Фальш пороги на ваз 2110: Доступ с вашего IP-адреса временно ограничен — Авито

Отзывы о товаре

Где применяется

Обзоры

Цены и наличие товара во всех магазинах и складах обновляются 1 раз в час. При достаточном количестве товара в нужном вам магазине вы можете купить его без предзаказа.

Цена в магазинах — розничная цена товара в торговых залах магазинов без предварительного заказа.

Срок перемещения товара с удаленного склада на склад интернет-магазина.

Представленные данные о запчастях на этой странице несут исключительно информационный характер.

3ac65d4f3769e7f595de53a06141731a

Добавление в корзину

Доступно для заказа:

Кратность для заказа:

Отменить

!

В вашей корзине на сумму

Закрыть

Накладки на пороги ваз 2110: как заменить своими руками

ВАЗ 2110 накладки на пороги

Для автомобиля ВАЗ 2110 наладки служат не только для улучшения эстетичного вида авто, но имеют практическую ценность при поездке по бездорожью и в каждодневном использовании.
Накладки на пороги на ВАЗ 2110 имеют практическую пользу, которую можно определить некоторыми фактами:

• Основной из них – надежность защиты порогов от коррозии металла. Особенно это заметно, зимой и осенью, когда грязь и слякоть на дорогах.
• Защита порожек внутри кузова, предохранение автомобиля от случайных механических повреждений, возникающих при посадке и высадке пассажиров. Это могут быть глубокие царапины, вызываемые даже несколькими песчинками на подошве.
• Нижняя часть арки крыла хорошо защищается порогами с «сапогами».

Характеристика накладок на пороги для ВАЗ 2110

Обычно для изготовления накладок используется пластик толщиной 2 миллиметра, черного цвета:

• Для ВАЗ 2110 накладки дверей и порогов производители освоили делать из стеклопластика.
• Более дорогая для ВАЗ 2110 накладка на пороги изготавливается из алюминия или листа нержавеющей стали.
• Автолюбители часто поверх металлических порогов размещают накладки на пороги из пластмассы с сеткой.
• Пороги хорошо амортизируются, долгое время сохраняют свой внешний вид.
• Хотя они кажутся хрупкими, но способны выдержать приличный удар о препятствие, что указывает не только на предохранение авто от царапин, но и защищают от серьезной поломки.
• Цена ремонта, даже от сильного удара, когда сама накладка сломалась, будет не дорогой. В этом случае достаточно выровнять изогнутую часть порога и приобрести новую накладку.

Замена накладок для порогов на авто ВАЗ 2110

Пороги на ВАЗ, которому более десяти лет, требуют частой замены, они практически первыми выходят из строя. Предлагаемая инструкция позволит узнать, как правильно снимается и устанавливается на ВАЗ 2110 накладка порога.
Эти полезные советы помогут выполнить все операции своими руками:

• Сначала проверяется состояние дверных петель. В случае провисания двери или ее болтанки нужно выполнить ремонт петель, а затем начинать замену накладок порога.
  При большом износе в петле становится неравномерным зазор между порогом и нижней частью дверей, что может привести к ее задеванию за накладку.

Снимается обтекатель переднего крыла.

• Для этого снимается соответствующее колесо.
• Два болта выкручиваются ключом TORX T30, а отверткой один винт, фиксирующий грязезащитный щиток двигателя.
• Щиток удаляется.
• Выкручивается ключом на «7» винт, удерживающий к порогу обтекатель переднего крыла.
• Этим же ключом откручиваются винты, фиксирующие к крылу и подкрылку обтекатель переднего крыла, а на «10» отворачиваются гайки крепления его к кузову.
• Обтекатель снимается.
• Отворачивается ключом на «10» гайка, а отверткой винт на подкрылке.
• Подкрылок снимается.
• Выкручиваются винты, фиксирующие к бамперу защитный кожух крыла.
• Кожух освобождается от крепления к кронштейну и бамперу.
• Защитный кожух снимается.
• Снизу снимается скоба, удерживающая декоративную накладку.

Снятие скобы, удерживающей накладку

• Выворачиваются винты крепления, в проемах передней и задней дверей, накладки.
• Деталь снимается, как показано на фото.

Снятие накладки на порог ВАЗ 2110

Установка новых накладок для порогов

На кузов ВАЗ 2110 установка накладок на пороги осуществляется на отверстия, которые специально делают на заводе для этих элементов.

Совет: Прежде чем установить накладку на порог ее нужно обработать мовилем.

 Итак:

• Накладка прикладывается к порогу.
• Устанавливаются и закручиваются три винта, фиксирующие деталь в проеме двери.
• Закручиваются винты заднего и переднего креплений.
• Устанавливается скоба для удержания декоративной накладки.
• Далее сборка осуществляется обратно разборке элементов.

Совет: При установке необходимо следить, чтобы не было щелей, куда может попадать грязь. При попадании ее в порог нужно снимать порог и проводить профилактику.
Весь кузов, для предохранения от ржавчины лучше обработать антикором.

Таким образом выполняется на ВАЗ 2110 установка накладок порогов, сам процесс хорошо показан на видео.

• Для этого используется полуавтоматическая сварка в углекислой среде, через предварительно выполненные отверстия диаметром от пяти до шести миллиметров.
• После сварки зачищаются сварные точки. Поверхность шпаклюется, грунтуется и красится.

Правильно установленные накладки на пороги увеличат срок эксплуатации корпуса автомобиля ВАЗ 2110.

Заводские накладки на пороги ваз 2110

Добрый вечер ребята.
Копался вчера на drive2 и нашел интересную темку про установку приоровских порогов на ваз 2110-2112. Так как у меня не стояло не каких порогов и вся грязь летела на двери и на пороги все это приходилось каждый раз намывать… Как я понял заводской порог закрывает полностью порог и качество порога оставляет желать лучшего… По поводу приоровского порога, то тут можно сказать только положительное. Приятный пластик, уплотнители на порогов, крепится легко так же и стоит жестко и все за подлецо! В общем мне очень понравился. Точную цену заводского не знаю, мне кажется меньше 500р приоровский мне вышел 1200.

По установки: Дрель, сверло, 6шт саморезов на одну сторону, желательно еще баночку мастики или мавиля, ( а лучше того и другого вперемешку ) что бы под вашими пластмассами порогами не гнили железные пороги. Затем ослабляем задний подкрылок в самом начале что бы подпихнуть под него порог. Подгоняем это все как вам нравится) высверливаем сверху порога отверстие под саморезы и вкручиваем саморезы в те места. Я ток саморезы сделал с верху! Так же их можно и в крутить и с низу и сверху! или можно купить специальные защелки для нижний части порога, но они и стоят не мало!
Думаю я в этой теме конечно Америку не открыл! Так как это тема заеженная что на drive2 что и на всяких других сайтах! просто рассказал как лично я установил эти данные пороги на свое авто.
Еще прикупил передние приоровские брызговики, но поставить не успел. Думаю в ближайшие дни поставлю их.
Так что ребята всем советую классные пороги!
Всем удачи! Если у вас есть вопросы задавайте.

Артикул: 21104-8415122/23-12 , артикулы доп.: 2110-5109076

Код для заказа: 113835

• Возможно, вам понадобятся
• показать еще

• Легковые автомобили / ВАЗ / ВАЗ-21101 чертеж

• » href=»/catalog/vaz-3/legkovye_avtomobili-30/vaz_2110-10/kovriki-6/#part38502″>Облицовка передняя праваяПол кузова / Коврики

Для этого товара еще нет обзоров.

Накладки на пороги ВАЗ 2110, 2111, 2112

Порог ВАЗ 2110 правый-левый пластик

Подкрылки автомобильные Пластиковые без борта ВАЗ/LADA.

ВИК Порог ВАЗ 2110-2112 правый

Накладка порога декоративная ВАЗ 2110 А.Б. с комплект

Накладки на пороги Лада Ваз 2109, 2110, 2112, 2111

Пластиковые накладки на пороги для Lada Vesta SW с 2018.

Накладки на пороги ВАЗ 2110, 2111, 2112

Autofamily Пластиковые с бортом ВАЗ/LADA 2110 1995-2007.

Накладки на пороги Лада Ваз 2109, 2110, 2112, 2111

Накладки порогов (4 шт) 2110-2112

Порог пластиковый декоративный правый asx mb121013r

Autofamily Пластиковые с бортом ВАЗ/LADA 2110 1995-2007.

Накладки внутренних порогов «DolleX», для ВАЗ.

Порог ВАЗ 2110 правый

Пороги пластиковые комплект левый+правый lancer x лансе.

Накладки внутренних порогов ВАЗ-2180 LADA Vesta (нерж.

Порог Пластиковый Декоративный Левый Asx

Порог ВАЗ 2110 левый

Накладка на порог багажника для Лада Х Рей ( Lada X-Ray.

Порог пластиковый декоративный левый asx mb121013l

Накладка порога декоративная GT ВАЗ 2110 комплект

Порог ВАЗ 2110 левый

Накладки на внутренние пороги для Лада Х Рей ( Lada X-R.

Пороги | KIA SPORTAGE 4 2016-2019 | Original Style – вз.

Накладки порогов (4 шт) 2107

Крыло ВАЗ 2110 заднее левое (катафорез) LADA 21100-8404.

Порог ВАЗ 2110 правый

Souz-96 Накладка на наруж. порог багажника без логотипа.

Накладки на пороги Лада Ваз 2109, 2110, 2112, 2111

ВАЗ Защита порогов LADA Largus (d 51 мм) с алюм.площадк.

Накладки внутренних порогов ВАЗ-2121 ‘NIVA’ (нерж. стал.

Пороги | KIA SPORTAGE 4 2016-2019 | Original Style с ло.

Souz-96 Накладка на внутренние пороги без логотипа (ком.

Пороги съемные РИФ ВАЗ Нива, комплект

Усилитель порога ВАЗ-2110/2170 левый (белый) Lada

Накладки внутренних порогов «DolleX», для ВАЗ.

Накладки на внутренние пороги с логотипом вместо пласти.

Souz-96 Накладка на внутренние пороги с логотипом nl (к.

Пластиковые накладки на пороги для Lada Vesta SW с 2018.

Облицовка порога ВАЗ-2110 передние+задние 4 шт. к-т

Накладки на пороги алюминиевые лада калина (полимер чер.

Пороги Внутрисалонные 2110-12 Пластик Сызрань

Пороги Наружные 2110-12 Оао Пластик

Накладки на пороги алюминиевые лада калина (Анод серый.

Накладка порога декоративная ВАЗ 2110 А.Б.С комплект

Накладки на пороги «Rival», для Lada Priora 2.

Накладка порога декоративная GT ВАЗ 2110 комплект

Усилитель порога ВАЗ-2110/2170 правый (белый) Lada

Накладки внутренних порогов ВАЗ-2170, 21104, 21124 ‘PRI.

Порог-площадка «BMW-Styl» для 3х дверной Лада.

Накладки на порожек багажника для Лада Х Рей ( Lada X-R.

Накладка Порога Декоративная Gt Ваз 2110 Комплект

Пороги силовые ВАЗ-2131 Нива

Накладка Порога Декоративная Ваз 2110 А.б. С Комплект

Порог ВАЗ-2110 правый Камаз

Облицовка порогов ВАЗ 2110 4шт

Порог-площадка «BMW-Styl-Black» для 3х дверно.

Накладка на порожек багажника Lada Xray 2016->

Накладки порогов Rival для Lada 4×4 3-дв. 1995-

Коврик порога ВАЗ 2110, 2111, 2112, 2170 резина черный.

Накладки на внутренние пороги Лада Калина/Калина 2 (хэт.

Порог ВАЗ-2110 левый Камаз

Русская Артель Накладка на порожек багажника для lada x.

Пороги съёмные РИФ нива

Порог-площадка «Silver» для 3х дверной Лада Н.

RUS Пороги силовые Нива 2131 5-дверей

Пороги ВАЗ 2101-07, файтер

Накладки на пороги Лада Калина 2004-2013

Ручки двери Azard ВАЗ 2110 Евро, цвет неокрашенные, 4 ш.

Накладки на пороги Rival для Lada 4×4 2121 3-дв. 1995-н.

Бампер ВАЗ 2110 передний пластиковый усиленный Технопла.

Пороги Внутрисалонные 2108, 2113 Пластик Сызрань

Установка накладок порогов

Накладки на пороги ваз 2110 как заменить своими руками

ВАЗ 2110 накладки на пороги

Для автомобиля ВАЗ 2110 наладки служат не только для улучшения эстетичного вида авто, но имеют практическую ценность при поездке по бездорожью и в каждодневном использовании. Накладки на пороги на ВАЗ 2110 имеют практическую пользу, которую можно определить некоторыми фактами:

• Основной из них – надежность защиты порогов от коррозии металла. Особенно это заметно, зимой и осенью, когда грязь и слякоть на дорогах.
• Защита порожек внутри кузова, предохранение автомобиля от случайных механических повреждений, возникающих при посадке и высадке пассажиров. Это могут быть глубокие царапины, вызываемые даже несколькими песчинками на подошве.
• Нижняя часть арки крыла хорошо защищается порогами с «сапогами».

Характеристика накладок на пороги для ВАЗ 2110

Обычно для изготовления накладок используется пластик толщиной 2 миллиметра, черного цвета:

• Для ВАЗ 2110 накладки дверей и порогов производители освоили делать из стеклопластика.
• Более дорогая для ВАЗ 2110 накладка на пороги изготавливается из алюминия или листа нержавеющей стали.
• Автолюбители часто поверх металлических порогов размещают накладки на пороги из пластмассы с сеткой.
• Пороги хорошо амортизируются, долгое время сохраняют свой внешний вид.
• Хотя они кажутся хрупкими, но способны выдержать приличный удар о препятствие, что указывает не только на предохранение авто от царапин, но и защищают от серьезной поломки.
• Цена ремонта, даже от сильного удара, когда сама накладка сломалась, будет не дорогой. В этом случае достаточно выровнять изогнутую часть порога и приобрести новую накладку.

Замена накладок для порогов на авто ВАЗ 2110

Пороги на ВАЗ, которому более десяти лет, требуют частой замены, они практически первыми выходят из строя. Предлагаемая инструкция позволит узнать, как правильно снимается и устанавливается на ВАЗ 2110 накладка порога. Эти полезные советы помогут выполнить все операции своими руками:

Сначала проверяется состояние дверных петель. В случае провисания двери или ее болтанки нужно выполнить ремонт петель, а затем начинать замену накладок порога. При большом износе в петле становится неравномерным зазор между порогом и нижней частью дверей, что может привести к ее задеванию за накладку.

Снимается обтекатель переднего крыла.

• Для этого снимается соответствующее колесо.
• Два болта выкручиваются ключом TORX T30, а отверткой один винт, фиксирующий грязезащитный щиток двигателя.
• Щиток удаляется.
• Выкручивается ключом на «7» винт, удерживающий к порогу обтекатель переднего крыла.
• Этим же ключом откручиваются винты, фиксирующие к крылу и подкрылку обтекатель переднего крыла, а на «10» отворачиваются гайки крепления его к кузову.
• Обтекатель снимается.
• Отворачивается ключом на «10» гайка, а отверткой винт на подкрылке.
• Подкрылок снимается.
• Выкручиваются винты, фиксирующие к бамперу защитный кожух крыла.
• Кожух освобождается от крепления к кронштейну и бамперу.
• Защитный кожух снимается.
• Снизу снимается скоба, удерживающая декоративную накладку.

Снятие скобы, удерживающей накладку

• Выворачиваются винты крепления, в проемах передней и задней дверей, накладки.
• Деталь снимается, как показано на фото.

Снятие накладки на порог ВАЗ 2110

Установка новых накладок для порогов

На кузов ВАЗ 2110 установка накладок на пороги осуществляется на отверстия, которые специально делают на заводе для этих элементов.

Совет: Прежде чем установить накладку на порог ее нужно обработать мовилем.

Итак:

• Накладка прикладывается к порогу.
• Устанавливаются и закручиваются три винта, фиксирующие деталь в проеме двери.
• Закручиваются винты заднего и переднего креплений.
• Устанавливается скоба для удержания декоративной накладки.
• Далее сборка осуществляется обратно разборке элементов.

Совет: При установке необходимо следить, чтобы не было щелей, куда может попадать грязь. При попадании ее в порог нужно снимать порог и проводить профилактику.Весь кузов, для предохранения от ржавчины лучше обработать антикором.

Таким образом выполняется на ВАЗ 2110 установка накладок порогов, сам процесс хорошо показан на видео.На более старых моделях автомобилей накладка порогов приваривается:

• Для этого используется полуавтоматическая сварка в углекислой среде, через предварительно выполненные отверстия диаметром от пяти до шести миллиметров.
• После сварки зачищаются сварные точки. Поверхность шпаклюется, грунтуется и красится.

Правильно установленные накладки на пороги увеличат срок эксплуатации корпуса автомобиля ВАЗ 2110.

Пара слов о защите порогов

Накладки для порогов Шевроле-Круз – это изделия из пластика или хрома, устанавливаемые в конструкцию автомобиля. Места их монтажа, наверное, понятны всем. Им являются порожки авто, вид на которые предстает при открытии дверей. Такие накладки выполняют две базовые функции:

• Во-первых – они украшают кузов автомобиля, если подобраны к его дизайну.
• Во-вторых – улучшают защиту порогов от неблагоприятных факторов внешней среды.

Естественно, при установке накладок на порожки Шевроле-Круз автолюбители преследуют цель защитить кузов машины от коррозийных процессов, однако дополнение в виде некоторой модернизации экстерьера также приятны многим из них. Тем более стоимость подобной модернизации всегда невелика, а ее реализация примитивна.

Накладки на Шевроле-Круз представлены на рынке автомобильных товаров широким ассортиментом. Наиболее популярны следующие виды изделий:

• Хром-накладки, обладающие немалой стоимостью, красивым оформлением и высочайшим уровнем защиты порогов.
• Декоративная защита, подбирающаяся для каждой модели в индивидуальном порядке с целью улучшения ее внешнего вида и обладающая несущественными защитными функциями.
• Стандартные накладки, отличающиеся простотой оформления и обеспечивающие оптимальную защиту порогов.

Примечание! Определить, какой вариант наилучший, непросто. Все зависит от целей, преследуемых автолюбителем. Если желание защитить свое авто превалирующее, необходимо покупать стандартные или накладки из хрома. В ином случае выбирать следует из декоративного класса изделий.

Установка порогов

Когда вы определились с выбором молдингов на пороги автомобиля, пришло время установить их. В первую очередь подготовьте набор инструментов:

1. Кусачки.
2. Плоскогубцы.
3. Паяльник.
4. Узкая плоская отвертка.
5. Мощная крестовая отвертка.
6. Провод двужильный.
7. Припой, канифоль.
8. Разъемы.
9. Изолента или термоусадочные трубки.
10. Уайт-спирит.
11. Вода.
12. Чистая ветошь.
13. Двухсторонний скотч.
14. Молитвослов.

Молитвослов пригодится, если вы впервые делаете эту процедуру.

Один из примеров:

Главное – перед началом установки обезжирить порог Уайт-спиритом или его аналогом и закрепить результат чистой сухой тряпочкой. Комфортная температура для работ от +20 градусов. Летом такие работы можно выполнить на свежем воздухе, а в холодное время года – исключительно в отапливаемом помещении. C монтажом справится даже школьник – молдинги продаются на самоклеющей основе. Технология проста, как дважды два:

• Открыть упаковку
• Обезжирить порог
• Промыть его
• Протереть тряпочкой
• Наклеить полоску.
• Дать ей высохнуть.
• Любоваться результатом.

Не забудьте закрепить конструкцию болтами и отвёрткой. Установка молдинга с подсветкой происходит, в основном, по той же схеме, только с рядом отличий. На каждом этапе необходимо проверять работоспособность конструкции, чтобы исправить ситуацию с плохой пайкой оперативно.

Работа по установке пластиковых накладок на пороги, проходит в несколько этапов

Подготовительный этап

Освобождаем пространство для манёвра. Частично снимаем дверной уплотнитель – только в тех местах, где нам это необходимо. Его можно поддеть плоской отвёрткой или просто руками.

Пластиковые пороги, установленные на заводе, закрепляются стальными скобами на ковролине. Впрочем, если последний уже меняли, то проблем меньше – скорее всего, закрепляющие скобы уже отсутствуют, полностью или частично.

Удаление скоб производится с помощью ножа или отвёртки

Следует соблюдать осторожность, поскольку потребуется приложение определённой силы, а потому нож лучше использовать давно не точенный

Зачастую заводские пороги не стоят доброго слова, а уж если их эксплуатировали пару-тройку лет, то от них, как правило, не остаётся даже воспоминания.

Под ковролином (который легко поднимается после удаления скоб, и который, вполне возможно, на старой машине тоже лучше заменить) обнаруживаем прямоугольные отверстия – пять штук. В них размещаются клипсы. Теперь необходимо проделать в ковролине (старом или новом) отверстия, соответствующие месторасположению клипс. Отверстие должно быть достаточно компактным, чтобы под него не попадала грязь, вода и мусор, и при этом достаточно широким, чтобы клипсы закрепились должным образом, да и процесс закрепления клипсы саморезом будет усложнён (клипса начнёт «елозить»). После этого можно вернуть отогнутый уплотнитель на место.

Крепление порога

При закреплении нового порога с помощью саморезов начинаем с крепления к стойке. Это позволит выровнять порожек и аккуратно его разместить для последующей фиксации прочими саморезами.

Закручивание саморезов при фиксации клипсы – задача непростая. Главное – сохранить резьбу, что непросто для начинающих автомехаников и любителей работать «нахрапом». Причём лучше всего, закрепив первый саморез, остальные подкручивать постепенно и одновременно, контролируя степень затяжки.

Пороги на остальных дверях закрепляются аналогичным образом.

В результате вы получаете куда более защищённую машинку – и от коррозии, и от механического стирания, и от мусора в салоне. К тому же вымыть пластиковый порожек не представляет сложностей даже для горожанина и вне мойки

Более того, автомобиль с такими пластиковыми накладками сразу выглядит более солидным и ухоженным, а это тоже важно.

Для чего нужны накладки

Основное предназначение этих средств – защита автомобиля от неприятностей передвижения. Помимо функции спасения от механических и физических повреждений, они способствуют улучшению аэродинамических особенностей транспортного средства и дизайну экстерьера. Если транспортное средство выезжает регулярно, со временем его кузов покрывается дефектами и ржавчиной, разъедает металл, что довольно неприятно. Усугубляют ситуацию не очень хорошие дороги и разрушающие осадки. Ремонт дефектных порогов очень дорогой. А если проблему долго не замечать, то можно остаться без них в лучшем случае. При худшем раскладе грязь начнёт разъедать смежные с порогами элементы кузова транспортного средства.

Виды накладок

Популярными остаются и самые грязные для экологии молдинги из пластика. Они экономичны, стоят недорого. Пластик отлично амортизирует сильные нагрузки и способен принять на себя сильный удар. Треснувшую накладку легко заменить без дорогостоящего ремонта. А саму накладку на автомобильные пороги легко утилизировать в соответствующем контейнере для бытовых отходов. Не лишён пластик недостатков. Его служба в нашем климате недолговечна. Поскольку всё время молдинги находятся на улице, они разрушаются в зимнее время. В последнее время на рынок вышли усовершенствованные пластиковые накладки для порогов автомобиля. Но их доля пока что мала, а преобладают низкокачественные китайские модели. Новые поколения молдингов оснащены подсветкой. Это дополнительное преимущество для автомобилистов. Транспортное средство легче найти в темноте. Ассортимент разновидностей подсветки широк, что автоматически уникализирует автомобиль и делает его легко отличимым на площадке.

Стекло-пластиковые Пороги на ВАЗ 2110

Представляю Вашему вниманию Стекло-пластиковые Пороги на ВАЗ 2110

Стекло-пластиковые пороги на ВАЗ 2110 придают спортивный внешний вид и визуально уменьшают клиренс автомобиля.

Стекло-пластиковые пороги на ВАЗ 2110 изготовлены с использованием композитных материалов.

Вес Стекло-пластиковых порогов на ВАЗ 2110 составляет 4-5 кг.

Дистанционное зондирование | Бесплатный полнотекстовый | PlaNet: нейронная сеть для обнаружения поперечных эоловых хребтов на Марсе

PlaNet адаптирует типичную структуру RetinaNet к функции классификации на основе тайлов (а не функции определения местоположения), которая создает карты, на которых пространственные отношения между поверхностным покрытием могут быть получены из оценок классификации.Это новое приложение RetinaNet, которое не описано в литературе. PlaNet демонстрирует, что стандартные глубокие сверточные сети могут быть легко адаптированы к различным концептуальным представлениям «объектов» и, в частности, что идентификация на основе объектов может быть адаптирована к нечетким классификациям. Это нововведение имеет последствия, выходящие за рамки представленного здесь приложения. Например, примененная здесь концептуализация земного покрова может быть использована на Земле для картирования других нечетких объектов, таких как барханные дюны, горные хребты или цирки.

Новые генетические сигналы для функции легких выделяют пути и ассоциации хронических обструктивных заболеваний легких у разных предков

Marjo-Riitta Jarvelin

Все авторы критически рассмотрели рукопись перед отправкой. KS, USSG, SK, SMK, TL, PSB, THB, ERB, YB, ZC, JDC, JD, DLD, CG, AG, KH, JDH, JEH, PJ, CL, L.Li, NL, JCM, HR, И.Сайерс, DDS, RT-S., JCW, PGW., L.M.Y., O.T.R., M.K., O.P., U.G., I.R., I.J.D., N.M.P., H.S., A.L.J., J.F.W., E.Z., M.J., N.W., A.S.B., R.A.S., D.A.M., M.H.C., D.P., I. и L.V.W. внес вклад в концепцию и дизайн исследования. NS, ALG, AME, VEJ, BDH, CAM, C.Batini, KAF, KS, PS, Xingnan Li, RB, NFR, MO, J.Zhao, MW, SW, KAK, JPC, BBS, J.Zhou, JH , MI, SEH, JM, SE, I.Surakka, VV, TL, RJA, FD, JDH, PKJ, Xuan Li, A.Mahajan, JCM, DCN, M.M.P., D.P., D.Q., R.R., H.R., D.S., P.R.H.J.T., M.V., L.M.Y., O.G.T., N.M.P., N.W., E.K.S., C.H., A.P.M., A.S.B., R.A.S., M.H.C., D.P..S., M.D. и L.V.W. провел анализ данных. NS, ALG, AME, VEJ, CAM, C.Batini, KAF, KS, PS, Xingnan Li, NFR, MO, MW, KAK, BBS, SK, MI, RJA, C.Brandsma, JD, FD, RE, CG , AG, ALH, JDH, GH, PKJ, CL, Xuan Li, KL, L.Lind, JL, JCM, A.Murray, RP, MMP, MLP, DJP, DP, DQ, RR, HR, I.Sayers, Б.H.S., M.S., L.M.Y., O.G.T., N.M.P., H.S., J.F.W., B.S., M.J., N.W., C.H., A.P.M., A.S.B., R.A.S., R.G.W., M.H.C., D.P.S., I.P.H., M.D.T. и L.V.W. способствовал сбору и / или интерпретации данных. N.S., A.L.G., A.M.E., I.P.H., M.D.T. и L.V.W. подготовил рукопись.

(PDF) Пороговые значения количества осадков для возможного возникновения оползней в Италии

М. Т. Брунетти и др .: Пороговые значения количества осадков для возможного возникновения оползней в Италии 457

ранее признанные условия осадков.Это важная информация для

прогноза возникновения оползней и

для определения опасности оползней.

Допуская определение нескольких пороговых значений на основе

на различных уровнях вероятности превышения, метод Frequen-

tist был использован для разработки вероятностной схемы

для прогнозирования возможного возникновения оползня —

. Такая схема или другие аналогичные схемы могут быть внедрены в системы предупреждения об оползнях, работающих в различных географических масштабах, на основе измерений осадков или прогнозов

.

Благодарности. Работа финансируется национальным департаментом гражданской защиты (DPC) Италии

, который также предоставил

национальную базу данных по осадкам за период 2002–2009 годов. MTB,

SP и MR при поддержке грантов DPC. Мы хотели бы поблагодарить

Габриэле Тонелли за его работу над базой данных об осадках.

Отредактировал: T. Glade

Рецензировал: K.-T. Чанг и С. Бай

Ссылки

Абрамовиц М. и Стегун И.A. (Eds.): Handbook of Mathematical —

ical Functions with Formulas, Graph, and Mathematical Tables,

10th edn., National Bureau of Standards, John Wiley and Sons,

1972.

Aleotti, P. : Система предупреждения о неглубоких сбоях, вызванных дождем,

Eng. Geol., 73, 247–265, 2004.

Allchin, D .: Error Types, Perspectives on Science, 9 (1), 38–58,

2001.

Bacchini, M. and Zannoni, A .: Взаимосвязь между осадками и триггерным потоком мусора: пример Канчии (Доломиты, северная

восточная Италия), Nat.Опасности Earth Syst. Sci., 3, 71–79, 2003,

http://www.nat-hazards-earth-syst-sci.net/3/71/2003/.

Болли С. и Олиаро П .: Анализ обломков в алькуни

bacini campione dell’Alta Val Susa, Geoingegneria Ambientale

e Mineraria, март, 69–74, 1999 г. (на итальянском языке).

Брунетти, М. Т., Перуккаччи, С., Росси, М., Гуццетти, Ф., Райхен-

Бах, П., Ардиццоне, Ф., Кардинали, М., Мондини, А., Сальвати, П.,

Тонелли, Г., Валиджи, Д., и Лучани, С.: Прототип системы

для прогнозирования оползней, вызванных дождями в Италии, в: Материалы

1-го Итальянского семинара по оползням, под редакцией: Пикарелли,

Л., Томмази П., Урчиуоли, Г., и Версаче, П., Дождевые оползни

Оползни: механизмы, методы мониторинга и прогноз текущей погоды

для систем раннего предупреждения, Неаполь, 1, 157–161, 2009.

Кейн, штат Н .: Интенсивность дождя -продолжительность контроля мелководья-

оползней и селей, Геогр.Аня. A, 62, 23–27, 1980.

Calcaterra, D., Parise, M., Palma, B., and Pelella, L .: Влияние

метеорных явлений на запуск мелких оползней в пирокласе. месторождений Кампании, Италия, в: Труды 8-го Международного симпозиума по оползням In-

, под редакцией: Bromhead, E.,

Dixon, N., and Ibsen, ML, AA Balkema, Cardiff, 1, 209– 214,

2000.

Канчелли, А. и Нова, Р .: Оползни в покрове почвенного мусора, вызванные ливнями

в Вальтеллина (центральные Альпы — Италия), в: Proceedings

4-й Международной конференции и полевого семинара on Land-

слайды, Японское геологическое общество, Токио, 267–272, 1985.

Cardinali, M., Ardizzone, F., Galli, M., Guzzetti, F., and Reichen-

bach, P .: Оползни, вызванные быстрым таянием снега, декабрь-

, сентябрь 1996 г. — январь 1997 г. в Центральной Италии, в: Proceedings

1-й конференции EGS Plinius по средиземноморским штормам,

Maratea, 14–16 октября 1999 г., под редакцией: Claps, P. and Siccardi,

F., Editoriale Bios, Cosenza, 439 –448, 2000.

Cannon, SH и Gartner, JE: Поток мусора, связанный с лесными пожарами, из

с точки зрения опасностей, в: Опасности, связанные с потоками мусора и связанные с ними явления,

, под редакцией: Jakob, M.и Hungr. O., Springer, Berlin,

363–385, 2005.

Ceriani, M., Lauzi, S., and Padovan, N .: Триггер пороговых значений осадков —

разливов мусора в альпийской области региона Ломбардия , центральная

Альпы — Италия, Proc. Человек и гора, я конв. Междунар. per la Pro-

tezione e lo Sviluppo dell’ambiente montano, Ponte di Legno

(BS), 123–139, 1994.

Clarizia, M., Gull`

a, G., and Sorbino, G .: Sui meccanismi di in-

nesco dei почвы, в: Proceedings of International Confer-

ence on Prevention of Hydro-geological Hazards: The Role

of Scienti ‑ Research Alba, Italy, 1, 585–597, 5 –7 ноября

1996.

Короминас, Дж .: Оползни и климат. Основная лекция, в: Pro-

ceedings 8-го Международного симпозиума по оползням,

под редакцией: Bromhead, E., Dixon, N., and Ibsen, ML, AA

Balkema, Cardiff, 4, 1–33 , 2000.

Crosta, GB и Frattini, P .: Распределенное моделирование мелких оползней

, вызванных интенсивными дождями, Nat. Опасности Earth Syst.

Sci., 3, 81–93, 2003,

http: //www.nat-hazards-earth-syst-sci.нетто / 3/81/2003 /.

Crosta, GB и Frattini, P .: Пороговые значения количества осадков для запуска почвы

поскользнуться и обломки, в: Proceedings 2 EGS Plinius

Conference on Mediterranean Storms, под редакцией: Mugnai, A.,

Guzzetti, Ф. и Рот, Г., Сиена, Италия, 463–487, 16–18 октября

2001.

Круден, Д.М. и Варнес, Д.Д.: Типы и процессы оползней,

в: Оползни, исследования и смягчение последствий, Транспортная Ре-

поисковая доска, под редакцией: Тернер А.К. и Шустер, Р.Л., Spe-

cial Report 247, Вашингтон, округ Колумбия, 36–75, 1996.

Флорис, М., Мари, М., Ромео, Р. У. и Гори, У .: Моделирование

факторов, провоцирующих оползни — тематическое исследование в северных Апенах.

девятки, Италия, Lect. Notes Earth Sci. 104, 745–753, 2004.

Giannecchini, R .: Осадки, вызывающие оползни почвы на юге

Апуанские Альпы (Тоскана, Италия), Adv. Geosci., 2, 21–24, 2005,

http://www.adv-geosci.net/2/21/2005/.

Guzzetti, F .: Число погибших в результате оползней и оценка риска оползней в

Италия, Eng. Geol., 58, 89–107, 2000.

Guzzetti, F., Cardinali, M., and Reichenbach, P .: The AVI Project:

Библиографическая и архивная инвентаризация оползней и паводков

в Италии, Environ . Manage., 18, 623–633, 1994.

Guzzetti, F., Peruccacci, S., Rossi, M., and Stark, CP: Rainfall

пороговые значения для инициирования оползней в центральной и южной частях

Европа, Meteorol.Атмос. Phys., 98, 239–267, 2007.

Guzzetti, F., Peruccacci, S., Rossi, M., and Stark, CP: Осадки

Контроль интенсивности и продолжительности мелких оползней и обломочных потоков:

обновление, Landslides, 5 (1), 3–17, 2008.

Guzzetti, F., Salvati, P., and Stark, CP: Оценка риска для

населения, создаваемого опасными природными явлениями в Италии, в: Landslide

Управление рисками, под редакцией: Hungr, O., Fell, R., Couture, R.,

и Eberhardt, E., Taylor & Francis Group, Лондон, 381–389,

2005a.

www.nat-hazards-earth-syst-sci.net/10/447/2010/ Нац. Опасности Earth Syst. Sci., 10, 447–458, 2010

Генетические полиморфизмы в гене ACYP2, зависящем от длины теломер, связаны с риском развития колоректального рака у китайской ханьской популяции

ВВЕДЕНИЕ

Колоректальный рак (CRC) является третьим по распространенности. рак и четвертая по значимости причина смертности от рака во всем мире. Заболеваемость CRC увеличивается с каждым годом [1].Хотя разработка новых терапевтических средств увеличила 5-летнюю выживаемость до 90% для пациентов, у которых диагностирована стадия I, прогноз для пациентов с поздней стадией CRC плохой [2]. Таким образом, определение эпидемиологических факторов, влияющих на развитие CRC, позволит упростить профилактику и раннее выявление, что приведет к улучшению результатов лечения пациентов. Исследования близнецов показали, что вклад наследственных факторов (в основном генетических) в этиологию CRC составляет примерно 35% [3], что означает, что генетические факторы значительно влияют на восприимчивость CRC.

Теломеры представляют собой нуклеопротеиновые комплексы на концах хромосом эукариот. Эти структуры состоят из некодирующих повторов TTAGGG и связанных белков, связывающих теломеры. Теломеры поддерживают целостность хромосом и стабильность генома, предотвращая нуклеолитическую деградацию, слияние хромосом от конца к концу и нерегулярную рекомбинацию [4-6]. Длина теломер определяется балансом между процессами, которые укорачивают и удлиняют теломер [7]. Средняя длина теломер колеблется в пределах 10-15 т.п.н. в соматических клетках человека.Длина теломер уменьшается на 50-200 п.н. с каждым делением клетки [8]. Во время репликации соматических клеток длина теломер постепенно укорачивается из-за неспособности ДНК-полимеразы полностью реплицировать 3 ’конец ДНК. В общем, критически короткая длина теломер может запускать репликативное старение и гибель клеток [9]. Это может привести к геномной нестабильности и хромосомным аномалиям, которые могут способствовать канцерогенезу [10].

Ген ACYP2 , расположенный на хромосоме 2p16.2, кодирует небольшой цитозольный фермент ацилфосфатазу, который катализирует гидролиз карбоксилфосфатных связей [11]. Полногеномные исследования ассоциации продемонстрировали, что генетические полиморфизмы в ACYP2 связаны с длиной теломер [12], что привело к исследованиям ассоциации между ACYP2 и различными видами рака. Например, было обнаружено, что rs11125529 в ACYP2 связан с риском нескольких гормонально-зависимых форм рака (например, груди, яичников и простаты) в европейской популяции [13, 14].Однако мало исследований изучали связь между генетическими вариантами ACYP2 и риском CRC. Мы провели исследование случай-контроль, чтобы проанализировать связь между 14 однонуклеотидными полиморфизмами (SNP) в ACYP2 и риском CRC в популяции китайской хань.

РЕЗУЛЬТАТЫ

В исследование были включены в общей сложности 247 случаев CRC (107 мужчин и 140 женщин; средний возраст 58,32 ± 12,75 лет) и 300 контролей (180 мужчин и 120 женщин; средний возраст 60,42 ± 5,14 года).Клинические характеристики случаев и контроля показаны в таблице 1. Не было значительных различий в распределении по возрасту и полу между группами случая и контроля ( p <0,05). Частоты минорных аллелей (MAF) проанализированных SNP в случайной и контрольной группах показаны в таблице 2. Все SNP находились в равновесии Харди-Вайнберга (HWE) в контроле ( p > 0,05), за исключением rs843740, который был исключен из последующих анализов. MAF SNP в контрольной группе были аналогичны показателям, полученным для азиатской популяции HapMap.Используя тесты хи-квадрат, мы определили, что rs843711 был связан с 1,376-кратным увеличением риска CRC (95% доверительный интервал [CI] = 1,082–1,749; p = 0,009). Аналогичным образом, rs843706 был связан со значительным увеличением риска CRC (отношение шансов [OR] = 1,361, 95% ДИ = 1,069–1,733; p = 0,012). Никаких значимых ассоциаций между другими SNP и риском CRC обнаружено не было.

Таблица 1: Характеристики случаев и контролей, включенных в исследование

Средний возраст

32 ± 12,75

^a Значение p было рассчитано с использованием критериев хи-квадрат Пирсона.

^b Значение p было рассчитано с использованием t-критерия Велча.

SD, стандартное отклонение.

Таблица 2: Частоты аллелей в случаях и контролях, а также оценки отношения шансов для колоректального рака

0,974-1,585

ACYP2

9085

0,931-1,699

ACYP2

02

02 0022

MAF, частота минорных аллелей; HWE, равновесие Харди-Вайнберга; ИЛИ — отношение шансов; ДИ: доверительный интервал.

^{минорный аллель} ; ^# HWE p -значение ≤ 0,05 было исключено; * p значение ≤ 0,05.

Коррекция Бонферрони была выполнена с p ≤ 0,00036 (0,05 / 14), считающимся значимым.

Частоты генотипов полиморфизма ACYP2 показаны в таблице 3. По сравнению с генотипом CC, частота генотипа GG полиморфизма rs6713088 в группе случаев значительно отличалась от контроля (GG против CC: OR = 1,750 , 95% ДИ = 1,032–2,967; p = 0,038), предполагая, что rs6713088 увеличивает риск CRC. Аналогичным образом, по сравнению с людьми с генотипом CC rs843711, люди с генотипом TT имели значительно повышенный риск CRC (TT vs.CC: OR = 2,007, 95% ДИ = 1,218–3,308; р = 0,006). Лица с генотипом AA rs843706 также имели повышенный риск CRC по сравнению с лицами с генотипом CC (AA против CC: OR = 1,971, 95% CI = 1,184–3,280; p = 0,009).

Таблица 3: Распределение генотипов SNP и их связи с риском колоректального рака

G / T

C / A

A / G

A / C

OR

002

1,079-1,791

1,108

0,508

OR, отношение шансов; ДИ: доверительный интервал.

* p ≤ 0,05.

Коррекция Бонферрони была выполнена с p ≤ 0,00036 (0,05 / 14), считающимся значимым.

Далее мы охарактеризовали SNP в ACYP2 SNP с использованием анализа неравновесия по сцеплению (LD) и гаплотипов. Была рассчитана попарная LD между всеми 13 SNP и проанализирована гаплотипическая структура гена ACYP2 (D ’и r ² ). Блоки гаплотипов были разделены с использованием метода доверительного интервала D ’. Смежные SNP со значениями D ’и 95% доверительным интервалом между 0,70–0,98 были классифицированы как один и тот же блок гаплотипа. В контрольной группе были обнаружены два блока LD (рис. 1).Блок 1 состоял из 8 тесно связанных SNP (rs1682111, rs843752, rs10439478, rs843645, rs11125529, rs12615793, rs843711 и rs11896604), а блок 2 состоял из двух связанных SNP (rs843706 и rs17045754).

Рис. 1: D ’карта связей для 13 SNP в ACYP2 . Для отображения неравновесия по сцеплению (LD) использовалась стандартная цветовая схема: ярко-красный соответствует сильному LD (LOD = 2, D ‘= 1), белый соответствует отсутствию LD (LOD <2, D ‘ <1 ), розовый / красный (LOD = 2, D ‘<1) и синий (LOD <2, D ‘ = 1), соответствующие промежуточному LD.

Наконец, было проведено исследование ассоциации на основе гаплотипов для оценки взаимосвязи между гаплотипами ACYP2 и риском CRC (Таблица 5). Гаплотип «TTCTCGCC» был связан со сниженным риском CRC (OR = 0,719; 95% CI, 0,529–0,978, p = 0,035). Этот гаплотип состоял из rs1682111, rs843752, rs10439478, rs843645, rs11125529, rs12615793, rs843711 и rs11896604. Кроме того, гаплотип «AG» rs843706 и rs17045754 был связан с повышенным риском CRC (OR = 1.377; 95% ДИ, 1,044–1,815, p = 0,023). Напротив, гаплотип «CG» был связан со сниженным риском CRC (OR = 0,732; 95% CI, 0,568-0,944, p = 0,016).

Таблица 5: Частоты гаплотипов ACYP2 и связь с риском колоректального рака в случаях и в контрольной группе

5

SNPs

OR: отношение нечетных чисел; ДИ: доверительный интервал.

p -adj: p -значения скорректированы с учетом пола и возраста;

* p значение ≤ 0,05.

Произведена коррекция Бонферрони с p ≤ 0,00036 (0,05 / 14).

ОБСУЖДЕНИЕ

Мы исследовали связи между 14 SNP в гене ACYP2 и риском CRC в китайской ханьской популяции.Мы определили, что четыре SNP (rs6713088, rs843645, rs843711 и rs843706) были связаны с повышенным риском CRC. Кроме того, мы продемонстрировали, что три гаплотипа в ACYP2 были связаны с риском CRC.

Предыдущие исследования выявили связь между геном ACYP2 и метаболизмом раковых клеток (т.е. метаболизмом пирувата и гликолизом / глюконеогенезом) [15, 16]. Выживание и пролиферация раковых клеток связаны с захватом глюкозы и измененной экспрессией некоторых метаболических промежуточных продуктов в пути гликолиза / глюконеогенеза, таких как фосфофруктокиназа (PFK) и пируваткиназа [17, 18].ПФК необходим для гликолиза и является возможной мишенью для противоопухолевых препаратов. Переход раковых клеток в высокопролиферативное состояние коррелирует со снижением экспрессии PFK [19]. Кроме того, метаболизм пирувата может генерировать лактат или аланин и сопровождается преобразованием NADH в NAD ⁺ , который может обеспечивать субстраты и энергию для раковых клеток, чтобы управлять пролиферацией и дифференцировкой [20]. Таким образом, стимуляция метаболического пути пирувата может способствовать злокачественной трансформации [18, 21].Мы обнаружили, что SNP в ACPY2 были связаны с риском CRC. Наши данные предполагают, что ACPY2 может играть важную роль в регуляции метаболизма глюкозы и пирувата у пациентов с CRC. Однако механистические детали еще не выяснены.

Теломеры играют решающую роль в поддержании стабильности генома [22, 23]. Длина теломер становится короче после каждого деления клетки. Следовательно, длина теломер может служить маркером клеточного и биологического возраста [24].Возможно, укороченные теломеры могут предрасполагать людей к определенным заболеваниям. Полногеномные исследования ассоциации показали, что rs11125529 в гене ACYP2 ассоциирован с уменьшением длины теломер [12, 25]. Хотя мы не наблюдали связи между rs11125529 и риском CRC в нашей исследуемой популяции, мы обнаружили, что rs6713088, rs843645, rs843711 и rs843706 были связаны с риском CRC. Кроме того, мы обнаружили, что гаплотипы «TTCTCGCC» и «CG» защищают от CRC, в то время как гаплотип «AG» может увеличивать риск CRC.Эти результаты предполагают, что генетические вариации в гене ACYP2 могут влиять на риск CRC, влияя на длину теломер.

Поправка Бонферрони обычно используется для устранения ложных обнаружений в результате множественных сравнений. Мы обнаружили, что только связь между rs843711 и CRC была значимой после коррекции Бонферрони, тогда как rs843706, rs6713088 и rs843645 не имели значительной связи с CRC. Это может быть связано с нашими строгими критериями фильтрации SNP и небольшим размером выборки.Поправка Бонферрони регулирует значение альфа в зависимости от количества выполненных тестов и является относительно консервативной. В некоторых случаях действительно значимые различия могут быть сочтены несущественными в результате ошибок типа II [26].

У нашего исследования было несколько внутренних ограничений. Например, CRC — гетерогенное заболевание, а потребление алкоголя и табака — важные факторы риска CRC. Поскольку наше исследование было относительно небольшим и не включало данные о потреблении алкоголя и табака, мы не могли изучить взаимодействие между генетическим полиморфизмом и факторами окружающей среды у пациентов с CRC.Следовательно, взаимосвязь между полиморфизмом ACYP2 и статусом употребления алкоголя и курения при CRC должна быть оценена в будущих исследованиях.

Таким образом, наши результаты показывают, что SNP в гене ACYP2 связаны с CRC в китайской ханьской популяции. Эти SNP могут служить прогностическими биомаркерами CRC у населения Китая. Будущие исследования будут сосредоточены на выяснении функции ACYP2 при CRC, что может быть важно для профилактики или раннего выявления CRC, а также для улучшения прогноза пациентов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Участники исследования

Все участники нашего исследования были китайцами хань. В период с января 2011 года по декабрь 2014 года в онкологической больнице и институте Ляонин, аффилированной онкологической больнице Китайского медицинского университета, Китай, последовательно набрали в общей сложности 247 пациентов и 300 контрольных пациентов. Для набора пациентов не было ограничений по полу, возрасту или стадии заболевания. Все пациенты были ранее здоровыми людьми. Диагноз CRC был подтвержден гистопатологическим исследованием.У контрольных субъектов в анамнезе были злокачественные новообразования или хронические заболевания. Мы исключили пациентов, прошедших лучевую терапию или химиотерапию, а также контрольную группу с хроническими заболеваниями. Все участники текущего исследования не были родственниками по крови.

Клинические данные и демографическая информация

Мы использовали стандартный эпидемиологический опросник и личное интервью для сбора личных данных, включая возраст, пол, район проживания, образовательный статус и семейный анамнез рака.Информация о случаях была собрана путем консультаций с лечащими врачами или из обзоров медицинских карт. Все участники дали письменное информированное согласие. Комитет по исследованиям на людях для одобрения исследований с участием людей, онкологическая больница и институт Ляонин, аффилированная онкологическая больница Китайского медицинского университета одобрили использование образцов крови человека в этом исследовании.

Выбор и генотипирование SNP

Среди 14 выбранных нами SNP был выбран rs11125529 на основании ранее опубликованных полиморфизмов, связанных с длиной теломер [12].Остальные были выбраны случайным образом. Все SNP имели MAF> 5% в популяции китайской хань-пекинской группы HapMap. ДНК выделяли из образцов цельной крови с использованием набора для очистки геномной ДНК цельной крови GoldMag-Mini (GoldMag Co. Ltd., Сиань, Китай). Количественную оценку экстрагированной ДНК проводили с использованием NanoDrop 2000 (Thermo Scientific, Уолтем, Массачусетс, США). Мультиплексный анализ SNP MassEXTENDED был разработан с использованием программного обеспечения Sequenom MassARRAY Assay Design 3.0 [27]. Генотипирование выполняли на платформе Sequenom MassARRAY RS1000 с использованием протокола производителя.Праймеры ПЦР для каждого SNP показаны в таблице 6. Обработка данных и анализ выполнялись с использованием программного обеспечения Sequenom Typer 4.0 [27, 28].

Таблица 6: Праймеры, использованные в этом исследовании

Статистический анализ

Мы использовали Microsoft Excel и SPSS 18.0 (SPSS, Чикаго, Иллинойс, США) для выполнения статистического анализа. Все значения p , представленные в этом исследовании, были двусторонними, и p = 0,05 считалось отсечкой для статистической значимости. Различия в характеристиках исследуемых групп пациентов и контрольной группы были проанализированы с использованием критериев хи-квадрат для категориальных переменных и t-критерия Велча для непрерывных переменных. Во всех анализах аллель с более низкой частотой считался аллелем «риска». Частоты контрольных генотипов для каждого SNP были проверены на отклонение от HWE с использованием точных тестов Фишера.Частоты аллелей и генотипов в случаях и в контроле сравнивали с помощью критериев хи-квадрат [29]. Для оценки связи между каждым генотипом и риском CRC использовались три модели (аддитивная, доминантная и рецессивная). Влияние полиморфизма на риск CRC было выражено в виде OR с 95% доверительным интервалом, которые были рассчитаны с использованием анализа безусловной логистической регрессии после поправки на возраст и пол [30]. Наконец, паттерны LD и гаплотипы были оценены с помощью программного пакета Haploview (версия 4.2) [31]. Коррекция Бонферрони была выполнена для всех значений p , а порог статистической значимости был установлен на уровне p ≤ 0,00036 (0,05 / 14).

БЛАГОДАРНОСТИ

Мы благодарны доктору МинДи Инь за выполнение статистического анализа. Мы также благодарим Yu Liu за предоставленную техническую поддержку и выполнение анализа ассоциации SNP.

КОНФЛИКТЫ ИНТЕРЕСОВ

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

ПОДДЕРЖКА ГРАНТА

Работа была поддержана грантами Медицинского фонда Ву Цзэпина (No.320.6750.16063 на имя Чжун-го Чжан) и проект Фонда научных исследований провинции Ляонин (№ 2016003002 на имя Чжун-го Чжан).

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Центр М.М., Джемал А., Уорд Э. Международные тенденции заболеваемости колоректальным раком. Эпидемиология рака, биомаркеры и профилактика. 2009; 18: 1688–1694.

2. Джемал А., Сигел Р., Вард Э, Хао Й, Сюй Дж., Мюррей Т., Тун М.Дж. Статистика рака, 2008. CA Cancer J Clin. 2008; 58: 71-96.

3. Лихтенштейн П., Холм Н.В., Веркасало П.К., Илиаду А., Каприо Дж., Коскенвуо М., Пуккала Е., Скайтте А., Хемминки К.Факторы окружающей среды и наследственные факторы в возникновении рака — анализ когорт близнецов из Швеции, Дании и Финляндии. N Engl J Med. 2000; 45: 167-168.

4. де Ланге Т., Шиуэ Л., Майерс Р.М., Кокс Д.Р., Нейлор С.Л., Киллери А.М., Вармус Х.Э. Структура и изменчивость концов хромосом человека. Молекулярная и клеточная биология. 1990; 10: 518-527.

5. де Ланге Т. Шелтерин: белковый комплекс, который формирует и защищает теломеры человека. Гены и развитие. 2005; 19: 2100-2110.

6.Blasco MA. Теломеры и болезни человека: старение, рак и не только. Природа рассматривает генетику. 2005; 6: 611-622.

7. Хуг Н., Лингнер Дж. Гомеостаз длины теломер. Хромосома. 2006; 115: 413-425.

8. Хаффман К.Э., Левен С.Д., Тесмер В.М., Шей Дж.В., Райт В.Е. Укорочение теломер пропорционально размеру G-богатого теломерного 3′-выступа. Журнал биологической химии. 2000; 275: 19719-19722.

9. Allsopp RC, Vaziri H, Patterson C, Goldstein S, Younglai EV, Futcher AB, Greider CW, Harley CB.Длина теломер определяет репликативную способность фибробластов человека. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 1992; 89: 10114-10118.

10. Wu X, Amos CI, Zhu Y, Zhao H, Grossman BH, Shay JW, Luo S, Hong WK, Spitz MR. Дисфункция теломер: потенциальный фактор предрасположенности к раку. Журнал Национального института рака. 2003; 95: 1211-1218.

11. Degl’Innocenti D, Marzocchini R, Rosati F, Cellini E, Raugei G, Ramponi G. Экспрессия ацилфосфатазы во время дифференцировки макрофагов и активации линии клеток U-937.Биохимия. 1999; 81: 1031-1035.

12. Кодд В., Нельсон С.П., Альбрехт Э., Мангино М., Дилен Дж., Бакстон Дж. Л., Хоттенга Дж. Дж., Фишер К., Эско Т., Суракка И. Идентификация семи локусов, влияющих на среднюю длину теломер и их связь с заболеванием. Генетика природы. 2013; 45: 422-427.

13. Yu WS, Jeong SJ, Kim JH, Lee HJ, Song HS, Kim MS, Ko E, Lee HJ, Khil JH, Jang HJ, Kim YC, Bae H, Chen CY, Kim SH. Полногеномный профиль экспрессии клеток рака молочной железы MDA-MB-231, обработанных 1,2,3,4,6-пента-О-галлоил-бета-D-глюкозой: молекулярная мишень для метаболизма рака.Молекулы и клетки. 2011; 32: 123-132.

14. Пули К.А., Боджесен С.Е., Вайшер М., Нильсен С.Ф., Томпсон Д., Амин Аль Олама А., Михайлиду К., Тайрер Дж. П., Бенллох С., Браун Дж., Одли Т., Любен Р., Хоу К. Т. и др. Полногеномное ассоциативное сканирование (GWAS) для определения средней длины теломер в рамках проекта COGS: выявленные локусы слабо связаны с риском рака, связанного с гормонами. Молекулярная генетика человека. 2013.

15. Yu WS, Jeong S-J, Kim J-H, Lee H-J, Song HS, Kim M-S, Ko E, Lee H-J, Khil J-H, Jang H-J.Полногеномный профиль экспрессии 1, 2, 3, 4, 6-пента-О-галлоил-β-D-глюкозы клеток рака молочной железы MDA-MB-231: молекулярная мишень для метаболизма рака. Молекулы и клетки. 2011; 32: 123-132.

16. Вон ХХ, Ли Дж., Пак Джо, Пак Й.С., Лим Х.Й., Кан В.К., Ким Дж. У., Ли Си, Пак Ш. Полиморфные маркеры, связанные с тяжелой хронической периферической нейропатией, вызванной оксалиплатином, у пациентов с раком толстой кишки. Рак. 2012; 118: 2828-2836.

17. Pradelli L, Villa E, Zunino B, Marchetti S, Ricci J.Метаболизм глюкозы подавляется каспазами при индукции апоптоза. Смерть и болезнь клеток. 2014; 5: e1406.

18. Конде В.Р., Оливейра П.Ф., Нунес А.Р., Роча С.С., Рамалхоса Е., Перейра Дж.А., Алвес М.Г., Сильва Б.М. Прогрессирование от более низкой к более высокой инвазивной стадии рака мочевого пузыря связано с серьезными изменениями метаболизма глюкозы и пирувата. Экспериментальные исследования клеток. 2015; 335: 91-98.

19. Ваз К.В., Алвес М.Г., Маркес Р., Морейра П.И., Оливейра П.Ф., Майя С.Дж., Сокорро С.Андроген-чувствительные и невосприимчивые клетки рака предстательной железы имеют отчетливый профиль гликолитического метаболизма. Международный журнал биохимии и клеточной биологии. 2012; 44: 2077-2084.

20. Исраэльсен В.Дж., Вандер Хайден М.Г. (2015). Пируваткиназа: функция, регуляция и роль в развитии рака. Семинары по клеточной биологии и биологии развития: Elsevier), стр. 43-51.

21. Слосарек П.В., Ли С., Поллард П.Дж. Переключение митохондриального метаболизма пирувата: выключение света в раковых клетках? Молекулярная клетка.2014; 56: 343-344.

22. Блэкберн Э. Состояния теломер и судьбы клеток. Природа. 2000; 408: 53-56.

23. Вонг Дж. М., Коллинз К. Поддержание теломер и болезни. Ланцет. 2003; 362: 983-988.

24. Харрис С.Е., Мартин-Руис К., фон Зглиницки Т., Старр Дж. М., Дири И. Дж.. Длина теломер и биомаркеры старения у 70-летних: когорта Lothian Birth 1936. Нейробиология старения. 2012; 33: 1486. е1483-1486. e1488.

25. Пули К.А., Боджесен С.Е., Вайшер М., Нильсен С.Ф., Томпсон Д., Аль-Олама А.А., Михайлиду К., Тайрер Дж. П., Бенллох С., Браун Дж.Полногеномное ассоциативное сканирование (GWAS) для определения средней длины теломер в рамках проекта COGS: выявленные локусы слабо связаны с риском рака, связанного с гормонами. Молекулярная генетика человека. 2013: ddt355.

26. Perneger TV. Что не так с настройками Бонферрони. Bmj. 1998; 316: 1236-1238.

27. Габриэль С., Зиаугра Л., Таббаа Д. Генотипирование SNP с использованием платформы Sequenom MassARRAY iPLEX. Текущие протоколы в генетике человека. 2009: 2.12. 11-12.12. 16.

28. Томас Р.К., Бейкер А.К., ДеБиази Р.М., Винклер В., Лафрамбуаз Т., Лин В.М., Ван М., Фенг В., Зандер Т., МакКонаилл Л.Е.Профилирование высокопроизводительных мутаций онкогенов при раке человека. Генетика природы. 2007; 39: 347-351.

29. Адамек К. Пример использования непараметрического критерия. Тест X2 для сравнения 2 независимых примеров. Ceskoslovenské zdravotnictví. 1964; 12: 613.

30. Бланд Дж. М., Альтман Д. Г.. Примечания к статистике. Отношение шансов. BMJ (под ред. Клинических исследований). 2000; 320: 1468.

31. Yong Y, Lin H. SHEsis, мощная программная платформа для анализа неравновесия по сцеплению, конструирования гаплотипов и генетической ассоциации в локусах полиморфизма.Клеточные исследования. 2005; 15: 97-98.

Достижения в идентификации клинических изолятов дрожжей с помощью матричной лазерной десорбционной ионизации – времяпролетной масс-спектрометрии

РЕЗЮМЕ

Матричная лазерная десорбционная ионизация – времяпролетная масс-спектрометрия (MALDI-TOF MS) идентификация на основе внедряется клиническими лабораториями для повседневной идентификации микроорганизмов. На сегодняшний день большинство исследований сосредоточено на эффективности и оптимизации MALDI-TOF MS для идентификации бактериальных изолятов.Мы рассматриваем недавнюю литературу, описывающую использование MALDI-TOF MS для рутинной идентификации различных дрожжей и дрожжеподобных изолятов. Конкретные темы включают влияние оптимизированных или оптимизированных методов экстракции, измененные пороги оценки, расширенные справочные библиотеки и возможность проведения тестирования на чувствительность к противогрибковым препаратам с использованием MALDI-TOF MS.

ВВЕДЕНИЕ

Инфекции, вызываемые патогенными дрожжами и дрожжеподобными организмами, могут варьироваться от легкого раздражения слизистых оболочек до тяжелых инвазивных заболеваний.Серьезные инфекции, вызываемые дрожжами, заметно увеличились в начале 1980-х годов, поскольку использование иммуносупрессивной терапии после трансплантации органов и костного мозга и появление ВИЧ / СПИДа увеличили уязвимость населения к этим условно-патогенным микроорганизмам. Смертность в результате заражения дрожжевыми грибами, такими как Candida и Cryptococcus spp. пик пришелся на 1990 год в Соединенных Штатах со скоростью от 0,5 до 0,6 на 100 000 человек; однако Candida spp. продолжают оставаться четвертой ведущей причиной инфекций кровотока с общим показателем смертности 39.2% (1–3).

Как и в случае с любым инфекционным процессом, своевременное выявление инфекционного организма и тестирование на чувствительность к противомикробным препаратам играют ключевую роль в успешном ведении пациентов. Недавнее популяционное эпиднадзорное исследование, проведенное в двух крупных городах США, продемонстрировало изменение количества видов Candida, вызывающих инфекцию кровотока (BSI). В то время как Candida albicans составляла большинство случаев кандидемии в начале 1990-х годов, общая доля кандидемии, вызванной C. albicans, упала до 38% к 2011 году (4).Это сопровождалось увеличением доли кандидемии, вызываемой другими видами, включая Candida glabrata (29%), Candida parapsilosis (17%) и Candida tropicalis (10%). Кроме того, от 1 до 2% кандидемии были приписаны Candida krusei. Растущая распространенность видов, отличных от C. albicans, может усложнить выбор эмпирической терапии из-за преобладания устойчивости к противогрибковым препаратам среди этих видов. 10-летнее исследование тенденций устойчивости более 200000 изолятов показало, что устойчивость к флуконазолу составляет 15.7% (от 15,4 до 19,2%) у C. glabrata, 4,1% (от 3,6 до 4,5%) у C. tropicalis и до 79,3% (от 65,8 до 79,3%) у C. krusei (5). Следует отметить, что 59% устойчивых к флуконазолу изолятов C. glabrata также были устойчивы к вориконазолу, в то время как только 9,2% изолятов C. krusei были устойчивы к обоим препаратам. Это контрастирует с устойчивостью C. albicans к флуконазолу, которая остается <1,5% (5). В ответ на увеличение доли инфекций Candida, вызываемых устойчивыми к флуконазолу микроорганизмами, руководящие принципы, разработанные Американским обществом инфекционных болезней (IDSA), поддерживают использование эхинокандинов для эмпирической терапии кандидемии; однако они рекомендуют перейти на флуконазол, если идентифицированный изолят может быть чувствительным (6).Особый интерес представляют инфекции, вызванные C. parapsilosis, которые демонстрируют значительно повышенные МИК ₅₀ и МИК ₉₀ по сравнению с обычными эхинокандинами in vitro (4, 7). Согласно последним рекомендациям Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) и определенным для вида контрольным точкам (8, 9), большинство изолятов с повышенными МПК все еще попадают в категорию «чувствительных»; однако в одной серии случаев 38% изолятов C. parapsilosis имели МИК к каспофунгину, что помещало их в категорию «нечувствительных» (10).По этим причинам рекомендуется тщательно наблюдать за людьми, инфицированными C. parapsilosis, на предмет клинического ответа или переводить их на терапию с использованием азола (6). Кроме того, хотя и редко, другие дрожжи или дрожжеподобные организмы, такие как Trichosporon, Rhodotorula, Saccharomyces и Geotrichum spp., Редко выявлялись как причина инфекций кровотока у пациентов с гематологическими злокачественными новообразованиями (11). Следует отметить, что большой процент этих изолятов демонстрирует повышенные МИК in vitro для обычных противогрибковых препаратов, включая флуконазол и каспофунгин, хотя для этих организмов не установлены контрольные точки (11).

Матричная лазерная десорбционная ионизация – времяпролетная масс-спектрометрия (MALDI-TOF MS) — это метод мягкой ионизации, который генерирует спектральный профиль на основе белков или «отпечаток пальца», уникальный для данного вида. Анализ бактерий часто можно выполнить прямым нанесением изолята на планшет-мишень вместе с α-циано-4-гидроксикоричной кислотой или другим матриксным материалом. Возбуждение материала матрицы лазером катализирует перенос заряда на аналит и десорбцию с целевой пластины, таким образом производя заряженные частицы различных размеров, которые являются основой для создания спектральных профилей.Этот метод с большим успехом применялся для идентификации широкого спектра бактериальных изолятов. Сравнение двух имеющихся в продаже инструментов, Bruker Biotyper (Bruker Daltonik, Бремен, Германия) и Vitek MS (bioMérieux, Marcy l’Etoile, Франция) продемонстрировало схожую эффективность для идентификации бактериальных изолятов. В то время как некоторые исследования показали, что Bruker Biotyper обеспечивает более высокую долю идентификации с «высокой степенью достоверности» (94,4% против 88,8%) для всех протестированных изолятов и среди неферментеров (97.0% против 89,5%), другие исследования продемонстрировали лучшую эффективность Vitek MS для идентификации других подмножеств бактерий, включая анаэробы и стрептококки группы viridans (12-15). Независимо от используемой системы скорость идентификации стандартных клинических бактериальных изолятов с использованием MALDI-TOF приближается к 95%, а идентификация может быть завершена менее чем за 10 минут и со значительной экономией затрат на идентификацию (16–18). Эти результаты делают применение MALDI-TOF MS для идентификации клинических дрожжевых изолятов заманчивой перспективой.

Одним из препятствий для идентификации дрожжевых изолятов с использованием MALDI-TOF MS является наличие прочной клеточной стенки, которая препятствует прямому анализу дрожжей. Исследователи преодолели эту трудность, используя различные подходы к предварительной обработке, направленные на высвобождение внутриклеточных белков, которые являются основой для идентификации MALDI-TOF MS. В этом мини-обзоре исследуется текущая литература, касающаяся эффективности MALDI-TOF MS для идентификации дрожжевых изолятов. Выделены различные методы обработки дрожжевых изолятов перед анализом MALDI-TOF MS.К ним относятся методы анализа дрожжевых изолятов, культивируемых на твердой среде, и штаммов дрожжей, выделенных непосредственно из положительных культур крови. Мы также рассматриваем влияние улучшенных справочных библиотек и измененных пороговых значений идентификационной оценки на окончательный уровень идентификации. Наконец, мы исследуем возможность быстрого тестирования чувствительности дрожжевых изолятов с помощью MALDI-TOF MS.

СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ ДРОЖЖЕЙ И ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ОРГАНИЗМОВ

Современные методы идентификации дрожжей и дрожжеподобных организмов в значительной степени зависят от физических характеристик и биохимических свойств изолята.Простые быстрые тесты, такие как тест зародышевой трубки, часто используются для быстрой и предположительной идентификации C. albicans. Однако не все изоляты C. albicans продуцируют зародышевые трубочки, и другие виды Candida, в первую очередь C. tropicalis и C. dublinensis, также могут образовывать аналогичные структуры, которые могут быть ошибочно приняты за зародышевые трубочки (19). Точно так же положительный тест на быструю ассимиляцию трегалозы (RAT) может предположительно идентифицировать C. glabrata, но некоторые виды, включая C. tropicalis, могут давать ложноположительные результаты, если тест выполняется неправильно (20).Из-за этих ограничений быстрые тесты часто необходимо подтверждать с помощью дополнительных методов. Такие методы основаны на панелях биохимического и углеводного использования, которые коммерчески доступны в ручном (API ID 20C и API ID 32C) и полуавтоматическом (Vitek ID YST и Phoenix Yeast ID) форматах (bioMérieux, Marcy l’Etoile, Франция, и BD, Sparks). , Д.м.н.). Эти тесты правильно идентифицируют от 90 до 98% обычных дрожжей, но могут не идентифицировать другие менее распространенные изоляты, достигая только 60% правильной идентификации в некоторых исследованиях (21, 22).Кроме того, время цикла (TAT) для этих тестов может составлять от 24 до 72 часов после выделения дрожжей в чистой культуре (21, 22). Из-за присущих или предсказуемых паттернов резистентности среди некоторых видов дрожжей более быстрый метод идентификации может быть полезен лечащим врачам при рассмотрении противогрибковой терапии.

Более быстрые методы идентификации дрожжей в клинических образцах включают хромогенную среду и анализы на основе нуклеиновых кислот. Хромогенные среды позволяют предположительно идентифицировать дрожжи на основе дифференциального использования хромогенных субстратов, добавленных в среду, в результате чего колония характерно окрашена, уникальная для каждого вида.Этот метод может быть выгодным, поскольку он позволяет предположительно идентифицировать дрожжи без выделения колоний из чашки с первичным образцом. Кроме того, хромогенная среда может помочь в идентификации смешанных дрожжевых культур (23, 24). Прямой посев культур крови, содержащих дрожжи, на хромогенную среду не показал никакого влияния на цвет образующихся колоний, что позволяет предположить, что этот метод может быть полезен для идентификации дрожжей в положительных культурах крови (23). Однако широкое применение хромогенной среды ограничено двумя ключевыми факторами.Во-первых, эти среды обычно способны различать ограниченное количество дрожжей (например, C. albicans, C. glabrata, C. krusei, C. tropicalis и Saccharomyces). Во-вторых, несколько видов дрожжей могут иметь одинаковый цвет на этих средах, что может влиять на специфичность (23, 24).

Другим методом быстрой идентификации дрожжей является флуоресценция пептидов и нуклеиновых кислот гибридизация in situ (PNA FISH). Ряд одобренных FDA анализов, основанных на технологии PNA FISH для обнаружения дрожжей, доступен и прошел оценку (25–27).Преимущество PNA FISH по сравнению с хромогенной средой состоит в том, что он не зависит от роста изолята для предполагаемой идентификации. Это позволяет идентифицировать выбранные виды дрожжей непосредственно из положительных культур крови всего за 2 часа с чувствительностью от 97,5% до 100% (25, 26). Будучи более специфичной, чем хромогенная среда, PNA FISH также ограничена по количеству видов, которые можно идентифицировать, и сообщалось о перекрестной реактивности зондов с другими видами дрожжей (25).

ПРИМЕНЕНИЕ MALDI-TOF MS ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ДРОЖЕЙ В КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ

Идентификация изолятов, выращенных на чашках (методы экстракции в пробирках).Первые попытки идентифицировать дрожжевые изоляты с помощью MALDI-TOF MS были выполнены с использованием чистых изолятов, культивированных на твердой среде. В первую очередь это включало культивирование дрожжей на декстрозном агаре Сабуро в течение 48 часов при 30 ° C перед анализом MALDI-TOF MS, хотя следует отметить, что увеличенная инкубация до 96 часов и культивирование на альтернативных твердых средах, включая кровь, шоколад, ингибиторы плесени. агар (IMH) и хромогенная среда не оказали существенного влияния на окончательные результаты идентификации (28–30). В отличие от анализа бактерий, для экстракции грибковых белков требовалась предварительная обработка дрожжевых изолятов.Метод экстракции белка, используемый для обработки дрожжевых изолятов для MALDI-TOF MS, был адаптирован непосредственно из установленных методов, используемых для идентификации сложных бактериальных изолятов. В частности, от 1 до 5 колоний изолята инактивировали в 75% этаноле, осаждали и затем суспендировали в смеси 70% муравьиной кислоты и ацетонитрила 1: 1. Затем полученный супернатант анализировали с помощью MALDI-TOF MS. Этот метод позволил получить качественные спектры белков и идентифицировать 92 вида на уровне рода или вида.От 5% до 98,2% всех дрожжевых изолятов и правильная степень идентификации от 99,3% до 100% (29, 31, 32) (Таблица 1). Наилучшие результаты наблюдались у Candida spp., Для которых 96,0–100% изолятов были идентифицированы со 100% точностью (29, 31, 32). Применение этого метода к дрожжеподобным изолятам, не относящимся к Candida (Trichosporon, Geotrichum), было значительно менее успешным, в результате было идентифицировано только от 41,2% до 61,9% изолятов (31, 32). Этот недостаток отражал отсутствие эталонных спектров для этих родов или видов в библиотеке MALDI-TOF MS, а не недостаточную обработку, потому что (i) идентификация изолятов, присутствующих в библиотеке, достигла> 99%, и (ii) добавление спектров от типа Изоляты штаммов, соответствующие неидентифицированным штаммам, дали правильную идентификацию при повторном анализе (31, 32).