструменты аналитики для разработки показателей , отчеты и информационные панели для руководства TTX, а также наших владельцев железных дорог. — Обеспечение поддержки специальных запросов на отчеты бизнес-аналитики путем определения требований к информации, предоставления…

      Натан Абрахам — Владелец трансформации услуг — IPO UK…

        https://uk.linkedin.com/in/nathan-abraham-98974829
        Руководитель практики по товарным знакам и образцам. IPO в Великобритании. Янв.2010 — март 2018 8 лет 3 мес.

      Клиентский опыт Oracle | LinkedIn

        https://ie.linkedin.com/showcase/oracle-cx
        Обслуживание клиентов Oracle | 13 604 подписчика в LinkedIn. Oracle CX Cloud помогает брендам строить, управлять и поддерживать отношения с клиентами — от привлечения клиентов до удержания.| Опыт взаимодействия клиента с вашим брендом стал не менее (а может быть, даже больше), чем продукты и услуги, которые вы предоставляете. Клиенты более требовательны, чем когда-либо, и ожидают: -точно рассчитанного и …

      Джек Нит — Управляющий по работе с клиентами — Salesforce | LinkedIn

        https://uk.linkedin.com/in/jack-neath-04255649
        Менеджер аккаунта. NorthgateArinso. Ноябрь 2011 — июль 2014 2 года 9 месяцев. Управление клиентской базой, насчитывающей около 80 предприятий как в государственном, так и в частном секторе в различных отраслях, таких как бизнес-услуги для производства.Демонстрирует способность сохранить клиентскую базу, а также эффективно увеличить доход за счет миграции продукта и …

      Габриэла БАНИКА — старший менеджер по работе с клиентами HCM в странах Европы, Ближнего Востока и Африки …

        https://ro.linkedin.com/in/gabriela-banica-a35860
        Старший менеджер по работе с клиентами HCM, охватывающий регион ECEMEA. Программа Oracle Customer Success предназначена для налаживания прочных отношений, в которых делятся знаниями, опытом и энтузиазмом. Моя цель — дать возможность нашим клиентам упростить и дать им возможность получить максимальную отдачу от своих инвестиций в облако.- Предоставление учета жизненного цикла …


      Как вы собираете данные для обслуживания клиентов компании Ttx?

      Мы уделяем приоритетное внимание поиску официальных и надежных источников по всем компаниям в нашей базе данных. Кроме того, для каждой компании может быть указана дополнительная информация, такая как: адреса электронной почты, официальный сайт, отзывы, номера телефонов и дополнительные источники информации.

      Действительно ли информация о службе поддержки компании Ttx точна?

      Мы собираем данные со сторонних веб-сайтов, официальных веб-сайтов и других общедоступных источников.Собранные данные тщательно проверяются нашими специалистами перед добавлением в базу данных. Однако мы не можем дать никаких гарантий на стопроцентную достоверность данных, так как каждый день в компаниях происходят разного рода изменения.

      Могу ли я вносить изменения в данные службы поддержки компании Ttx, если я являюсь владельцем компании?

      Конечно можно. Если у вас есть более надежная или актуальная информация об обслуживании клиентов компании ttx, вы можете предоставить ее нам, и после проверки мы обязательно обновим информацию об этой компании.

      Вам также могут понравиться: корпоративный офис безумного сборщика, корпоративный офис, поставляемый строителями, обслуживание клиентов по ремоделированию покраски tfl, корпоративный офис trinity paving sealcoating inc Ocean County, корпоративный офис hartford dental group sc, терапевтический массаж от корпоративного офиса Мэри Элизабет, суббота корпоративный офис послеобеденного клуба, обслуживание клиентов тюнингового завода, центр обслуживания клиентов в долине хантингдон, вход в систему

      Вычислительное исследование — Университет Тохоку

      @article {b0a228c481194f04ad017dc06f5f9fc7,

      title = «Молекулярные структуры двух аналогов тетродотоксина, содержащих моноокса-углеводородную клетку: вычислительное исследование с использованием молекулярных расчетов»,

      структуры двух аналогов тетродотоксина (ТТХ), недавно выделенных из японского токсичного тритона Cynops ensicauda popei.Эти новые аналоги характеризуются моноокса-углеводородным каркасом с прямой связью C5-C10, который заменяет один из эфирных мостиков в каноническом диоксаадамантановом каркасе TTX. Расчетное изменение химических сдвигов ЯМР 13С хорошо согласуется с изменением соответствующих экспериментальных значений, которое является результатом указанной выше химической модификации. Это подтверждает химическую структуру, присвоенную аналогам ТТХ. Топологический анализ теоретической плотности электронного заряда показывает, что удаление кислородного мостика в TTX увеличивает величину плотности заряда в критической точке клетки.Поиск в базе данных показывает, что моноокса-углеводородный каркас также присутствует в других природных продуктах, таких как циннзейланин и платенсимицин, молекулярные структуры которых были охарактеризованы рентгеноструктурным анализом на монокристаллах. «,

      ключевые слова =» CSD, DFT, ЯМР » спектроскопия, QTAIM, Tetrodotoxin «,

      author =» Fabio Pichierri «,

      note =» Финансовая информация: Я благодарю Департамент прикладной химии Высшей школы инженерии (Университет Тохоку) за финансовую поддержку.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *